Культивирование бактерий

Стандартные приемы стерилизации жидких сред описываются в гл. 23 этого руководства. Для предотвращения распада термолабильных компонентов среды используют стерилизацию фильтрованием. Небольшие объемы простых сред, используемых для культивирования бактерий, автоклавируют непосредственно перед их использованием, но для автоклавирования больших объемов [c.407]

Бутыли довольно часто используются для выращивания многолитровых культур бактерий в жидких средах, но существует несколько факторов, ограничивающих их применение. Так, при работе с большими стеклянными бутылями приготовление сред, их стерилизация и инокуляция сильно усложняются. Кроме того, встряхивание заполненных средой бутылей при аэробном культивировании микроорганизмов небезопасно. (Правда, при работе с пластмассовыми бутылями опасность значительно меньше.) В больших бутылях очень трудно перемешивать среду даже с помощью мешалок, поэтому создать в них достаточно высокую концентрацию кислорода — задача не из легких. Хотя при крупномасштабных работах часто приходится готовить среды в больших бутылях, культивирования бактерий в них следует по возможности избегать. [c.387]

Учитывая практически неограниченные ресурсы целлюлозу-содержащего сырья и низкую его стоимость, в течение продолжительного времени ведутся научно-исследовательские работы по получению микробного белка путем культивирования бактерий и грибов, обладающих целлюлазной активностью, на средах, содержащих целлюлозу. Ставится цель заменить кислотный гидролиз целлюлозы на ферментативный и совместить операцию осахаривания с выращиванием продуцента белка. [c.117]

Е. соИ можно культивировать как в аэробных (в присутствии кислорода), так и в анаэробных (без кислорода) условиях. Однако для оптимальной продукции рекомбинантных белков Е. соН и другие микроорганизмы обычно выращивают в аэробных условиях. Если целью культивирования бактерий в лаборатории является синтез и выделение определенного белка, то культуры выращивают на сложных жидких питательных средах в колбах. Для поддержания нужной темпера- [c.26]

Культивирование бактерий представляет собой процесс увеличения концентрации некоторых или всех компонентов популяции. Обычно характеристики этого процесса устанавливаются путем измерений тех или иных его показателей. Чаще всего измеряют увеличение числа клеток или клеточной массы (биомассы). Реже рост оценивают по синтезу макромолекул, когда увеличение количества белка, рибонуклеиновых кислот, липидов или других макромолекул отражает увеличение биомассы и числа клеток (сбалансированный рост). Однако один или несколько из этих показателей могут не зависеть от других (несбалансированный рост). Например, на ранней и поздней стадиях роста периодической культуры увеличение биомассы непропорционально числу клеток. В гл. И обсуждаются основные аспекты роста бактерий, методы его измерения и допущения, необходимые при использовании каждого метода. [c.374]

Бактериологическое исследование основано на культивировании бактерий на питательных средах, выделении чистой культуры возбудителя и ее идентификации. Чистой культурой называют популяцию микроорганизмов одного вида, как правило выращенную из изолированной колонии на плотной питательной среде. Разрешающая способность метода составляет в среднем 1000 клеток в 1 мл. [c.25]

Обогащенные среды можно приготовить на основе простых, включив в их состав кровь, гемин, сыворотку, асцитическую жидкость и др. Такие среды используют для культивирования бактерий со [c.26]

Связь капсулы с клеточной стенкой различна. Некоторые бактерии синтезируют слизистые вещества, легко отделяемые от клеток, особенно при культивировании в жидкой среде. Наоборот, у других связь между капсулой (особенно микрокапсулой) и клеточной стенкой столь прочна, что такую капсулу иногда предлагают рассматривать как часть клеточной стенки. Наличие капсулы зависит от штамма микроорганизма и условий его культивирования. Бактерии, образующие капсулу, могут [c.27]

Для чистой воды pH 7,07. Чем выше кислотность, тем ниже числовое значение pH, чем выше щелочность, тем больше числовое значение pH. Нижний предел pH — О, верхний — 14,0. Среды, используемые для культивирования бактерий, должны иметь pH 7,2—7,4 для дрожжей — 6,0—6,5 для микроскопических грибов — 5,0—6,0. Изменение концентрации водородных ионов резко сказывается на развитии всех физиологических функций микроорганизмов. С изменением pH меняется проницаемость клеточной оболочки, а следовательно, и условия питания. Ускоряется или тормозится деятельность микробных ферментов. [c.87]

Рис. 17. Схема лабораторной установки для непрерывного культивирования бактерий I — сосуд 2 — трубка для выхода воздуха во время заполнения 3 — трубка, для заполнения новой средой сосуда / 4 — вход воздуха взамен вытекающей среды 5 — промежуточный цилиндр 5 —зажимы 7 — регулирующая воронка 8 — штатив для передвижения воронки 9 — счетчик капель 10 — культиватор 11 — выход воздуха 12 — предохранительный затвор 13 — предохранительный наконечник для выхода избытка культуральной жидкости 74—сборник 15 — сосуд для увлажнения и обогрева воздуха 16 — контактный термометр /7 — мешалка 18 — обогревающее устройство 19 — водяная баня 20 — регулятор давления 2/— вход сжатого воздуха 22 — реометр 23 — ватный фильтр.

НЕПРЕРЫВНОЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЕ БАКТЕРИЙ ПРИМЕНИТЕЛЬНО К ОЧИСТКЕ СТОЧНЫХ ВОД АКТИВНЫМ ИЛОМ В АЭРОТЕНКЕ [c.90]

Выделение и культивирование бактерии. Для выделения чистой культуры используют гемолимфу больных насекомых. Предварительно поверхностные части личинок стерилизуют 0,5 /Ь-ным раствором хлорного натрия (3 раза по 15 минут), встряхивая их в колбе, с последующей промывкой в дистиллированной воде. Затем фильтровальной бумагой с личинки удаляют оставшуюся воду и прокалывают ее иглой. Вытекающую гемолимфу собирают стерильным тампоном и наносят на поверхность агара. При работе со спорами бактерии каплю гемолимфы наносят на предметное стекло, дают ей растечься по стеклу и после высыхания, до посева спор на среду, пастеризуют инокулюм при 75° С в течение 15 минут. [c.220]

В зависимости от степени чистоты и качества различают фотографич., пищевую и техпич. Ж. Первую применяют в произ-ве фото- и кинопленок, фотопластинок и фотобумаги. Пищевую Ж. используют в кулинарии, в кондитерском деле, в виноделии и пивоварении техническую — в бумагоделательной, полиграфич. и в др. отраслях пром-сти. Ж. применяется также в медицине (напр., как кровеостанавливающее средство) и в качестве питательной среды для культивирования бактерий. [c.9]

Одно из интенсивно развивающихся направлений биотехнологии связано с получением микробных метаболитов. В промьпиленных масштабах производится большой ассортимент антибиотиков, ферментов, аминокислот, витаминов, органических кислот и растворителей, полисахаридов. Их производство, основанное на культивировании бактерий, грибов и дрожжей, в качестве обязательной включает стадию отделения биомассы от нативного раствора метаболита. Анализ литературных данных показьшает, что при отделении биомассы и на ряде других стадий производства микробных метаболитов целесообразно применение флокулянтов. [c.128]

Для культивирования бактерий используют питательные среды, к которым предъявляется ряд требований. [c.6]

В процессе промышленного культивирования бактерий вначале производится выращивание посевного материала (15—20 дней) в аппаратах емкостью 250 м , затем посевной материал подается в железобетонные ферментеры емкостью 4200 м в которых происходит метановое брожение. Свежая барда подается в нижнюю часть ферментера в количестве 25—30 % от его объема за сутки. Отбор метановой бражки, содержащей витамин В 2, производится в верхней части ферментера. В течение рабо- [c.286]

Авторы показали, что бактерии, растущие при избытке метана, могли одновременно окислять и другие газообразные углеводороды, не используемые самостоятельно в качестве углеродного источника питания. При культивировании бактерий в метано-этановой атмосфере после 48— 60 час. инкубации в культуральной среде удалось обнаружить этанол [c.144]

Способы культивирования бактерий значительно различаются, причем это зависит не только от потребностей организма, но и от того, для чего будет использоваться культура. Для выделения чистых культур, определения числа жизнеспособных клеток в популяциях и для многих других целей широко используются твердые среды. Гелеобразующие вещества и специальные методы приготовления твердых и полужидких сред рассматриваются в гл. 9. В гл. 10 описываются различные системы для жидких культур стационарная, или периодическая, проточная, диализная —и другие специальные системы, а также методы сбора, отмывки и учета урожая бактерий. [c.163]

Все среды, используемые для культивирования бактерий, перечислить невозможно, поэтому в приведенных ниже таблицах даны ссылки на среды, в которых выращивают чистые культуры большинства известных родов. [c.212]

Подходящим сосудом для такого способа культивирования бактерий является колба Эрленмейера имеющиеся у ее основания выступы удерживают агар при встряхивании колбы на качалке. Для этих же целей пригодны прямоугольные сосуды. Если во время инкубации на качалке агар раскалывается, то следует использовать среду с более высоким содержанием отвер- [c.364]

В этой главе рассматриваются методы культивирования бактерий в жидких средах объемом от 10 мл до 100 л. Они пригодны для выращивания чистых культур бактерий в водной среде с различной степенью контроля за физическими условиями. После небольшой модификации методы можно использовать для смещанного культивирования двух или большего числа видов бактерий. Однако в задачи данной книги не входит обсуждение этого интересного раздела роста бактериальных культур. [c.374]

В качестве сосудов для получения биомассы в лабораторных условиях или на первом этапе в промышленных процессах, включающих периодическое культивирование бактерий в жидкой среде, широко используются колбы Эрленмейера объемом от 100 до 2000 мл. При этом для облигатных или факультативных аэробов подбираются максимально эффективные условия подачи воздуха (кислорода), а для анаэробов — такие же условия удаления воздуха. [c.383]

Ферментеры, или реакторы с мешалкой для культивирования бактерий, устроены таким образом, что обеспечивают постоянство среды. Рабочий объем ферментеров колеблется от 500 мл до тысяч литров. Обычные лабораторные ферментеры имеют рабочие объемы от 1 до 20 л. Поскольку они предназначены для того, чтобы максимально уменьшить температурный и химический концентрационный градиент в культуре, среда в них должна перемешиваться таким способом, чтобы достигалось быстрое и полное смешение всех компонентов жидкой фазы. В случае недостаточного перемешивания возникают застойные зоны, что приводит к появлению неконтролируемых локальных градиентов концентраций. Если перемешивание слабое, то популяция клеток будет сильно гетерогенной. Например, при слабом перемешивании аэробных культур контакт между кислородом воздуха и жидкой средой недостаточен, поэтому в некоторых участках ферментера могут создаваться почти анаэробные условия, что лимитирует рост культур. Если куль- [c.388]

К специфическим преимуществам использования диализа при культивировании бактерий относятся 1) удлинение экспоненциальной фазы роста в периодической культуре, что позволяет получать высокие плотности живых клеток 2) увеличение стационарной фазы роста культур, что позволяет увеличить выход метаболитов, связанных с этой фазой 3) ослабление контроля путем ингибирования продуктом за счет удаления или [c.418]

Рис. 10.9. Система для культивирования бактерий в диализном мешке. Трубка диализной мембраны свернута таким образом, что образует мешок с двойными стенками (3), в наружных полостях которого содержится культура (2). Среда (1) помещена в оплетенную бутыль. Имеются также трубка для инокуляции и внесения проб (5) и сифон для отбора культуры (4) [53].

Наличие капсулы зависит от штамма микроорганизма и условий его культивирования. Бактерии, образующие капсулу, могут легко в результате мутации превращаться в бескапсульные формы, что не приводит к какому-либо нарушению клеточной активности, поэтому капсулы нельзя рассматривать как обязательный структурный компонент прокариотной клетки. [c.38]

Бактерии Flavoba terium aurantia um и бактерии из рода Pseudomonas снижают концентрацию афлатоксина В в среде, что вызвано защелачиванием среды в процессе культивирования бактерий, так как при использовании среды с высокой буферной емкостью ни один из штаммов этого рода токсины не разрушал. [c.388]

Среды, уплотненные агар-агаром, при культивировании бактерий ие изменяют своей консистенции лишь очень немногие бактерии заметно разрушают агар-агар. Среды с желатином разжижаются очень многими бактериями с резко выраженными протеолитическими свойствами. Этот признак всегда используется для характеристики и определения вида бактерий. Определяется гидролиз крахмала. По характеру роста на жидких питательных средах также судят о некоторых свойствах изучаемой культуры. Образование пленки или кольца на стенках пробирки, равномерное помутнение или выпадение хлопьевидных или пылевидных осадков составляют дополнительную характеристику вида. Учитываются максимально физиологические и биохимические признаки окислительно-восстановительные функции, в частности редукция метиленовой сини и нитратов, образование индола, сероводорода, ам.миака, свертывание молока, иептонизация казеинового сгустка, сбраживание сахаров с образованием кислот и газов либо с образованием только кислот. Чем подробнее будет дана характеристика культуры, тем надежнее результаты ее идентификации. [c.53]

Усгранеиия или ограничения вредного действия продуктов метаболизма бактерий при выращивании их на питательных средах можно достигнуть путем культивирования бактерий в непрерывно сменяющейся питательной среде, Harris, Powell (1951) сконструировали спе- [c.64]

В опубликованной в 1958 г. статье А. И. Изьюровой [4] указывается на возможность разрущения нефтяных масел специально культивированными бактериями. Для опытов применялся активный ил при концентрации 2 г/л по сухому веществу. В результате такого окисления, по данным автора, при начальном содержании нефти 0,3 г/л через 22 часа аэрирования ло-стигалось полное окисление нефти. [c.19]

Исходя из этих наблюдений, Бухер [41] разработал среду для культивирования бактерий, на которой ему удалось вырастить культуру в анаэробных условиях. Основой среды является вытяжка из листьев кормовых растений гусениц. Для приготовления [c.238]

Культивирование бактерий, согласно технологическому процессу, осуществляется на водной, жидкой питательной среде с начальным содержанием 0,500—0,600 мг% сахара и ассимилируемого азота и различных элементов магния, серы, натрия, калия и других, стерилизуемых при 130° С в течение 60 минут в установках ферментирования или посредством постоянной системы, когда действуют крупные ферментёры. [c.402]

Время удвоения гриба в культуре составляет 5,5 ч, т. е. он растет медленнее, чем бактерии. В качестве источника углерода и энергии гриб использует глюкозу, которую получают из любого достаточно дешевого сырья, содержащего крахмал, например кукурузы, пшеницы, риса, картофеля или мелассы. Гриб образует 0,5 кг сухой биомассы на килограмм использованного сахара. Преимушеством грибов является способность расти при довольно кислых pH, при которых подавляется рост бактерий, что снижает риск загрязнения культуры. Fusarium растет при 30 °С в условиях непрерывного культивирования. Как и при культивировании бактерий, источником азота являются соли аммония, и для поддержания роста в среду добавляют минеральные соли. Как во всех описанных выше процессах, необходима аэрация и охлаждение среды, а все используемые материалы должны быть простерилизованы. Перемешивание среды достигается с помощью особого механизма аэрации. В данном случае исключено применение механических мешалок, поскольку гифы опутывают их, из-за чего нарушается равномерное распределение гиф внутри ферментера. Механизм называется воздушным лифтом , потому что культура непрерывно циркулирует, совершая один оборот каждые 2 мин под действием воздуха, который продувается через вертикально расположенную удлиненную петлю высотой 40 м. Объем ферментера составляет около 40 ООО дм . Так как это непрерывный процесс, из ферментера постоянно отбирают продукт и добавляют свежую среду. [c.79]

Широкомасштабное производство кормовых белков на основе использования метанола впервые было организовано в Англии. Концерном Ай-Си-Ай выпускается кормовой белковый препарат с коммерческим названием Прутин . В нашей стране также разработана технология получения бактериальной белковой массы из метанола, коммерческое название препарата — Меприн . Он содержит в своем составе до 70—74 % от сухой массы белков, до 5 % липидов, около 10 % минеральных веществ, 10—13 % нуклеиновых кислот. На основе культивирования бактерий рода A inetoba ter разрабатывается технология получения кормового белка из этанола (название препарата Эприн ), который может иметь также и пищевое назначение. [c.267]

Системы аэрации при культивировании бактерий подробно обсуждаются в гл. 10, а также в работах Пир-та [10] и Уэнга и др [15]. [c.179]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология