Биотест

В последние годы на смену биотестам in vivo на лабораторных животных приходят методы биотестирования in vitro с использованием антител, тканей-мишеней, иммобилизованных клеток-мишеней. [c.314]

Газовая стерилизация. Этот метод применяется для обработки оптики, кардиостимуляторов, сложной техники (аппаратов искусственного кровообращения), изделий из полимеров, стекла, металлов. Используют окись этилена или смесь ОБ (окись этилена с бромистым метилом), озон, а также пары раствора формальдегида в этиловом спирте, которыми наполняют стационарные газовые стерилизаторы или портативные анаэростаты. Для поддержания температуры (35 или 55 °С) анаэростаты помещают в термостат или водяную баню. Для упаковки используют полиэтиленовую пленку (два слоя), пергамент и специальный упаковочный материал. Выбор метода и режима газовой стерилизации зависит от вида стерилизуемого изделия (например, смесью ОБ разные изделия стерилизуют от 4 до 16ч). Стерилизованные газом изделия применяют после их выдержки (в течение 1 — 21 сут) в вентилируемом помещении. Срок сохранения стерильности для изделий в упаковке из полиэтиленовой пленки — 5 лет, пергамента или бумаги — 20 сут. Контроль процесса ведут по показаниям приборов (термометров, мановакуумметров), а контроль эффективности стерилизации — с помощью биотестов. [c.440]

В предварительном эксперименте могут быть использованы тест на прорастание семян, опыты с проростками. Принцип теста основан на наличии зависимости между концентрацией вещества в почве и степенью воздействия иа биотест. Показателями воздействия являются всхожесть семян, длина проростков, выраженная в процентах по отношению к контролю. Действующей считается та концентрация, которая вызывает торможение развития корней проростков не менее, чем на 20% относительно контроля. [c.124]

В последние годы, благодаря быстрому развитию биотехнологии клеточных культур, стало возможным использовать иммобилизованные монослои клеток-мишеней в биотестах — высокочувствительных специфических системах, предназначенных для количественного определения ряда биологически активных веществ. Основные принципы, лежащие в основе метода биотестирования, иллюстрирует рис. 10.1. [c.318]

Применение хроматографического разделения позволило в 50-х годах обнаружить еще один класс регуляторов — природные ингибиторы роста растений. В течение почти двух десятилетий природные ингибиторы роста изучались на целом ряде биотестов. Было обнаружено, что они принимают активное участие в процессах вхождения растений в покой, в коррелятивном торможении роста, в опадении листьев, в торможении роста стебля и отдельных его частей, а также в торможении прорастания семян. [c.9]

В России накоплен значительный экспериментальный материал, позволяющий судить о действии многих химических соединений на представительные группы водных и ряда других организмов. Однако широкое использование биотестов сдерживается в первую очередь отсутствием нормативно-правовых основ. За рубежом биоиндикация и биотестирование предусмотрены рядом национальных и международных программ по токсикологическому контролю зафязнений окружающей среды. [c.104]

Ко второй группе относят функционально-специфические методы (или биотесты) определения биологической активности гормонов. Они основаны на сопоставлении действия гормонов на физиологические функции органов или клеток-мишеней. Благодаря функциональной специфичности ответа ткани-мишени, она будет узнавать только молекулы, обладающие по отношению к ней определенной биологической активностью, в то время как другие молекулы, даже с очень сходной структурой, никакого ответа в клетках-мишенях не вызовут и, следовательно, не будут определены с помощью данного биотеста. Необходимо отметить, что величина специфического ответа клеточной культуры на действие гормона пропорциональна количеству занятых рецепторов клеточной поверхности и поэтому зависит от концентрации биологически активного вещества в пробе, действию которого подвергают ткань-мишень. На практике при биотестировании сравнивают величины ответа ткани-мишени после инкубации с тестируемым и контрольным (стандартным) растворами. [c.318]

Особое значение в выяснении свойств и особенностей ауксинов и гиббереллинов сыграли специфические биотесты (биопробы). Так, для обнаружения ауксинов использовался рост колеоптилей и их отрезков. Гиббереллины на рост этих тестов не влияли, но усиливали рост этиолированных стеблей и прорастание семян тех растений, которые к ауксинам не были чувствительны. Характерно, что гиббереллины стимулируют рост стеблей целых растений, в то время как ауксины — преимущественно рост отрезков стеблей или корней. [c.8]

В качестве биотестов используются различные виды животных и растений или микроорганизмы. Биологический мониторинг проводится на популяционном и индивидуальном уровне. В качестве основных индикаторов могут использоваться морфологические показатели [c.318]

Бактериологический контроль осуществляют с помощью биотеста стерилизации. Биотест стерилизации — объект из установленного материала, обсемененный тест-микроорганизмами, предназначенный для контроля эффективности стерилизации определенным стерилизующим средством. [c.21]

М. В биотестах линейный ответ при 5-10 -5-10 М (увеличение размеров листа редиса), 510 -- [c.205]

Прогресс в исследовании фитогормонов в значительной мере объясним успехами в технике их очистки и препаративного выделения. Начиная с 1952 г. в практике изучения природных ростовых веществ используется хроматографическое разделение растительных экстрактов. В сочетании с биотестами указанный прием позволил обнаружить в тканях растений ауксины, гиббереллины и кинины. И до настоящего времени эти методы анализа остаются ведущими в исследовании свойств природных регуляторов роста. [c.9]

В связи с разработкой биотестов стал возможным комплексный анализ ряда гормонов с помощью как структурно-специфических, так и функционально-специфических методов, что позво- [c.318]

Максимальные термометры, физико-химические и биотесты помещают в определенные точки аппарата. Показателями эффективной работы стерилизационной аппаратуры являются отсутствие роста тест-культуры в сочетании с удовлетворительными результатами физического и химического контроля. [c.438]

Сл. основание. рК (25°С) 5,48. i 170,5. Раств-сть р. EtOH ум. р. хол. HjO, более р. гор. HjO ум. р. эф. н. р. бенз., петр. эф. Проявляет некоторую активность цитокинина в биотестах по старению листьев и продуцированию пшментов (5-10 М), но не в стимуляции клеточного деления или мобилизации метаболитов. [c.202]

В целом следует признать, что биотесты представляют собой удобные методы, позволяющие обнаружить активность фитогормонов или ингибиторов. Этими методами целесообразно пользоваться на начальном этапе работы при первичном выделении чистого продукта из тех или иных сложных органических субстратов. Однако и на различных ступенях химической очистки также прибегают к методам биологического контроля фитогормонов (Муромцев, Русанова, 1966), тем более что химические методы идентификации фитогормонов или еще недостаточно чувствительны, или мало специфичны (Кефели и др., 1964 Романова, Иванова, 1970). [c.21]

Обычно биотестам должно быть присуще следующее 1) стандартность исходного материала 2) специфичность в отношении испытуемого гормона или ингибитора 3) простота подготовки теста к, анализу 4) активная реакция на вводимые извне регуляторы роста растений. [c.21]

В Волгу, бассейн которой обеспечивает питьевой водой более 60 млн. человек, ежегодно сбрасывается свьппе 20 км сточных вод, в том числе 2,5 км неочищенных и более 7 км загрязненных. Особенно высока загрязненность воды реки в районе расположения крупных промьпы-ленных предприятий и городов. Так, в Куйбышевском и Саратовском водохранилищах содержание хлорорганическнх соединений зачастую в десятки раз превьппает ПДК. Вода этих водосмов проявляет мутагеннуто активность, подтвержденную тремя разными биотестами [40]. [c.41]

Для приготовления биотестов могут быть использованы тест-микроорганизмы чистые культуры спорообразующих микро организмов В. 8иЬ11Из, В. з1еаго111егторЫ1и8 и др. [c.21]

Бесцв. газ, / -102,4, Раств-сть х, р, ЕЮН р. эф, н,р, Н2О, Действие см. Этефон, В тройном биотесте с горохом лин. ответ при 0,025-10 0,1 10 %, Для поглощения и удаления этилена из возд, использ, Hg lOi, [c.208]

Тест на рост отрезков колеоптилей пшеницы используется как для определения ауксинов, так и для определения природных ингибиторов роста. К гиббереллинам и кининам он практически не чувствителен. Недостатками этого метода являются трудоемкость препарирования отрезков колеоптилей, утомительная процедура выталкивания первичного листика из колеоптильного цилиндра, длительный процесс выбора сорта пшеницы, пригодного для теста. При подборе сорта для такого биотеста обычно руководствуются следующими требованиями 1) семена сорта должны обладать хорошей всхожестью 2) за 48 час. выращивания проростки должны достигать 18—20 мм длины 3) нарезанные колеоптили за инкубационный период должны прирастать таким образом, чтобы результаты промеров их приростов можно было уложить в одновершинную кривую Гаусса, что позволит определить степень стандартности материала 4) отрезки должны обладать хорошей чувствительностью к ИУК, т. е. прирост отрезка колеоптиля в растворе ИУК должен превышать прирост контрольного отрезка на 250—300%. [c.18]

Неоднократные результаты испытаний смесей (состав, % щебенка — 25 ГО — 5-10 песок — 55-80 битум — 6-9), проведенных в реальных условиях, показали, что концентрации ионов тяжелых металлов в грунте на придорожных участках незначительно превышают их в сравнении с удаленными от дороги, не приводят к изменению химсостава дренажных вод токсичность воды не выявлена ни по одному из биотестов. Сравнение опытного и контрольного участков длиной 500 м автомобильных дорог с неинтенсивным движением по содержанию в воздухе оксидов углерода, серы и азота, формальдегида, гш1ли, свинца, оксида цинка не выявило различий (Санитарно-...). [c.108]

Еще одним биотестом, используемым для обнаружения фитогормонов, является метод молодых колеоптилей пшеницы (Wright, 1961), которые после первых суток роста, будучи изолированными от зерновки, обладают повышенной чувствительностью к гибберелли-ну и кинетину. При инкубации на растворах этих веществ удается вызвать стимуляцию их роста даже дозой 10 М. Недостатком этого метода опять же является отсутствие его специфичности, так как колеоптили легко реагируют на оба фитогормона. [c.19]

Примером практического применения метода является разработанный в лаборатории Стефана Бидея (США) метод биотестирования тиреотропного гормона (ТТГ) с помощью иммобилизованных клеток щитовидной железы человека. Эти эксперименты позволили получить стандартный препарат бычьего ТТГ в качестве альтернативного вторичного стандартного препарата по отношению к менее доступным препаратам ТТГ человека в рутинных лабораторных биотестах. [c.319]

Иммобилизация клеток на твердой подложке в многолуночных полистирольных платах создает идеальные условия для выполнения различных операций при биотестировании. Так, значительно упрощаются процедуры введения и удаления тестируемых и стандартных препаратов. При этом клеточный монослой практически не нарушается. Уникальная пространственная конфигурация клеток, организованных в монослои, способствует быстрому и одновременному действию гормона на все клетки, благодаря чему достигается почти одинаковый ответ всех клеток. Так как повторы культур во всех лунках структурно идентичны, то с помощью иммобилизованных клеток удается достичь высокой чувствительности и хорошей воспроизводимости результатов. Основное требование, предъявляемое к биотесту, заключается в том, что каждая отдельная доза гормона должна быть проверена на достаточном количестве объектов или повторов. Это требование полностью удовлетворяется при использовании иммобилизованных клеток единственного монослоя, поскольку в пределах одной и той же платы все инкубационные лунки, а следовательно, и все монослои находятся в одинаковых условиях с точки зрения температуры, влажности, концентрации Og в воздухе и состава питательной среды. [c.320]

Классификация по природе процессов, используемых для получения аналитического сигнала. Тест-методы могут быть разделены на физические, химические, биохимические и биологические. Физических методов немного, и они не играют большой роли в практике химического анализа. Биохимические методы обычно основаны на использовании ферментов и иммуносистем. Выделенные природные ферменты, особенно иммобилизованные, в известной мере приобретают свойства химических реагентов, поэтому, несмотря на специфику ферментов как химических соединений (особенности происхождения, условия хранения, время сохранения активности), ферментные методы можно отнести к химическим. Иммунометоды больше тяготеют к биологическим методам. Биологические методы, базирующиеся на использовании микроорганизмов, органов, тканей и даже высокоорганизованных организмов и целых популяций, упомянуты только в разделе, посвященном определению суммарных показателей (биотесты). [c.211]

Биологические тесты используются при наличии отработанных методик, предварительно выверенных в лаборатории при строго контролируемых условиях и при различных диапазонах концентраций данного токсиканта, однако они не заменяют аналитические методы, так как у казывают лишь на факт присутствия в водоеме концентраций, соответствующих чувствительности данного теста. В отношении возможностей использования биотестов для количественного определения токсикантов зкоперименталь-ных данных пока мало, хотя при дальнейших разработках не исключена возможность применения биологических экспресс-тестов и для этой цели. [c.245]

Под биотестом понимают оценку (испытание) в строго определенных условиях действия вещества или комплекса веществ на водные организмы путем регистрации изменений того или иного биологического (или физиолого-биохимического) показателя исследуемого объекта, аравниваемого с контрольным. Подопытные организмы именуются тест-объектами (тест-организмами), а процесс проведения испытаний—биотестированием [97]. [c.151]

В изучении функций фитогормонов метод биопроб, или биотестов, сыграл и продолжает играть ведущую роль. Биотестом, или бионро-бой, считают такие объекты (растение или отдельные его части), которые обладают повышенной чувствительностью в отношении вводимых извне фитогормонов или ингибиторов. [c.17]

Одним из первых биотестов, применяемых для определения ауксинов, был разработанный Вентом тест на изгиб этиолированных колеоптилей овса (Went, 1926, 1963 Went, Thimann, 1937). Сущность этого теста состоит в следующем изолированный орган помещается на агаровый блок во влажную камеру, и после нескольких часов экспозиции агар переносится на этиолированный колеоптиль. По углу изгиба колеоптиля судят о содержании в нем ауксина. [c.17]

Значительно более распространены для обнаружения факторов клеточного деления (цитокининов) стерильно культивируемые каллусы сои, а также яблони. Для получения материала, используемого в качестве биотеста, каллусы, выращиваемые на среде с кинетином, проводят через ряд пассажей на среде без кинетина. Эта процедура позволяет вызвать ростовую реакцию у каллусов даже при введении 10 М раствора кинетина (Miller, 1963). [c.19]

Большинство методов определения гиббереллинов основывается на общем принципе — повышенной чувствительности стебля или отдельных его участков к этому фитогормону (Mi halski, 1967 Hoad, Kuo, 1970). Михальский (Mi halski, 1967) провел большую сравнительную работу по изучению разнообразных гиббереллиновых проб. Он обнаружил наибольшую чувствительность у салата Винтера, реагирующего на 10 ° г/мл гибберелловой кислоты. Однако чувствительность к фитогормону — это лишь одно из свойств биотеста. Другим его положительным качеством должна являться специфичность. Михальский показал, что специфическое свойство гиббереллинов — проявлять свое действие только на целом растении — исчезает, если в качестве теста использовать часть растения. Эта закономерность была прослежена на целых растениях риса, кукурузы, гороха, огурцов, салата. [c.20]

Биотесты варьируют в своей чувствительности по отношению к разным гиббереллинам, что представляет собой еще одну особенность гиббереллиновых биотестов. Так, один из тестов, например гипоко-тиль огурцов, чувствителен к гиббереллину А4, а гипокотиль салата — к Ат, в то время как карликовая кукуруза мутант dg лучше всего реагирует на гиббереллин — Ag (Mi halski, 1967). [c.21]

Кроме биотестов, в основе которых лежит рост, существуют и другие методы, основанные на действии фитогормонов на некоторые биохимические реакции. Так, для определения гиббереллинов использовали метод индукции а-амилазы в эндосперме ячменя (Paleg,. 1961), для обнаружения кининов применяли методы задержки разрушения хлорофилла (Osborne et al., 1961 Kende, 1964). [c.21]

Начиная с 20-х и кончая 50-ми годами текущего столетия, биотесты были единственным орудием в руках экспериментаторов, исследующих фитогормоны. С помощью этой высокочувствительной техники удалось вскрыть гормональную природу таких сложных явлений, как фото- и геотропизм, рост стебля и процесс корнеобразова-ния, однако при этом исследователи вынуждены были искать объекты, свободные от тормозящих факторов, для чего в опытах брали бесхлорофильные или этиолированные ткани. Введение в круг физиологических исследований метода хроматографии на бумаге в значительной степени изменило характер работ, проводимых в области физиологии роста, переведя их на уровень количественных определений отдельных хроматографически очищенных ростовых веществ. [c.21]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология