Иммунизация инъекции

Факторы иммунизации включают способ инъекции, использование или неиспользование стимулятора, частоту или число инъекций, количество вводимых белков. Инъекции могут выполняться внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно, подкожно, внутрикожно — последовательно или одновременно несколькими [c.95]

ГО серию инъекций повторяют. На четвертой неделе иммунизации под кожу животному вводят раствор антигена, содержащий 25 мг белка в последующие 3 дня вводят еще по 20 мг белка в ушную вену. На 7—9-й день после последней инъекции у животного берут кровь, получают сыворотку и определяют титр антител [11 ]. [c.117]

Если курс иммунизации животного-продуцента не закончился тотальным кровопусканием, то через некоторое время ему можно сделать повторную напоминающую инъекцию антигена в той же дозе и тем же способом, а через 7—9 дней можно взять кровь и получить иммунную сыворотку. [c.119]

Одна из нерешенных и ожидающих своего объяснения загадок иммунологии связана с тем, что животное после иммунизации бывает иногда способно сохранять невосприимчивость в течение многих лет или даже всей своей жизни. У таких животных в течение всего периода невосприимчивости можно обнаружить присутствие антител [136]. Очень трудно решить вопрос о том, сохраняются ли в организме этих животных небольшие количества антигена, активно способствующего образованию антител. Это, повидимому, имеет место при некоторых вирусных заболеваниях, сопровождающихся длительно сохраняющимся иммунитетом [2]. Небольшие количества ослабленного вируса могут сохраняться в организме и вызывать образование антител. Еще более поразительным примером может служить то, что введенные мышам в дозе 0,5 мг антигенные полисахариды пневмококков удается обнаружить в органах подопытного животного через несколько месяцев после инъекции [137]. Эти данные подтверждают ту точку зрения, что даже в тех случаях, когда иммунитет сохраняется в течение длительного периода времени, образование антител происходит таким же путем, как описано выше, т. е. путем изменения белкового синтеза под действием молекул антигена. Длительным пребыванием антител в тканях организма, возможно, объясняется также так называемая анамнестическая реакция, т. е. появление в организме значительных количеств антител в том случае, когда животному производится повторная инъекция небольшой дозы антигена через большой промежуток времени после первой инъекции. Наблюдаемое при этом внезапное увеличение титра антисыворотки обусловлено, повидимому, переходом антител из ткани в кровоток. Истинное новообразование антител в этих случаях никем до настоящего времени не было еще достаточно убедительно показано [139]. [c.350]

Применение и дозировка. Применяют для профилактики дифтерии и столбняка у детей в возрасте от 5—6 месяцев до 5 лет, переболевших коклюшем или привитых против коклюша, а также для иммунизации всех детей от 5 до 12 лет. Первичная вакцинация состоит из двух подкожных или внутримышечных инъекций по 0,5 мл с интервалом 40—45 дней и третьей инъекции в той же дозе через 6—12 месяцев. Ревакцинацию проводят дозой в 0,5 мл. [c.98]

Для целей анализа подбирают такие условия иммунизации животных, при которых образовывались бы антитела с максимальной специфичностью и прочностью связи с антигеном. В зависимости от структуры антигена и поставленной задачи для получения антител используют различные виды животных от мелких лабораторных (мыши, морские свинки, кролики, куры) до крупных (овцы, козы, лошади). После нескольких инъекций антигена в присутствии стимуляторов иммунного ответа в сыворотке крови накапливаются специфические антитела. При иммунизации крупных животных можно получать большие количества антител для практических целей. В последнее время для иммунизации стали использовать кур, у которых антитела накапливаются в желтке яиц, что упрощает их получение и выделение. [c.103]

Введение облученным мышам клеток только костного мозга (ККМ) или только тимуса (КТ) не обеспечивает развитие иммунного ответа достаточной силы. В то же время введение смеси этих клеток приводит к интенсивной продукции антител к использованному для иммунизации антигену (эритроцитам барана — ЭБ). Причем ответ при совместной инъекции клеток значительно выше, чем сумма ответов при раздельном введении клеток различного происхождения. Таким образом, кооперация двух типов клеток приводит к синергическому эффекту. Ответ оценивали по количеству бляшкообразующих (антителообразующих) клеток (БОК) в селезенке [c.240]

Способ введения антигена (подкожно, внутривенно, в лимфатический узел, внутрибрюшинно) и периодичность введения влияют на иммунологическую активность антисывороток. Так как иммунный ответ формируется в организме постепенно, принято различать первичный ответ (после первого введения антигена) и вторичный ответ (после повторных инъекций антигена). Первичные и вторичные антисыворотки отличаются по составу антител и их специфичности. Обычно высокоактивные антисыворотки получают после Нескольких циклов иммунизации. Однако очень длительные иммунизации могут привести к снижению специфичности из-за постепенного увеличения титра антител к примесным антигенам. [c.150]

Способы иммунизации. Введение иммуногена приводит к активации лимфоидных клеток, расположенных вблизи от места инъекции. Наиболее эффективно вводить иммуноген малыми порциями в большое количество точек. Введение иммуногена можно осуществлять различными способами. [c.151]

Для получения антисывороток с титром, удовлетворительным для проведения ИФА, часто требуется 4—5-кратное повторение циклов иммунизации. Отбор крови каждый раз проводится на 7— 9-й день после последней инъекции. [c.152]

Кровь берут из сердца на 7—9-й день после последней инъекции. Через месяц цикл внутривенной иммунизации. повторяют. [c.153]

Переносят готовую эмульсию обратно во флакон, а затем в 1—2-мл стеклянные шприцы со смазанными поршнями в объеме, требуемом для одной инъекции. Присоединяют иглу подходящего размера и убеждаются, что она плотно прилегает, поскольку во время инъекции скорее всего потребуется приложить значительное давление. Методика иммунизации с адъювантом подробно описана ниже (разд. 5.1.4). [c.66]

Подкожные инъекции. До 0,5 мл может быть введено под легко смещаемую кожу области лопаток или боковых отделов туловища с помощью 25-мм иглы № 20. Шерсть в области инъекции выстригают изогнутыми ножницами и протирают кожу спиртом. Таким образом обычно проводят бустерные иммунизации с адъювантами Фрейнда. [c.72]

Для получения преципитирующей антисыворотки с высоким титром и преобладанием IgG, например к гетерологично-1му сывороточному белку, 100—200 мкг белка эмульгируют в ПАФ и 0,5 мл вводят кролику в/м в бедро. Повторное введение проводят через 10—14 дней в другое бедро. Через 10 дней после второй инъекции можно взять пробу крови. Обычно для получения антисыворотки с высоким титром необходимы бустерные инъекции. Для этого разработаны несколько режимов иммунизации, и все они предусматривают период отдыха в течение 2—3 мес. [c.77]

Получение антител, специфичных к определенному белку, производится повторным инъецированием очищенного белка в организм животного кролика, морской свинки, овцы, козы, курицы, лошади, мыши. Процедура иммунизации остается пока еще эмпирической и зависит от иммуногенности конкретного белка. Так, для некоторых растительных белков достаточно для всякой процедуры иммунизации доли миллиграмма (некоторые ферменты типа а-амилаз, рибулозобисфосфаткарбоксилаза, ФЕП-карбокси-лаза), тогда как других белков (некоторые фракции проламинов семян) требуется несколько десятков миллиграммов (в очищенном виде), чтобы путем нескольких инъекций вызвать образование антител. [c.95]

Б. Курс иммунизации длится 4 нед. Однократная доза составляет 1—2 мл 1%-ного раствора белкового антигена. На первой неделе в первые три дня делают по одной инъекции в ушную вену. В каждую из последующих трех недель в первый день иммунизируют внутрибрющинно, а на второй и третий — внутривенно. Через неделю после иммунизации берут кровь, получают сыворотку и определяют титр антител. [c.117]

За процессом иммунизации можно следить иммуноэлектрофоре-тически, исследуя образцы, получаемые во время очередной инъекции антигена. [c.118]

Био синтез и получение индивидуальных иммуноглобулинов. Иммуноглобулины синтезируются в лимфоцитах, которые образуются при диф( ренциации лимфоидной стволовой клетки. В настоящее время общепринятой является так называемая теория клональной селекции, согласно которой каждый лимфоцит может синтезировать, вероятно, только один иммуноглобулин. Групйа лимфоцитов, специализировавшихся на синтезе какого-либо иммуноглобулина, называется клоном. При обычном иммунном ответе (действие нормальной микробной флоры или заражение) про- исходит образование многих различных лимфоцитов, иммуноглобулины которых направлены на различные участки молекулярной структуры антигена. Такой ответ называется поликлональным. В некоторых случаях при гиперстимуляции иммунизации—продолжительной инъекции антигена—наблюдается преобладание относительно небольшого числа клонов это так называемый ограниченный ответ. При ограничении числа клонов практически возможно выделить чистые иммуноглобулины. Еще большие возможности возникают при моноклональном типе ответа. Такой ответ редко наблюдается при обычной иммунизации, но имеет место при дезорганизации размножения клеток — опухолях плазменных клеток. Такие опухоли можно легко трансплантировать нормальным животным, где они продолжают продуцировать большие количества гомогенного иммуноглобулина. Возможно у популяции мышей индуцировать опухоли плазменных клеток частыми внутрибрюшинными инъекциями минерального масла или рентгеновским облучением. [c.103]

Любой из природных белков обладает антигенной специфичностью. Антитела, возникшие в ответ на введение определенного белка, образуют преципитаты только с этим белком, но не с другими белками. Перекрестная реакция наблюдается только в тех случаях, когда исследуемый антиген очень близок к антигену, применявшемуся для иммунизации. Так, например, антитела, образующиеся при инъекции сывороточных белков лошади, преци-питируют также и сывороточные белки осла яичный альбумин утиных яиц преципитируется антителами, образовавшимися при иммунизации яичным альбумином куриного яйца [4]. С другой стороны, серологические свойства миоглобина резко отличаются от свойств гемоглобина, хотя оба вещества содержат один и тот же гемин [5]. Очевидно, в данном случае специфичность обусловливается белковым компонентом, а не гемином. Гемоглобин человека серологически отличается от гемоглобина быка. Однако при помощи реакции задержки комплемента можно установить наличие некоторого родства между этими двумя веществами [6]. [c.330]

Хотя эксперименты, в которых в качестве индикаторов использовались меченные изотопами вещества, дали много ценных сведений относительно синтеза белка, тем не менее в этой области до сих пор еще остались нерешенными основные проблемы. На основании этих опытов невозможно решить, происходит ли непрерывное самообновление белков путем синтеза и последующего распада отдельных молекул белка или же оно обусловлено тем, что каждая из этих молекул, не распадаясь нацело, постоянно обменивает свои отдельные составные части. Подобный обмен может достигаться, например, путем временного размыкания пептидных связей и включения аминокислоты между концами раскрытых цепей. Для разрешения этой проблемы были использованы иммунологические методы. Как уже указывалось в гл. XIV, антитела находятся во фракции у глобулинов сыворотки. Если вызвать образование антител у кролика, иммунизируя его каким-либо антигеном, то вновь образованные иммунные т-глобулины можно отдифференцировать от f-глобулинов, присутствовавших до иммунизации, по их способности преципитировать соответствуюший антиген. Так, например, инъекция полисахарида пневмококков SIII приводит к образованию SIII-анти-тел во фракции глобулинов иммунной сыворотки. Если подопытным кроликам помимо антигена вводится N -глицин, то через небольшой промежуток времени меченая аминокислота обнару- [c.390]

Для приводимых ниже опытов мы пользовались раствором фенолазы из грибов La tarius vellereus. 10 см этого раствора, прибавленные к 2.5 г пирогаллола в 40 см воды и оставленные на 24 часа, давали 0.046 г пурпурогалина. Кроликам впрыскивалось в ушную вену по 2—3 см этого раствора фенолазы каждые 5—6 дней. Если после 6 инъекций сыворотка опытного животного по своему действию на фенолазу не отличалась заметным образом от сыворотки нормального кролика, то иммунизация временно прерывалась и возобновлялась через 2—3 недели. Таким образом, было иммунизировано семь кроликов. У четырех из них сыворотка обнаружила сильное задерживающее действие на фенолазу, у двух задержка была слабее и один вообще ие дал задержки. Задерживающее действие проявлялось независимо от природы субстрата и от собственной реакции (концентрации водородных ионов) испытуемой сыворотки. [c.560]

Оказалось, таким образом, что кипяченый сок при внутривенном введении кроликам неспособен сообщить их сыворотке антифенолатические свойства. Так как не была исключена возможность, что мы в данном случае имеем дело с индивидуально невосприимчивыми кроликами, мы подвергли их затем иммунизации активными растворами соответствующих препаратов фенолазы. Уже носле четвертой инъекции сыворотка кроликов обнаруживала ясно выраженные задерживающие свойства при дальней-щих инъекциях задерживающая сила их еще возросла. [c.568]

Иммунизация производилась автолизированным соком пивных дрожжей. Сухие дрожн и заливались двойным объемом воды и сохранялись под толуолом при комнатной температуре в течение 10—12 дней. По истечении этого времени первоначально густая масса становилась значительно более жидкой она фильтровалась через большие складчатые фильтры, и фильтрат сохранялся под толуолом. Подвергавшиеся иммунизации крслики получали в вену от 2 до 5 см этого сока через промежутки в 5—6 дней,— в общем обычно 5—6 инъекций. Этот препарат был впрыснут 8 кроликам [c.572]

Эти опыты были проведены с четырьмя кроликами. Количество инъекций, количество введеннот о фермента и вся остальная методика были точно такие же, как в описанных выше опытах. Очистка инвертазы производилась по Эйлеру и Кульбергу Тот же автолизованный сок, который применялся в первом опыте для иммунизации, был обработан уксуснокислым свинцом. При этом большая часть белков выпадала, а фермент оставался в растворе. К отфильтрованному раствору прибавлялся спирт до содержания 48% осадок растворялся в воде, обрабатывался каолином и еи е раз осаждался спиртом. Осадок, растертый с абсолютным спиртом и отфильтрованный при помощи водоструйного насоса, дал белый порошок, который был высушен в эксикаторе над хлористым кальцием. Для иммунизации был взят раствор этого препарата, по своей активности соответствующий [c.576]

Поликлональные антитела против GGT почек быка или GGT почек крысы (легкие формы) могут быть получены иммунизацией кроликов (самки, возраст 6—8 нед) путем инъекций в подушечки задних лап эмульсии, состоящей из 50 мкг фермента в 0,5 мл Na l-натрийфосфатного буфера с 0,5 мл полного стимулятора Фрейнда на животное. Через 2 нед вводят то же количество антигена (50 мкг GGT в 0,5 мл того же буфера), хорошо эмульгированного неполным стимулятором Фрейнда, подкожно в несколько мест шеи. Целесообразно повторить последнее введение еще через 2 нед. Через 10—15 сут берут пробы крови кролика инкубируют взятые пробы при 37 Х в течение 2 ч, затем оставляют на ночь при 4 °С и отделяют антисыворотку центрифугированием при 3000 g в течение 30 мин. В анализах методом двойной иммунодиффузии антисыворотка при разбавлении 1 128 (Na l-фосфатным буфером) все еще дает дуги преципи тации с разбавленной GGT (0,025 мг/мл). [c.153]

Использование в иммунизации адъюванта снижает возможность появления толерантности, позвол5 ет расширить диапазон вводимого иммуногена от 50 до 200 мкг на одну инъекцию. После введения адъюванта у животных часто образуются гранулемы, которые влияют на самочувствие животных, поэтому в течение иммунизации необходимо тщательно наблюдать за состоянием здоровья животного. В случае ухудшения самочувствия очередную инъекцию пропускают и лишь после выздоровления животного продолжают иммунизацию. [c.151]

Более редко используются такие способы иммунизации, как введение иммуногепа в подушечки лап или в конъюнктиву глаза, которые вызывают сильные болевые ощущения у животного. Иммунизацию начинают введением животному иммуногена в смеси с полным адъювантом Фрейнда, а для повторных инъекций применяют неполный адъювант Фрейнда. Перед отбором крови за 7— [c.152]

В процессе иммунизации у животных отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов (белков, полисахаридов и т. д.) достигается через 40—60 дней после первой инъекции. В том случае, когда иммуногеном являются клетки микроорганизмов, максимально высокий уровень антител наблюдается гораздо раньше (через 12—20 дней). После окончания первого цикла иммунизации животному в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию (2-й цикл иммунизации), включающую 1—3 внутривенные инъекции. Ниже приводятся схемы иммунизации морских свинок и кроликов инсулином и конъюгатом тироксин — бычий сывороточный альбумин (ВСА). [c.152]

Иммунизацию кроликов конъюгатом тироксин — БСА (T — БСА) проводят многоточечными инъекциями вдоль позвоиочиика и внутримышечно в область микроузлов задних лап по следующей схеме 1-й день — 1—2 мг конъюгата [c.152]

При получении МКА к подклассам IgG человека, специфичных в отношении лишь тех минимальных различий, которые существуют в областях, определяющих антигенность подкласса, оказалось полезным получение толерантности у мышей-продуцентов путем в/б инъекции около 12 мг IgG определенного подласса за неделю до иммунизации другими подклассами [24]. Парапротеины, используемые для создания толерантности, подвергли биофильтрации путем пассажа на мышах, сыворотка которых служила в дальнейшем источником толерогена. [c.54]

В/к инъекции редко используют для инициации иммунного ответа, но к ним часто прибегают для бустерной иммунизации антигенами, растворенными в физиологическом растворе, особенно при работе с кроликами и морскими свинками. Реакция Артюса (которая часто развивается при подобных инъекциях) приводит к медленному высвобождению иммунных комплексов, формирующихся in situ, в регионарные лимфатические узлы. [c.69]

Для растворимых антигенов известны разнообразные схемы иммунизации. Например, первую инъекцию 100 мкг антигена, эмульгированного в полном или неполном адъюванте Фрейнда, осуществляют подкожно (в 0,1 мл), а последующие инъекции (оо 100 мкг в PBS объемом 0,5 мл) проводят в/б с интервалом в месяц. Отбирают пробу крови, чтобы убедиться в наличии адекватного титра антител в сыворотке, а затем осуществляют последние инъекции антигена (в/б утром и в/в днем), за 3—4 дня до гибридизации. [c.123]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология