Пероксидаза получение

Для проведения дальнейших опытов с целью изучения свойств более чистой пероксидазы полученное нами количество фермента было недостаточным. [c.432]

В позднее проведенной работе Джордж [97[ показал, что вторичные комплексы пероксидазы, полученной из хрена, цитохрома-С и перекиси водорода, люгут пыт , оттитрованы ферроцианид-ионами [c.238]

ПОЛУЧЕНИЕ КОНЪЮГАТОВ АНТИТЕЛ С ПЕРОКСИДАЗОЙ [c.317]

Пероксидаза жирных кислот обнаружена в бесклеточных экстрактах, полученных из семядолей арахиса и сафлора. Были активны также экстракты ацетонового порошка прорастающего гороха. Никакая активность не выявлялась в люпине, сое, подсолнечнике, клещевине и в тканях животных. Когда дифференциальному центрифугированию подвергли бесклеточные экстракты семядолей арахиса, пероксидаза жирных кислот была найдена в митохондриальной и микросомной фракциях, а также в надосадочной жидкости. Фермент был выделен в частично очищенном виде при обработке экстракта ацетонового порошка семядолей арахиса сернокислым аммонием (СА-фермент). [c.310]

На фиг. 77 показаны результаты разделения пероксидазы и кислой фосфатазы хрена, полученные при ступенчатом элюировании. Для препаративных целей рекомендуется пропускать раствор [c.233]

Сцент-Дьердьи [1] показал важную роль фенольных соединений в окислении аскорбиновой кислоты пероксидазой. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что флавоноиды в сочетании с Н2О2 вызывают окисление аскорбиновой кислоты. Интересно, что этим свойством обладает также и изофлавон — генистеин, [c.161]

Опыты были произведены указанным выше способом с 10 склянками при 12°. Было поставлено три серии опытов с постоянной концентрацией перекиси водорода (100 мг Н2О2 на 50 см ) и возрастающей концентрацией каталазы (3, 6 и 12 см указанного выше раствора). Главной целью этих опытов было определение концентрации каталазы, необходимой для разложения 100 мг Н,02 в 50 см в течеиие 10 минут (зависимость продолжительности реакции от концентрации при окислении пирогаллола для определения способности активировать пероксидазу). Полученные результаты приведены в следующей таблице [c.393]

Мы задали себе труд, хотя его можно было считать почти излишним, проверить наблюдения Буркло с чрезвычайно чистыми препаратами фенолазы и пероксидазы. Полученный нами результат вполне ясен и однозначен фенолаза, не содержащая тирозиназы, и равноценная ейсистема нероксидаза— перекись водорода окисляют монофенолы и моноамины так же, как полифенолы и полиамины. Обозначение полифенолоксидаза , которая предполагает существование монофенолоксидазы , таким образом, лишено основания. [c.460]

Часто имеются различия в содержании аминокислот и химическом поведении одного и того же гемопротеина, полученного из разных источников. Например, наблюдаются значительные различия в кривых равновесия с кислородом для гемоглобина млекопитающих и гемоглобина птиц. Пероксидаза, полученная из хрена, по своим свойствам отличается от пероксидазы из лейкоцитов, содержащей иную порфириновую группу [5]. Бактериальная каталаза обладает несколько большей каталазной активностью, чем каталаза из эритроцитов, хотя оба гемопротеина содержат по четыре нетронутых гематиновых группы обе каталазы более активны, чем каталаза из печени, в которой одна или больше гематиновых групп превращено в каталитически неактивную молекулу пигмента желчи. [c.197]

В отличие от пероксидазы активность полифенолоксидазы в долях вирозного листа этого же растения была выше лишь в 1,5—2 раза по отношению к контролю. Разброс величин активности в долях листа не превышал 2 ед., это говорит о том, что в вирозном растении изменения в метаболизме полифенолоксидазы выражены гораздо слабее, чем в метаболизме пероксидазы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что активность пероксидазы, индуцируемая вирусом L, возрастает значительнее, чем активность полифенолоксидазы. [c.61]

Для использования моноклональных антител в изучении белковых антигенов важно знать, с одной и той же или разными антигенным и детерминантами (эпитопами) антигена связываются полученные антитела. Эпитопную специфичность антител определяют методом их конкурентного связывания. Антитела одного клона конъюгируют с пероксидазой (с. 317). Берут 96-луночный микропланшет для ИФА и сорбируют в лунках антиген, как обычно (с. 320). После тщательной отмывки в каждую из 12 лунок вносят по 75 мкл культуральной жидкости того же или других клонов или раствор очищенных антител — 100 мкг/мл (рис. 42). Все остальные лунки содержат 50 мкл фосфатного буфера с 1%-ным БСА. Делают серийные разведения антител, перенося по 25 мкл раствора из каждой лунки в соседнюю (рис. 42) на 5—6 лунок. К каждой лунке добавляют 10 мкл меченных пероксидазой автител в концентрацию 20 мкг/мл. Инкубируют 2—4 ч при комнатной температуре при постоянном встряхивании. После тщательной [c.322]

Как и в других случаях окисления пероксидазами in vitro, полученное соединение оказалось рацематом, тогда как природная усниновая кислота была выделена как в оптически активной, так и в рацемической форме. [c.389]

Контрольные опыты проводили с теми же количествами соединений, но энзим инактивировали нагреванием. В опытах с по-лифенолоксидазой в растворе осадок образовывался постепенно в опытах с пероксидазой осадок осаждался быстрее в контрольном опыте осадка не получалось. Осадки очищали растворением в ацетоне и переосаждением эфиром. Полученные светлоокрашенные продукты имели элементарный состав, приведенный в табл. 3. [c.763]

Сырой эвгенол содержит конифериловый альдегид, вызывающий цветную реакцию. Продукт конденсации, полученный из кониферилового альдегида с пероксидазой и перекисью водорода, имел 15,93% метоксилов и свойства, подобные свойствам лигниноподобных продуктов из неперегнанного остатка сырого эвгенола. [c.767]

Недавно получен (1321 аналогичный продукт присоединения глюкозы при дегидрировании кониферилового спирта под действием пероксидазы хрена или сырого фермента, выделенного из плодового тела гриба Agari us bisporus в насыщенных водных растворах глюкозы. Доказано, что D-глюкуроновая кислота образует с хинонметидом связь типа бензилового сложного эфира, в которой карбоксильная группа уроновой кислоты присоединяется к углероду дилигнола в -положении (260, 261 (. [c.136]

В настоящее время общепринято, что ферменты являются белками. Финский биохимик А. И. Виртанен выдвинул обратное положение, что белки представляют собой ферменты. Если это второе положение нужно рассматривать как преувеличение, то первое справедливо без исключений, хотя, правда, каталитической активностью могут обладать и фрагменты белковой молекулы. Первое доказательство белковой природы ферментов было получено в 1926 г., когда фермент уреазу выделили в виде чистого кристаллического препарата и установили, что этот фермент является белком глобулином. Эти результаты американского ученого Самнера противоречили взглядам выдающегося немецкого химика Рихарда Вилльштеттера. Вилльштеттеру в некотором отношении не повезло, так как он работал с ферментом пероксидазой, обладающей чрезвычайно высокой каталитической активностью. В процессе очистки были получены активные препараты пероксидазы, не содержащие заметных количеств азота, а в ряде случаев в них не удавалось обнаружить ни углерода, ни азота. После выделения кристаллической уреазы Вилльштеттер считал, что полученный белок был лишь неспецифическим носителем лабильной и каталитически [c.9]

Структурные элементы связаны в молекуле лигнина указанным образом, но последовательность отдельных элементов еще не выяснена. Недавно К- Фреи-денбергу удалось получить убедительное доказательство правильности предложенной нм формулы лигнина из кониферилового спирта и грибковых дегидраз был получен лигниноподобный материал. При этом в качестве промежуточного продукта был выделен дегидродикокифериловьп спирт. Так же. ак грибковый фермент, пирокатехииовые дегидрогеназы и пероксидазы, [c.311]

Каталаза обнаруживает поразительное сходство с пероксидазой хрена в реакции восстановления ее нитритом, зависящей от присоединения протона. Сравним следующие константы скорости (л моль" с ), полученные в расчете на недиссоциированную HNOg [1591 [c.216]

Подострые отравления. Кумулятивные свойства отмечены только у П., полученного на алюминнйорганическом катализаторе. Двухмесячное введение 50 мг/кг уменьшает СПП, увеличивает прирост массы тела. Доза 250 мг/кг" вызывает достоверное снижение количества эритроцитов и активности пероксидазы крови, /(к = 5. У остальных П. кумулятивные свойства не выражены. Повторные введения 50 и 200 мг/кг не привели к гибели животных (разрешающая доза 400 мг/кг). [c.32]

Задание 7. Определение изменений активности пероксидазы и полифенолоксидазы (по Д. М. Михлину и 3. С. Броновицкой) в растениях пшеницы, выращенной из семян, обработанных гексахлораном. Всходы пшеницы, полученные из обработанных по заданию 4 семян, готовят к анализу. Вытяжку получают извлечением ацетатным буфером с pH = 4,7. Навеску (1—5 г) растирают в фарфоровой ступке с буфером. Соотношение между объемами навески и раствора буфера должно быть 1 20. Смесь (болтушку) через 30 минут отфильтровывают через бумажный фильтр. [c.150]

Задание 9. Определение изменений активности пероксидазы и полифенолоксидазы в растениях пшеницы, выращенных из семян, обработанных ТМТД. Выполняется так же, как задание 7, на всходах пшеницы, полученных из семян, обработанных по заданию 2. [c.151]

Нужно отметить, что между этими двумя очень сходными реакциями нельзя провести резкой грани. В присутствии некоторых субстратов, папример спиртов, каталаза действует подобно пероксидазе [116]. Кристаллическая пероксидаза была выделена из хрена Теореллом [117]. Для очистки фермента им было использовано несколько методов адсорбция на алюминии, осаждение пикриновой кислотой, электрофорез и фракционированное осаждение сернокислым аммонием. Молекулярный вес полученной пероксидазы оказался равным 44 000 [пН Из молока была выделена другая пероксидаза с молекулярным весом 93 ООО, получившая название лактопероксидазы [118]. Молекула пероксидазы имеет резко выраженное асимметрическое строение (отношение осей 7 1) [117]. Простетическая группа может быть отщеплена от пероксидазы под действием ацетона и соляной кислоты при —15°. На основании данных, полученных при электрометрическом титровании и при изучении зависимости активности фермента от pH, было сделано заключение, что простетическая группа пероксидазы соединена с апоферментом не только посредством атомов железа, но также при помощи двух карбоксильных групп протогемина. Фермент-субстратные комплексы каталазы и пероксидазы были рассмотрены выше. [c.298]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология