Вставки ДНК сегмента

На внутренней поверхности стенки крепятся два опорных сегмента 1, к нижней поверхности которых привариваются подкладки 2 прямоугольного сечения. Секции тарелки <3 с контактными элементами лежат на опорной балке П-образного сечения 4, установленной на подкладке 2. Для увеличения жесткости балки и удобства монтажа на ее концах приваривают короткие вставки 5. Для установки в одной плоскости опорных поверхностей балки 4 и сегментов / под концы балки устанавливают подкладки 6. Опорная балка 4 крепится к подкладке 2 болтами 7, головки которых для удобства монтажа могут быть приварены к нижней поверхности подкладки. Со стороны приемного и сливного карманов тарелка опирается на уголок 3 (рис. 3, б). Листы тарелки крепятся к опорным сегментам / и опорным уголкам В приемного и сливного карманов с помощью специальных шайб 9 и болтов Ю. К опорной балке листы тарелки крепятся с помощью плоских шайб 11 и болтов 12. [c.212]

Объединив четыре разные YA с генами Н-цепей гемоглобина человека, создали YA длиной 1000 т. п. н., несущую 66 Уд-доменов, около 30 Од-сегментов, 61д-доменов, Ср., С5, и Су. Аналогично, из трех YA , несущих различные домены Ук, создали YA длиной 800 т. п. н. с 32 Ук-доме-нами, 5 JK-доменами и Ск. ES-клетки трансфицировали по отдельности YA с генами Н- и к-цепей методом слияния клеток, отобрали клетки, в которых произошла интеграция YA , с помощью селективного маркера и проверили целостность каждой вставки методом ПЦР. Инъецировали клетки, несущие встроенные гены Н- либо к-цепи, в бластоцисты и идентифицировали особь-основателя с помощью ПЦР. Трансгенных мышей со вставками генов Н- и к-цепей скрещивали по отдельности с мышами с инактивированными локусами этих цепей. Затем потомство скрещивали между собой, чтобы получить мышей, лишенных функциональных мышиных генов Н- и к-цепей, но несущих обе вставки генов Н- и к-цепей гемоглобина человека. [c.429]

Замена сегмента генома длиной примерно 30 т. п. н. ДНК-вставкой не оказывает заметного влияния на репликацию HSV, его упаковку или инвазионную способность. С другой стороны, большой размер генома HSV затрудняет генетические манипуляции с ним. Для решения этой проблемы в плазмиду Е. соН, которая может переносить до 8 т. п. н. чужеродной ДНК, встроили усеченный геном HSV, состоящий из точки инициации репликации и последовательности, ответственной за упаковку. Полученные HSV-производные назвали ампликонами (ампликон-плазмидами). [c.498]

После сборки реверсора проверяют и регулируют нейтраль подрубкой плечиков цилиндра или упоров мотыля. Угол поворота реверсора в обе стороны от нейтральной оси должен быть одинаковым. Замыкание силовых пальцев должно опережать замыкание пальцев блокировочного барабана. В момент замыкания блокировочных пальцев силовые пальцы должны отстоять от края силового сегмента (нейтральной вставки) на 3—5 мм. [c.237]

Рис. 8.1.26. Конструктивные параметры сферических днищ с углом сегмента 87° > 0 > 75°, соединенных вставкой с многослойной обечайкой

Если 5 < 0,85 ,, то необходим расчет напряженно-деформированного состояния зоны сопряжения многослойного цилиндра с днищем по специальным методикам. После этого выполняют проверку на статическую или циклическую прочность. Выпуклые днища в виде сферического сегмента при 87° > 9 > 75° соединяют с многослойной обечайкой однослойной цилиндрической вставкой (рис. 8.1.26). [c.784]

Поскольку внедрения в правом сегменте полностью не блокируют его функции, можно предположить, что вставки не прерывают кодирующий участок, а вмешиваются в осуществление какой-то другой функции, контролируемой смежной регуляторной областью. Вставки картируются в нескольких дискретных сайтах. Один из них w , который находится на границе потенциально кодирующей области. Следующим является сайт w , включающий серию вставок определенных последовательностей и их производных. В сайте локализуется несколько вставок, делеций. Вставка -самая удаленная в правом конце, возможно, именно она служит границей локуса. Весьма вероятно, что такие сайты внедрений идентифицируют отдельные регуляторные области внедрения в другие сайты правого сегмента не вызывают появления мутантного фенотипа, доступного определению. Все мутации, которые повреждают потенциально регуляторные функции, такие, как синхронность исчезновения пигментов или их исчезновение в определенном порядке, дозовую компенсацию, картируются в правом сегменте. [c.479]

Развертка колена со вставкой. Для построения развертки колена со вставкой (рис. 62) вычерчивают в натуральную величину фронтальную проекцию колена. Из точки 4 (рис. 62,а) проводят полуокружность, которую делят на шесть равных частей (точки а, б, в, г, д, е, ж). Данные точки проектируют на линию пересечения вставки с верхней частью колена. Для построения разверток проводят прямые АБ, ВГ, ДЕ, равные длине окружности колена. Данные прямые делят на 12 равных частей. Отрезки 1—8, 2—9, 3—10, 4—11, 5—12, 6—13, 7—14 служат для построения развертки нижней части колена (нижнего сегмента). Отрезки 8—15, 9—16, [c.94]

Выделено много вставок (включений, инсерций) Тп/6 , о которых известны лишь их положения на карте, но неизвестны те гены, которые мутировали в результате вставки транспозона. Большинство их выделено как вставки вблизи какого-нибудь исследуемого гена (см. эксперимент 2). Чтобы можно было обозначать вставки ТпЮ в соответствии с их положением на карте и тогда, когда остается неизвестным, в каком именно гене произошла вставка, сделанное ранее Хонгом и Эймсом (Hong, Ames, 1971) предложение было видоизменено. Все такие вставки обозначают символом из трех букв, который начинается с буквы г. Вторая и третья буквы символа обозначают приблизительное положение вставки на карте в минутах. Вторая буква обозначает тот сегмент длиной 10 мин, в который попадает вставка. Сегменты эти нумеруются по часовой стрелке от минуты О (а = 0—10, Ь=10—20, с = 20—30 и т. д.). Третья буква точно таким же образом обозначает уже минуты карты внутри этих сегментов длиной в 10 мин. Например, вставка ТпЮ, локализованная вблизи гена hisW между минутами 47 и 48 генетической карты, обозначается как zeh-754 ТпЮ вставка ТпЮ вблизи локуса his на 44-й минуте обозначается как zee-2 Тп/6 . Номера аллелей приписываются таким вставкам последовательно независимо от второй и третьей букв символа. Таким образом, если более точное картирование приведет к необходимости изменить трехбуквенный символ вставки, то номер вставки все равно не изменится. В соответствии с этим правилом используются обозначения от zaa до zjj. Для обозначения вставок во внехромосомных элементах мы используем буквы zz, за которыми следует буква, обозначающая внехромосомный элемент. Символом zzf обозначаются вставки в плазмиде F. [c.13]

В данной монографии мы рассмотрим физическую природу образования дефекта на примере линейных термопластов и эластомеров (табл. 1.1). Известно, что эти материалы имеют широкий диапазон свойств, хотя и состоят из подобных молекул. Их молекулы преимущественно линейные, гибкие имеют высокоанизотропные (невытянутые) цепи с молекулярными массами 20000—1 000000 и более. На рис. 1.9 представлена цепная молекула полиамида-6 (ПА-6) в невытянутом состоянии с произвольным выделением сегментов, а на обведенной вставке показано ее основное звено. Относительные положения атомов и часть объема, занятая ими в цепи, иллюстрируются с помощью модели Стюарта для сегмента полиамида (рис. 1.10). Действительный размер распрямленного сегмента —1,97 нм. Если бы к такому сегменту можно было приложить напряжение вдоль оси цепи, то изгиб и растяжение основных связей обеспечивали бы в результате жесткость цепи 200 ГПа [15], в то время как межмолекулярное взаимодействие сегментов вследствие более слабых вандерваальсовых сил обеспечивает жесткость только 3—8 ГПа в направлении, перпендикулярном оси цепи. Характерные свойства твердых полимеров, а именно анизотропия макроскопических свойств, микронеоднородность и нелинейность, а также сильная временная зависимость [c.12]

Значительно более эффективной является колонка Леки и Эвела со спиралью из проволочной сеткп [30]. В этой колонке лента из проволочной сетки намотана винтообразно на стеклянный стержень (рис. 274). ВЭТТ находится в пределах 1—5 см при задержке около 0,5 мл на одну теоретическую тарелку. Достаточно сложный процесс изготовления подобных вставок описан Столкапом с сотрудниками [31]. Значительно более простой является спиральная вставка из проволочной сетки по Бауэру и Куку [32], которую изготовляют диаметром около 5 мм. Проволочную сетку 50 меш из монель-металла сгибают под углом 90 таким образом, что она образует находящиеся друг над другом вертикальные плоскости и горизонтальные плоскости в виде открытых сегментов (рис. 275). Такую спираль лучше всего вставлять в колонку, изготовленную пз калиброванной трубки, втягивая ее внутрь с помощью привязанной медной проволоки после предварительного смачивания внутренних стенок маслом. Масло затем удаляют промывкой растворителем, а медную проволоку растворяют в концентрированной азотной кислоте. Характеристика колонок этого типа приведена в табл. 64. [c.387]

IS-элементы (от англ. insertion sequen es — последовательности-вставки) — это сегменты ДНК, способные как целое перемещаться из одного участка локализации в другой (рис. 74). IS-элементы содержат лишь те гены, которые необходимы для их собственного перемещения — транспозиции. Кроме того, IS-элементы имеют особую последовательность на концах, как правило, инвертиро- [c.112]

М 13-векторов, содержащих перекрывающиеся субклонированные последовательности, значительно увеличивается. Чтобы решить эту задачу, были разработаны методы секвенирования двухцепочечных плазмидных ДНК, не требующие субклонирования. Плазмидную ДНК, содержащую нужную вставку, вьщеляют и отжигают с синтетическим олигонуклеотидным праймером, который гибридизуется с последовательностью в одной из цепей векторной ДНК, находящейся вблизи вставки. Затем осуществляют дидезокси-секвенирование, позволяющее идентифицировать первые 250-350 нуклеотидов вставки. Исходя из этих данных синтезируют второй олигонуклеотидный праймер, комплементарный сегменту вставки, отстоящему примерно на 300 нуклеотидов от места связывания первого праймера, и секвенируют следующие 250-350 нуклеотидов. Аналогичным образом синтезируют третий праймер и определяют нуклеотидную последовательность следующих 250—350 нуклеотидов (рис. 5.17). Эту процедуру, называемую праймер-опосредованной прогулкой, продолжают до тех пор, пока не секвенируют весь фрагмент. Аналогичным образом секвенируют вторую цепь, начиная с праймера, который гибридизуется с этой цепью вблизи вставки. [c.93]

Подбор второго праймера, комплементарного концевому участку уже секвениро-ванной последовательности длиной примерно 20 нуклеотидов. 4. Секвенирование следующего сегмента клонированной ДНК с помощью второго праймера (Р2). 5. Подбор третьего праймера, комплементарного концевому участку этого сегмента размером 20 нуклеотидов. 6. Третий праймер (РЗ) используется для секвенирования следующего сегмента клонированной ДНК. Эту процедуру продолжают до тех пор, пока не будет секвенирована вся вставка. [c.94]

Для определения нуклеотидной последовательности протяженных клонированных сегментов сначала подбирают синтетический олигонуклеотидный праймер, комплементарный участку, соседствующему со вставкой, и с помощью диде-зокси-метода секвенируют первые 250-300 нуклеотидов. Затем по результатам секвенирования синтезируют второй праймер и определяют последовательность следующих 250-350 нуклеоти- [c.103]

Плазмиду, которая содержала сегмент ДНК, кодирующий Aj-пептид, обработали рестрицирующими эндонуклеазами С1а и ХЬа, каждая из которых расщепляла только кодирующую Aj-пептид последовательность вставки. [c.236]

Вставка (Insert) Сегмент ДНК, встроенный в клонирующий вектор. [c.545]

МУТАЦИЯ, наследуемое изменение генотипа. Различают точечные М. и крупные перестройки ДНК. К точечным относятся замены одиночных пар оснований ДНК (транзи-ции — замены одного пурина на другой и одного пиримидина на другой, трансверсии — замены пурина на пиримидин и наоборот) и выпадения или вставки одиночных нуклеотидных пар ДНК (мутации со сдвигом рамки считывания). Замена пары оснований может приводить к изменению кодона и послед, замене аминокислоты в кодируемом белке (миссенс-мутация) или же к образованию бессмысленного кодона и прекращению трансляции данной матричной РНК (нонсенс-мутация). К крупным перестройкам ДНК относятся делении (выпадения), дупликации (удвоения), инверсии (повороты на 180°), транслокации (перемещения) участков ДНК, а также инсерции (встраивания) новых сегментов ДНК. Иногда к М. относят изменения числа хромосом в клетке (геномная М.). Различают спонтанные М., возникающие с частотой 10 —10 (отношение числа мутировавших нуклеотидных звеньев к общему числу мономерных звеньев ДНК), и индуцированные, частота к-рых может пре-вьипат . 10 М. могут быть индуцированы хим. (дезаминирующие, алкилирующие и др. реагенты), физ. (ионизирующие излучения) и биол. мигрирующие генетические элементы) мутагенными факторами. Частота и специфичность возникновения спонтанных и индуцированных М. находятся под генетич. контролем. [c.356]

Все сегменты могут иметь сменные вставки 15 для отвода тепла при сварке, расположенные одна от другой по окружности на расстоянии В. Обечайка 1 пристыковывается к обечайке 4, в которой расположено устройство. Каждый сегмент 2 и дополнительный сегмент 12 имеют скосы соответственно 5 и 7, определяющие силовую часть конструкции. [c.86]

Удельная эрозия катода, выполненного из гафния, в пароводяной плазме в зависимости от тока электрической дуги показана на рис. 11.19. Катодное пятно вырабатывает на торце гафниевой вставки, запрессованной заподлицо в медную водоохлаждаемую обойму, кратер, напоминающий по форме шаровой сегмент. Глубина кратера с течением времени увеличивается. При токе дуги 200 А скорость углубления составляет 0,1 мм/ч. Вольтов эквивалент тепловых потерь в катод в водяной плазме составляет = 5,55 В, что выше, чем [c.586]

II) — вставки типа Ensat и другие (см. табл. И1.3 рис. П1), представляют собой втулки с наружной и внутренней резьбами, имеющие на нижнем конце конус и один или два продольных шлица с острыми режущими к,р0(мками. При завинчивании вставки ее разрезные сегменты прогибаются внутрь [98]. При вворачивании винта во вставку, ее разрезная часть вдавливается в стенки отверстия, что обеспечивает фиксацию винта и вставки. Жесткость такого стопора можно регулировать изменением диаметра отверстия. Внутренняя резьба неразрезанной части вставки предназначена для передачи усилия от винта. [c.101]

Авторами разработано несколько вариантов методики одновременного исследования противоизносных и моющих свойств моторных масел в условиях окисления. На рис. 7 показана схема одного из вариантов экспериментальной установки. Установка представляла собой ванну из тефлона с запрессованным чугунным дном, по которому скользит полый цилиндрический чугунный образец. Образец активирован вставками из Со. Радиоактивный образец вращается со скоростью 730 об мин при нагрузке ЮкПсм . В стенку ванны вмонтирован алюминиевый сегмент, в который вставляют стальной лакообразователь Г-образной формы. Края плоской рабочей поверхности лакообразователя не выступают [c.196]

Вывод о том, что вставки в правом сегменте оказывают непрямой эффект на активность продукта гена, подтверждается природой ревертантов. Изменения во внедренном сегменте часто приводят к изменению функции локуса. Например, делетирование небольшой части вставки дает начало аллелю w , который в какой-то мере восстанавливает образование пигмента. Многие примеры эффектов такого типа позволяют заключить, что утрата функции не обусловлена только самим фактом внедрения вставки, а может зависеть и от природы, и от протяженности внедренного сегмента. [c.479]

О) генных сегментов. Пул для Н-цепей содержит набор С-сегментов и наборы V-. D- и J-сегментов. Для того чтобы синтезировалась молекула антитела, нужно, чтобы Vi-сегмент присоединился к Jj-сегменту с образованием последовательности ДНК, кодирующей V-область легкой цепи, а Vn-сегмент соединился с D- и Jn-сегментами с образованием отрезка ДНК, кодирующего V-областъ тяжелой цепи. Каждый из собранных генных сегментов котранскрибируется затем вместе с соответствующей последовательностью С-области, что дает молекулу мРНК, кодирующую всю полипептидную цепь. Комбинируя различным образом унаследованные генные сегменты, кодирующие Vl и Ул-области, позвоночные могут вырабатывать тысячи различных L-цепей и тысячи различных Н-цепей, которые могут объединяться с образованием миллионов разных антиген-связывающих участков. Это число еще больше увеличивается в результате выпадения и вставки нуклеотидов в процессе соединения генных сегментов и в результат соматических мутаций, происходящих в этих сегментах с очень высокой частотой вслед за антигенной стимуляцией. [c.253]

Первая полная последовательность сегмента РНК вируса гриппа была получена из гена НА вируса чумы птиц (A/FPV/Rosto k/34 [95]). Позднее были определены последовательности нескольких генов НА четырех различных подтипов [18, 43, 82, 120, 123]. Последовательности можно прямо сравнивать, выстраивая в ряд сохраненные цистеиновый, триптофановый и пролиновый остатки получбнных белков. В этом случае можно разделить делеции и/или вставки. [c.108]

Рис. 2 дает представление о размерах хромосомных сегментов, в пределах которых работают различные современные методы генетических исследований. Ось ординат представляет собой логарифмическую шкалу физических расстояний, измеренных в парах (или в тысячах пар) нуклеотидов (п.н. или т.п.н,). На шкале приведены и значения генетических расстояний, измеряемые в сантиморганидах (сМ). 1 сМ приблизительно равна 10 п. н. Однако это соотношение нельзя считать универсальным, ибо зависимость между генетическим и физическим расстоянием на хромосоме имеет нелинейный характер, на нее могут оказывать влияние горячие точки рекомбинации. Наличие таких областей может привести к ситуации, когда сравнительно большому генетическому расстоянию соответствует небольшой отрезок на физической карте. В то же время в геноме существуют участки, рекомбинация в которых маловероятна, а это приводит к обратной ситуации. Как показано на рис. 2, классические методы молекулярной генетики хорошо работают на последовательностях длиной до 50 г. п. н., что соответствует максимальному размеру вставки в космидный вектор. Участки большей длины можно клонировать путем прогулки по хромосоме , когда, используя уже клонированные последовательности, геномную библиотеку скринируют с целью получения перекрывающихся клонов. Таким способом удаётся анализировать последовательности длиной до нескольких сотен т. п. н. Однако, в [c.96]

Смотреть страницы где упоминается термин Вставки ДНК сегмента: [c.212] [c.356] [c.570] [c.73] [c.196] [c.148] [c.106] [c.87] [c.134] [c.476] [c.479] [c.479] [c.247] [c.70] [c.108] [c.94] [c.70] [c.129] [c.167] [c.32] [c.193] [c.188] [c.188]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология