Фильтрование, диализ и центрифугирование

Фильтрование, диализ и центрифугирование [c.366]

Образовавшиеся кристаллы после фильтрования или центрифугирования вновь растворяют в объеме воды, равном первоначальному объему яичного белка. Перекристаллизацию проводят путем добавления твердого сульфата натрия при перемешивании. На каждый литр раствора необходимо около 140—180 г безводной соли. Эту обработку яичного белка повторяют еще два или три раза. Окончательно образовавшийся осадок рассыпают тонким слоем и высушивают в теплом помещении. Таким путем получают сухой порошок, в котором белок частично денатурирован. При другом способе обработки белок растворяют в небольшом объеме воды и оставляют в холодной комнате на ночь при этом большая часть сульфата натрия выпадает в виде кристаллов. Надосадочную жидкость собирают, диализуют и затем высушивают в замороженном состоянии или денатурируют описанным выше методом. [c.8]

Подготовка исследуемого материала. Раствор белка, наносимый на колонку, должен иметь тот же состав и те же значения pH и ионной силы, что и исходный буферный раствор, которым уравновешен ионообменник. Образец переводят в исходный буферный раствор, подвергая его предварительно диализу или гель-хроматографии. Если объем пробы, предназначенный для ионообменной хроматографии, невелик, образец можно развести исходным буферным раствором. Нерастворимые компоненты удаляют центрифугированием или фильтрованием. Если [c.110]

Суспензии очищают от примесей растворенных веществ диализом, электродиализом, фильтрованием, центрифугированием. [c.196]

Для очистки. раствора от мельчайших частиц осадка, кроме центрифугирования, используют также диализ. Фильтрование отобранной пробы через бумажный или стеклянный фильтр не может быть рекомендовано для разделения фаз, так как при этом возможна заметная сорбция вещества на фильтре. К 1 ому же существует опасность проскока мельчайших частиц твердой фазы через поры фильтра. [c.245]

Из рис. 11.1 можно видеть, что, если необходимо фазовое разделение отходов, альтернативными методами могут быть осаждение под действием гравитационных сил, фильтрование, коагуляция — флокуляция, флотация, выпарка, центрифугирование для извлечения отдельных компонентов — ионный обмен, сорбция, методы мембранного разделения (обратный осмос, диализ и электродиализ, ультрафильтрация), выпарка, отгонка паром, экстракция растворителями для химической обработки — нейтрализация, осаждение, окислительно-восстановительные процессы, гидролиз, электролиз, сжигание, катализ, фотолиз для биологической очистки — аэробная обработка в аэраторах, биофильтрах, прудах и полях орошения и анаэробное разложение. В некоторых случаях отходы не подвергаются никакой обработке, а удаляются путем закачки в море, складирования в шламохранилищах и на свалках, закладки в подземные слои или сжигаются. [c.41]

Серое вещество, отсеченное от мозга человека, теленка, свиньи или овцы, гомогенизируют в гомогенизаторе Уоринга при 4°С с ацетоном (4 мл на 1 г ткани). Полученную смесь оставляют при непрерывном перемешивании на ночь. Суспензию фильтруют на воронке Бюхнера через ватман 43. Осадок повторно суспендируют в ацетоне (2 мл на 1 г исходной ткани) и перемешивают при 20 °С не менее 4 ч. Остаток ткани мозга как можно более полно отделяют от ацетона фильтрованием под давлением на воронке Бюхнера или центрифугированием (3000 g, 30 мин). Влажный остаток дважды экстрагируют смесью хлороформ — метанол (1 1 по объему) (2 мл на 1 г исходной ткани), встряхивая суспензию не менее чем I ч. После центрифугирования снова прибавляют смесь растворителей того же состава (1 мл на 1 г ткани), нагревают суспензию 30 мин на водяной бане при 50 °С (температура бани) и в горячем виде центрифугируют. Экстракты объединяют и упаривают досуха, остаток сушат совместным упариванием со смесью толуол — спирт (1 1 по объему). Растворив липидную фракцию, полученную из 1 кг серого вещества, в 1 л смеси хлороформ — метанол (2 1 по объему), проводят центрифугирование. Осадок повторно экстрагируют 1,0 л смеси хлороформ—метанол (1 1 по объему). Супернатанты объединяют, разбавляют 1 л смеси хлороформ — метанол (4 1 по объему) и 0,5 л воды и встряхивают 1 мин. Эмульсию центрифугируют 30 мин при 3000 и прозрачный верхний слой отделяют при помощи сифона. Нижний слой тщательно перемешивают с 0,5 л метанола, после чего прибавляют 0,5 л дистиллированной воды, снова встряхивают и верхний слой отделяют, как описано выше. Объединив два верхних слоя, проводят диализ про- [c.349]

Приготовление пробы. Обычно препаративный электрофорез в полиакриламидном геле не используют в качестве одного из начальных этапов в очистке белков и нуклеиновых кислот. Для предварительного грубого фракционирования компонентов омесей применяют методы хроматографии, высаливания или осаждения. Чтобы провести электрофоретическое разделение, пробу необходимо сконцентрировать до 5 мл для однородной системы и до 10—20 мл для неоднородной. От избытка солей можно избавиться при помощи диализа или гель-фильтрации. Концентрация солей в исследуемом растворе должна быть такой же, как в буфере концентрирующего геля. Если же этот гель не попользуется, то пробу диализуют против буфера разделяющего геля, разведенного в 5 раз. Медленное вхождение пробы в гель во время электрофореза свидетельствует о слишком высокой концентрации солей. Любой осадок, присутствующий в пробе, следует удалять центрифугированием или фильтрованием через миллипоровый фильтр, так как он может закупорить разделяющий гель. [c.117]

Весьма мало исследований посвящено оптимизации методов отбора поровых вод для определения в них содержания металлов. При сравнении трех методов отбора поровых вод для определения ртути и метилртути центрифугирование, фильтрование, отжимание и использование мембран для диализа — наиболее оптимальным было центрифугирование [466]. [c.47]

Культуральную жидкость гибридов собирают, когда погибнет около 80% клеток. Объединяют вместе несколько культур объемом 200 мл и клеточный дебрис отделяют либо фильтрованием, либо центрифугированием при 1000 д 15 мин. После этого к надосадочной жидкости добавляют сульфат аммония из расчета 350—400 г/л. Суспензию перемешивают на магнитной мешалке 1 ч при 4°С и затем еще инкубируют 18—24 ч при 4°С без встряхивания. В результате практически весь преципи-тированный материал оседает на дне. Осторожно удаляют >80% надосадочной жидкости, а оставшуюся взвесь центрифугируют при 5000 д 30 мин для осаждения фракции, содержащей иммуноглобулины. Осадок ресуспендируют в минимальном объеме ЗФР или ЗБР и диализуют против избытка того или другого буфера. Предпочтительнее использовать ЗБР, так как при этом существенно снижается опасность бактериального роста. После хроматографии на носителе 5ерЬасгу1 5-200 (для выделения IgG) или 5ерЬасгу1 8-300 (для выделения IgM) получают МА 95%-ной чистоты. [c.190]

При получении С. методами конденсации частицы твердой фазы вьщеляются из пересыщенных жидких р-ров, к-рые образуются при охлаждении, изменении растворяющей способности среды (метод замены р-рителя), вследствие хим. р-ций (окисления, восстановления, гидролиза, двойного обмена), приводящих к образованию малорастворимых соединений [BaS04, Agi, СаСОз, А1(ОН)з и др.]. Размер частиц зависит от соотношения скоростей образования зародьпией и их роста. При небольших степенях пересьпцения обычно образуются крупные частицы, при больших-мелкие. Предварит. введение в систему зародышей кристаллизации приводит к образованию практически монодисперсных С. Уменьшение дисперсности м.б. достигнуто s результате изотермич. перегонки при нагревании. Дисперсность образующихся С. можно регулировать также введением ПАВ. С. очищают от примесей растворенных в-в диализом, электродиализом, фильтрованием, центрифугированием. [c.480]

Четвертое свойство, которое важно для обработки контрольных измерений, заключается в том, что результаты радиометрического анализа выражаются в простых пропорциопальпых отношениях для кохщентрацнй данного иона и для данного количества реагента через экспериментально полученные скорости счета. Это справедливо, когда образование или разделение продуктов реакции является полным или частичным, при условии, что процент образования или разделения постоянный. Следовательно, метод может быть применен к анализу систем, в которых действуют различные способы разделения, которые могут быть полностью и не полностью эффективными. Фильтрование, центрифугирование, селективная экстракция, диализ и хроматография — все они могут быть сведены к этой форме анализа. Рассмотрим гипотетическую реакцию [c.193]

Для получения технических препаратов протеазы Streptomy es griseus, применяемых в тех случаях, когда не требуется высокой очистки, чрезвычайно удобным оказался разработанный нами простой способ осаждения фермента из культуральной жидкости изопропиловым спиртом. Такой препарат содержит примесь стрептомицина, поэтому его удобно применять в отраслях легкой промышленности и сельском хозяйстве. Технология производства его проста, удается извлечь до 80% имеющегося фермента, препарат очень дешев. Этапы его получения следующие а) отделение из культуральной жидкости мицеллия (центрифугированием, фильтрованием или иным способом без осветления фосфатом кальция) б) осаждение фермента 2,5 объемами изопропилового спирта в) центрифугирование осадка г) высушивание его любым способом при комнатной температуре. Из надосадочной жидкости (водно-спиртового раствора ) стрептомицин может быть извлечен, как мы нашли, путем адсорбции на обычной технической смоле КБ-4п-2. Этой же смолой (или диализом) можно освободить от примеси стрептомицина выделяемый фермент, если эта примесь в нем нежелательна. [c.209]

Ямада с соавт. (Yamada et al., 1968b) сообщают, что при глубинном культивировании Asp. flavus таназа также локализуется в мицелии. Поэтому для выделения таназы отфильтрованный от культуральной жидкости мицелий гомогенизировали, растирая песком при низких температурах, Из полученного гомогената фермент экстрагировали водой, затем остатки мицелия и песок удаляли центрифугированием. Следующей стадией очистки таназы было высаливание сульфатом аммония при pH 5,0. После отделения фермента и диализа проводили его очистку на ДЕАЕ-целлюлозе, фракционированное осаждение ацетоном и двухкратное фильтрование через сефадекс G-200. После всех этих операций и растворения в буфере препарат осаждали ацетоном. Авторы сообщают, что удельная активность таназы возросла в 30 раз. [c.192]

В химии и биохимии одной из наиболее часто встречающихся операций является отделение одного вещества от другого. До введения в практику центрифугирования, электрофореза, хроматографии и других современных методов это при возможности достигалось с помощью фильтрования. Первоначально фильтром служила тонкая ткань (например, для отделения творога от сыворотки применяли марлю), и до сих пор марлю иногда испо/1ь-зуют для предварительного осветления экстрактов тканей. Позднее ткань была заменена пористой бумагой, затем были разработаны методы получения бумаги с различными размерами пор, что позволяет контролировать размер задерживаемых частиц. Чтобы задерживать частицы, которые по размеру меньше размера пор самых тонких сортов бумаги, попользуются фильтры на основе ацетата целлюлозы, нитроцеллюлозы и стекловолокна. Еще более тонкой мембраной служит пленка для диализа, которая пропускает небольшие молекулы и ионы, но задерживает лш/сромолекулы н макромолекулярные ассоциаты. Вариантом диализа является так называемый молекулярный фильтр, который отделяет малые макромолекулы от больших. [c.154]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология