Растворитель хроматограммы

По технике выполнения различают следующие виды бумажной хроматографии одномерную, двумерную, круговую и электрофоретическую. Для получения двумерных хроматограмм хроматографирование производят дважды во взаимно противоположных направлениях после обработки пробы одним растворителем хроматограмму поворачивают на 90° и хроматографируют вторично уже другим растворителем. [c.349]

II) 4) многократно повторяющиеся пики десорбция с наполнителя колонки при вводе проб растворителя (хроматограмма II) 5) разложение пробы (хроматограммы [c.268]

По технике выполнения различают следующие виды бумажной хроматографии одномерную, двумерную, круговую и электрофоретическую. Одномерная и двумерная хроматограммы могут быть получены в восходящем и нисходящем потоке растворителя. Двумерная хроматография открывает более широкие возможности в разделении сложных смесей, чем одномерная. Для получения двумерных хроматограмм процесс производят дважды во взаимно противоположных направлениях после обработки пробы одним растворителем хроматограмму поворачивают на 90° и хроматографируют вторично уже другим растворителем. Такая методика позволяет получить более тонкие разделения компонентов смеси. [c.166]

Разделение и d++ методом тонкослойной. хроматографии основано на использовании различия коэффициентов распределения этих нонов между водой и подвижным растворителем. Хроматограмму проявляют путем опрыскивания проявителем — раствором ЫагЗ. В местах расположения ионов при этом возникают пятна сульфидов, обладающие характерной окраской. [c.304]

Для лучшего разделения сложной смеси аминокислот, имеющих близкие величины пропускание каждого растворителя по хроматограмме повторяют несколько раз (обычно дважды). В этом случае фронт каждого последующего растворителя должен продвигаться по бумаге несколько дальше предыдущего. Перед использованием каждого следующего растворителя хроматограммы вынимают из камеры и высушивают на воздухе. [c.129]

При построении калибровочного графика растворитель пропускают через бумагу столько раз, сколько это необходимо для четкого разделения аминокислот исследуемой пробы. После пропускания растворителя хроматограмму высушивают и проявляют, погружая на несколько секунд в 0,5%-ный раствор нингидрина (готовится смешиванием 95 частей 0,5%-ного раствора нингидрина в ацетоне, 1 части ледяной уксусной кислоты и 4 частей воды непосредственно перед определением), подсушивают в течение нескольких минут на воздухе и прогревают для развития окраски в затемненном сушильном шкафу в течение 15 мин при 60 °С. Концентрацию соответствующей аминокислоты определяют описанными ниже методами. [c.149]

Эфирную вытяжку фенолов накосили, на пластину и разделяли указанной смесью растворителей. Хроматограмму опрыскивали смесью 15%-ного раствора хлорида железа (111) и 1%-ного раствора K3[Fe( N)g]. [c.325]

Начинать работу следует с выбора оптимальной смеси растворителей. Для этого на полосы хроматографической бумаги пятнами наносят экстракты (в расчете 0,05—0,2 г сухого вещества в пятно), которые подвергают разделению в ряде смесей растворителей. Хроматограммы проявляют указанными выше реактивами на индольные и фенольные соединения. Последняя группа веществ обычно служит своеобразными маркерами, показывающими, удовлетворительно ли разделяются вещества на хроматограммах. [c.12]

Обнаружение производится методом бумажной хроматографии. На полоску бумаги шириной 3 сж и длиной 12 см наносят каплю исследуемого раствора объемом 0,001 мл и дают 5 мин сохнуть при комнатной температуре. Затем помещают в широкий цилиндр, на дно которого налито приблизительно 2 мл смеси растворителя . Хроматограмма обрабатывается растворителем примерно 2,5 ч, высушивается, опрыскивается 0,01 % спиртовым [c.243]

Элюированные в летучих растворителях хроматограммы свободно подвешивают для сушки на воздухе, лучше всего в вытяжном шкафу или в токе воздуха под вытяжным колпаком. При использовании малолетучих растворителей (например фенола, коллидина) или бумаги, пропитанной формамидом или пропиленгликолем, лучше всего сушить хроматограммы в сушильном шкафу с циркуляцией воздуха. Если хроматографируемые вещества достаточно термостойки, хроматограммы можно сушить над нагревательной плиткой. Когда для обнаружения используют индикаторы, надо специально проследить, чтобы с бумаги испарился весь кислотный или основный растворитель, входящий в состав обнаруживающего реагента, а также чтобы сушка хроматограмм проводилась в нейтральной атмосфере. Соляную кислоту нельзя удалить с бумаги полностью. Удаление следов уксусной кислоты с хроматограмм можно ускорить, если подержать хроматограммы горизонтально над паром, идущим от плоской чашки с кипящей водой, или обдувать их горячим паром. [c.94]

Для выбора растворителя рекомендуется применение микро-циркулярного способа. На стеклянную пластинку с носителем несколько проб одной и той же исследуемой смеси веществ наносят на расстоянии 2 см друг от друга. Через несколько минут после этого в центр каждой пробы наносят тонким капилляром растворитель хроматограмму подсушивают и проявляют. Если пятно представляет собой четкое кольцо, разделение и выбор растворителя считаются наиболее удачными. В Приложении 1 приведены системы растворителей, которые наиболее часто используются в бумажной и тонкослойной хроматографии для разделения неорганических веществ. [c.123]

Сущность метода состоит в многократном элюировании хроматограммы одним и тем же растворителем. Хроматограмму элюируют выбранным растворителем, извлекают пластинку из камеры, дают ей высохнуть, снова помещают в камеру и элюируют во второй раз. Элюирование можно повторить еще несколько раз, пока не будет достигнуто нужное разделение. Число повторных элюирований зависит от расстояния, на которое нужно переместить вещество. Вследствие различия величин Ri двух данных соединений (и, следовательно, скоростей их перемещения растворителем) при повторных элюированиях их пятна будут все больше разделяться, пока расстояние между ними не достигнет некоторой величины, после чего эти пятна начнут сближаться. Объяснить такое необычное перемещение пятен можно тем, что растворитель вначале достигает пятна соедпнения с меньшим значением Rf и начинает перемещать его, а уже потом достигает пятна второго соединения. Если этот процесс повторять, то расстояние, на которое перемещается соединение с меньшим Rf до того, как начнет перемещаться соединение с большим Rj, с каждым последующим элюированием увеличивается, а расстояние, на которое первое соединение перемещается после того, как начнет перемещаться второе соединение, с каждым разом уменьшается. [c.143]

Во всех этих методах, если элюирование проводится кислыми растворителями, хроматограмму следует обработать парами аммиака, чтобы нейтрализовать кислоту, которая замедляет рост микроорганизмов [396, 397]. [c.289]

Многократно повторяющиеся пики. Десорбция с наполнителя колонки при вводе проб растворителя (хроматограмма 11) [c.182]

Полученные хроматограммы извлекают из чашек Петри и отмечают карандашом фронт растворителя. Хроматограммы сушат на воздухе, разрезают каждую на 6-8 секторов, помечают карандашом стандартную и исследуемую хроматограммы. Каждый из подготовленных секторов проявляют соответствующими реактивами и высушивают. Окрашенные зоны указывают на присутствие тех или иных ионов (табл. 29). [c.366]

Методика проявления препаративного слоя зависит от его типа и размеров. Пластинки небольших размеров можно проявлять в обычных камерах. Незакрепленные слои, которые можно проявлять только при небольшом наклоне, требуют применения камер больших размеров. Для проявления слоя размером 20Х Х20 см пригодна чашка Петри диаметром 30 см, прикрытая сверху стеклянной пластинкой. Сложнее проявлять незакрепленные слои больших размеров. Поэтому удобнее работать с закрепленными слоями, которые можно проявлять в вертикальном положении. В достаточно большую камеру, снабженную штативом, можно поместить целую серию хроматограмм, что позволяет максимально использовать ее объем при экономии времени и растворителя. Как и в случае проявления аналитических хроматограмм, рекомендуется применять камеры минимального объема, которые легче насытить парами системы растворителей. Для лучшего насыщения в камеры помещают полоски фильтровальной бумаги. Камеры для проявления больших препаративных пластин размером 20X100 см производятся несколькими фирмами. Фирма Shandon производит камеры из нержавеющей стали (рис. 55), герметически закрывающиеся крышкой со стеклянным оконцем. В камеру помещают штатив, позволяющий разместить одновременно до пяти пластин. Выпускаются также камеры для проявления в инертной атмосфере. Для этой цели можно использовать также и обычные камеры, которые заполняют двуокисью углерода (если это позволяет сделать характер разделяемых веществ и система растворителей). Описаны также огромные камеры для одновременного проявления до 40 хроматограмм. При проявлении в камере, объем которой насыщен парами растворителя, хроматограммы размещают попарно слоями друг к другу, причем между слоями помещают полоску фильтровальной бумаги, смоченную растворителем. При проявлении в камерах, не насыщенных парами растворителя, пластинки размещают слоями в разные стороны [8]. [c.134]

I. Предварительно насыщают хроматографическую камеру парами растворителя. Для этого наливают на дно камеры растворитель I. Закрывают камеру и оставляют на час для насыщения пространства парами. Вырезают из хроматографической бумаги три полоски размером 30 X 40 см . Нижняя часть полоски оформляется как на рис. 136. Посередине узкой части карандашом наносят окружность диаметром 6 мм и отмечают линию старта. От линии старта отмечают чертой каждый сантиметр полосы и нумеруют полученные участки. На стартовой кружок микропипеткой наносят 0,05 мл соответствующего раствора изотопов на первую полоску кадмия-115, на вторую—цинка-65 и на третью—их смесь с общей активностью около 4000 имп/мин. мл (смесь выдается преподавателем). Бумага осторожно высушивается под инфракрасной лампой, и полоски подвешиваются так, чтобы половина нижней части погружалась в растворитель. Хроматограмму для проявления оставляют стоять на 3—12 час. Большее увеличение времени экспозиции ухудшает результаты. По окончании экспозиции хроматограмму осторожно вынимают, карандашом отмечают фронт растворителя и бумагу высушивают. Производят измерение активности вдоль всей полосы. Для этого хроматограмму разрезают на отдельные отрезки длиной 1 см, и измеряют активность каждого отрезка на торцовом счетчике, помещая препарат в пакете из кальки на специальный держатель. Если позволяет защитное устройство, полоску, не разрезая, передвигают под [c.311]

Смеси аминокислот можно фракциопировать также с помощью давно известного метода хроматографии на бумаге, основанного на различиях в коэффициентах распределения аминокислот между органической и водной фазами. Хроматография па бумаге с использованием какой-нибудь одной системы растворителей обычно не дает возможности осуществить полное разделение всех аминокислот. Значительно большей разрешающей способ-ностью обладает метод двумерной хроматографии. При этом после хроматографирования в одном направлении с использованием одной системы растворителей хроматограмму поворачивают на 90° и продолжают разделение с помощью второй системы растворителей. Типичная двумерная хроматограмма гидролизата белка приведена на фиг. 12. Индивидуальные аминокислоты проявляются пршгидрииом в виде пятен сине-фиолетового цвета. Пятна можно вырезать, элюировать и определить оптическую плотность элюатов, которая пропорциональна количеству соответствующей аминокислоты. Этот метод более трудоемок и обычно менее точен, чем автома- [c.58]

Для разделения циркония и гафния на бумаге в качестве элюанта применялась смесь три-н-бутилфосфата, -бутанола и ксилола (или бензола), насыщенная 8—10-н. азотной кислотой [150]. Для определения суммы циркония и гафния в качестве растворителя использовалась смесь антипирина, диоксана и азотной кислоты [151]. При промывании хроматограммы цирконий и гафний остаются на месте нанесения анализируемого раствора, в то время как большинство других катионов движется с растворителем. Хроматограмма смачивалась 0,001%-ным раствором морина в спирте, сушилась и снова смачивалась соляной кислотой. Под ультрафиолетовой лампой цирконий и гафний видны в виде желто-зеленых зон. Их содержание в изолированных зонах определялось комплексономет-рически. [c.386]

Как и хроматографию вообще, БХ можно разделить на распределительную, адсорбционную и ионообменную, а также на аналитическую и препаративную. По характеру методики мы различаем также проточную (непрерывную) хроматографию, соответствующую проявительной хроматографии в колонках (с тем различием, что не всегда элюируются все зоны), повторное хроматографирование, когда хроматографический процесс прерывают по достижении определенного положения фронта растворителя, хроматограмму сушат, после чего вновь проводят хроматографирование (иногда по нескольку раз) с той же или другой системой растворителей, и, наконец, одно- и двумерную, круговую и центрифужную хроматографию, а также хроматографию на хроматограммах клиновидной формы. В распределительной хроматографии можно выделить нормальную и обращенно-фазную хроматографию. В последнем случае (в отличие от нормального метода) неподвижная фаза более ли-пофильна, чем подвижная фаза. Отдельные типы БХ подробно рассматриваются ниже. [c.59]

Для выбора растворителя рекомендуется применять ми-кроциркулярный способ. На стеклянную пластинку с носителем наносят несколько проб одной и той же исследуемой смеси веществ на расстоянии 2 см друг от друга. Через несколько минут в центр каждой пробы наносят тонким капилляром выбранные растворители, хроматограмму подсушивают и проявляют. Там, где пятно будет представлять собой четкое циркулярное кольцо (рис. 39), разделение считается наиболее удачным, так же как и используемый в этом случае растворитель. [c.103]

Предложена также реакция с хлорным железом в этом случае хроматографируют не сами пенициллины, а их гидроксамо-вые производные [1366]. Антибиотики предварительно обрабатывают гидроксиламином. 10—40 мг пенициллинов растворяют в 1 мл смеси равных объемов 4 н. солянокислого гидроксиламина и 3 н. едкого натра. 10 мкл раствора наносят на хроматограмму. После проявления в системе растворителей хроматограммы обрабатывают 2%-ным раствором хлорного железа в 0,01 н. соляной кислоте. При этом образуются красновато-коричневые пятна. [c.221]

После пропускания растворителя хроматограмму сушат в течение ночи в вытяжном шкафу и затем разрезают на полоски. Одну полоску, содержащую стандарт или неизвестное вещество, опрыскивают нингидрином, а другую (с тем же неизвестным веществом или стандартом) — реактивом Драгендорфа. Серин и этаноламин после обработки нингидрином проявляются в виде синих пятен с значениями Rf около 0,27 и 0,51 соответственно. Холин и М,М-диметилэтаноламин не реагируют с нингидрином. Реактив Драгендорфа окрашивает холин в оранжевый цвет, а диметилэтаноламин — в бледно-оранжевый. Значения Rf для холина и N,N-димeтил-этаноламина составляют - 0,93 и 0,86 соответственно. [c.319]

Преимущества тонкослойной хроматографии, как считают Кирхнер и сотр. [19], состоят в следующем. Этот метод сочетает в себе преимущества бумажной и колоночной хроматографии, а именно легкость обнаружения разделенных компонентов путем опрыскивания пластинок различными реактивами и возможность использования всего широкого ассортимента адсорбентов, применяемого в колоночной хроматографии. Разделение происходит очень быстро (при применении некоторых растворителей хроматограмму получают всего за 30 мин). Метод позволяет быстро оценить пригодность растворителей или адсорбентов. В качестве детектирующих реактивов в тонкослойной хроматографии можно применять более агрессивные жид- [c.20]

Пиретрины Бумагу ватман № 3 ММ хроматографически промывали последовательно 1 н. водным раствором аммиака водой и перегнанным этиловым спиртом и высупшвали. Образцы наносили специальной кистью и бумагу оставляли на ночь в парах раствора концентрированного водного аммиака в 95%-ном этиловом спирте (5 вес. % в объеме) и затем проявляли растворителем. Хроматограммы слегка опрыскивали раствором хлорфенола красного, бумагу разделяли на три зоны и элюировали водным раствором аммиака. Элюат очищали и остаток титровали раствором едкого натра с тимоловым синим в качестве индикатора. [c.85]

Получение хроматограммы. Полоску бумаги с нанесенными на нее пробами раствора подсущивают на воздухе 20—25 мин, затем 01пускают до линии погружения в стакан емкостью 500 мл с 50 мл 12%-ного водного раствора глицерина или дистиллированной воды. Полоску укрепляют в стакане вертикально. Растворитель, продвигаясь по бумаге, захватывает непрореагировавщие количества определяемого иона и перемещает их вверх. Образующиеся при этом осадки располагаются на бумаге в виде правильных пиков внизу — слабо желто-зеленого цвета пик иодида серебра выще — пик бромида серебра светло-лилового цвета. Через 40 мин после погружения бумаги в растворитель хроматограммы вынимают из стакана, высушивают на воздухе 30—40 мин. Линейкой измеряют расстояние от стартовой линии до вершины желто-зеленого пика (высоту пика — h). По полученным данным стандартных растворов строят калибровочный график зависимости высоты пика от концентрации определяемых ионов. Измеряют высоты пика анализируемого раствора (в пятой точке) и по кали-> бровочному графику определяют количественное содержание иода в исследуемом растворе. [c.348]

Первичная, или фронталыная, хроматограмма. обычно содержит или зоны (неполное разделение компонентов), или полосы (полное разделение) получается при фильтрации разделяемой или хроматографируемой смеси через колонку сорбента. Промытая или проявленная растворителем хроматограмма получается при последующем промывании колонки чистым растворителем, например водой. [c.21]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология