Фронт растворителя второй

В случае, если сложную смесь нельзя разделить с помощью одного растворителя, применяют последовательно два растворителя с различными коэффициентами распределения. Для этого используют квадратный лист бумаги (20 X 20, 30 X 30, 40 X 40 см), в левом углу которого (на расстоянии 5 см от края) наносят капли исследуемых веществ. После их высушивания бумагу помещают в камеру и опускают нижний край в растворитель, проводя хроматографирование по восходящему методу. Как только фронт растворителя достигнет верхнего края бумаги, хроматографирование заканчивают и бумагу высушивают. За-.тем, повернув ее на 90" против часовой стрелки, помещают во вторую камеру с другим растворителем и продолжают [c.160]

Тогда = х]х), т. е. Н, равно отношению смещения зоны к смещению фронта растворителя. На рис. 76 дано пояснение этого соотношения. Здесь х, и — пути, пройденные соответственно первым и вторым компонентами разделяемой смеси от начального положения Xf — путь, пройденный фронтом растворителя. Если х.,, то и Щ ф [c.67]

После высыхания всех нанесенных капель необходимо тщательно вымыть руки с мылом, сделать небольшое отверстие а центре диска и вставить в него фитиль — скрученную узкую полоску фильтровальной бумаги, длина которого соответствует высоте нижней чашки Петри. Затем закрывают диском нижнюю чашку Петри так, чтобы конец фитиля был погружен в растворитель, а сверху диск прикрывают второй чашкой Петри. Камеру оставляют в покое до тех пор, пока растворитель, распространяясь радиально по бумаге, не окажется на расстоянии 0,5—1,0 см от краев диска (см. рис. 19). После этого хроматограмму вынимают, отмечают карандашом фронт растворителя и сушат [c.39]

Нанесение веществ. Раствор испытуемой смесн наносится нэ пластинку тонким капилляром иа расстоянии 1—2 см друг от друга. Пятна веществ по возможности должны быть небольшими (диаметр от 2 до 3 мм) и находиться не ближе 1,5—2 см от краев пластинки. Аналогично наносится раствор испытуемой смеси веществ и при разделении на пластинках с незакрепленным слоем (адсорбент без связывающего материала, второй способ). На пластинке отмечают нужную высоту подъема фронта растворителя ( 10 см). Для контроля за условиями хроматографирования и для сравнения между собой различных пластинок сбоку наносят пятна смесей контрольных веществ. Эти смесн должны состоять-нз различных окрашенных веществ, которые легко разделяются при хроматографировании и значения / / которых расположены в благоприятной области (0,2—0,8). Наиболее часто используют смесь, состоящую из красителей желтого масляного, Судана красного О п индофенола. [c.108]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р5 (подходит и предварительно покрытая пластинка из коммерческих источников), а в качестве подвижной фазы бутилацетат Р. Наносят на пластинку отдельно по 5 мкл каждого из 2 растворов в хлороформе Р, содержащих (А) 20 мг испытуемого вещества в 1 мл и (Б) 0,20 мг испытуемого вещества в 1 мл. После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть при комнатной температуре и помещают в камеру во второй раз, дав фронту растворителя подняться на 15 см от линии нанесения. Извлекают пластинку, дают растворителю испариться при комнатной температуре, опрыскивают ее раствором серной кислоты в метаноле ИР и нагревают 10 мин при 105 °С. Оценивают хроматограмму при дневном свете. Любое пятно, которое дает раствор А, кроме основного пятна, не должно быть более интенсивным, чем пятно, которое дает раствор Б. [c.331]

На рис. 43 дано пояснение этого отношения. Здесь х и х — путь пройденный соответственно первым и вторым компонентами разде ляемой смеси от начального положения х — путь, пройденный фронтом растворителя. Если х не равен х. , то и Щ не будет равно к"/, следовательно, зоны компонентов смеси разделятся. Поэтому [c.253]

Важной характеристикой в бумажной распределительной хроматографии, так же как и в ТСХ, является К =х1х, где х — смещение зоны компонента х/ — смещение фронта растворителя. Методика определения в бумажной хроматографии не отличается от соответствующей методики в ТСХ, основанной на измерениях в соответствии с рис. 17.8. В начальный момент времени хроматографируемая проба наносится на начальную (стартовую) линию бумажной полоски и подвергается действию подвижной фазы (растворителя). Если компоненты окрашены, через некоторое время на хроматограмме можно будет видеть отдельные цветные пятна. Первый компонент будет иметь Я/,=х1/х1, второй — Я 2=Х2/Х1 и т. д. [c.348]

Возможны два крайних случая первый, когда вещество практически не адсорбируется, и второй, когда вещество адсорбируется необратимо. Вещество не адсорбируется, когда оно очень хорошо растворимо в системе растворителей (вытесняется растворителями) в этом случае вещество движется с фронтом растворителя, т. е. уносится растворителем. Вещество необратимо адсорбируется, если прочно связывается с адсорбентом, и система растворителей протекает через него, не смещая со старта. Скорость перемещения вещества зависит от характеристики равновесия процессов сорбции— десорбции и в случае адсорбционной хроматографии может быть вычислена из изотермы адсорбции. Если вещество движется медленно, то кривая адсорбции имеет резкий подъем на начальном участке. При быстром перемещении вещества вдоль слоя адсорбента изотерма адсорбции близка к абсциссе и графически изображается почти горизонтальной линией. [c.18]

Несколько фронтов растворителя. Разделение основано на том, что компоненты в соответствии с их адсорбционными коэффициентами и концентрациями постепенно поглощаются адсорбентом из движущегося растворителя. Таким образом, фронт изменяет свой состав. Через некоторое время — иногда очень быстро — полностью исчезает один компонент (задний фронт), затем второй (второй задний фронт) и т. д. до тех пор, пока не останется только последний компонент, который движется дальше не изменяясь (передний фронт). Из сосуда с растворителем непрерывно подается свежий растворитель. От линии погружения до заднего фронта, который в свою очередь движется, смоченный адсорбент находится в равновесии с растворителем постоянного состава. Далее, до второго заднего фронта следует зона, которая находится в равновесии с растворителем, содержащим на один компонент меньше, и т. д. Растворитель из п компонентов образует, таким образом, как правило, п различных зон, которые отделены друг от друга п — 1) фронтами. Обозначим их, начиная спереди, а-, Р-, у-.. .. (о-фронтами. Если Zf, Р /, Zf и т. д. представляют собой пути, пройденные соответствующими фронтами к моменту наблюдения, а и т. д. — их скорости перемещения, то упрощенно можно записать [c.116]

Для получения двумерной хроматограммы аминокислот вначале через бумагу пропускают смесь н-бутанола, уксусной кислоты и воды когда фронт растворителя дойдет до нижнего конца листа, хроматограмму вынимают из камеры, высушивают на воздухе в течение 1,5—2 ч или в сушильном шкафу в течение 10— Ъ мин при температуре 60 °С (см. стр. 117). Затем хроматограмму переносят в другую камеру и через нее пропускают второй растворитель—водонасыщенный 80%-ный раствор фенола, в направлении, перпендикулярном движению первого растворителя. Второй растворитель пропускают до тех пор, пока он не дойдет до конца бумаги. После удаления фенола из бумаги описанным выше способом хроматограмму проявляют 0,2%-ным раствором нингидрина в ацетоне. [c.147]

При использовании бинарных или более сложных смесей растворителей часто происходит расслоение, что особенно легко наблюдать в ТСХ. Обычно в результате предпочтительной адсорбции наиболее сильного растворителя передний фронт подвижной фазы обогащается наименее полярным компонентом. Такое расслоение обычно нежелательно, поскольку некоторые компоненты могут перемешаться неразрешенными со вторым фронтом растворителя. Расслоение, вероятно, должно происходить в тех случаях, когда смешиваются растворители с очень различной полярностью, например хлороформ и метанол. Поэтому, если необходимо использовать бинарные смеси, лучше смешивать два растворителя с близкими полярностями. Например, 5%-ный диэтиловый эфир в гептане — отличная подвижная фаза для разделения на окиси алюминия полиядерных ароматических соединений. В то же время 1%-ный раствор этанола в гептане, несмотря на близкую элюирующую способность компонентов, нельзя считать хорошей подвижной фазой для этого разделения, поскольку происходит рас- [c.70]

Однако скорость передвижения по полосе бумаги вещества А значительно меньше скорости движения фронта растворителя. Это объясняется тем, что вещество А , нанесенное на бумагу на участке а , вначале экстрагируется жидкостью П-й из первого водного слоя (I), но как только жидкость вторая, насыщенная веществом А , достигает чистого участка бумаги б , пропитанной жидкостью первой, начинается обратный процесс — переход растворенного вещества из жидкости второй в жидкость первую (в соответствии с коэффициентом распределения вещества между жидкостями I и П). [c.35]

Хроматографирование на бумаге может быть применено как для качественного, так и для количественного определения вещества. Хроматографировать можно восходящим и нисходящим способами. В первом случае фронт растворителя движется снизу вверх, во втором—сверху вниз. Кроме того, существуют и другие способы, например радиальная хроматография (см. стр. 318). [c.315]

Пластинки с нанесенными пробами помещают в хроматографическую камеру, куда заранее внесены н-гексан, бензол и этилацетат в соотношении 1 0,5 0,16. После того как фронт растворителя поднимется приблизительно на 10 см, пластинку вынимают из камеры и оставляют до полного испарения его ларов. Для проявления пятен пластинки опрыскивают концентрированной серной кислотой или помещают в эксикатор с йодом на 5—7 мин. В присутствии исследуемых веществ на пластинке проявляются в первом случае зеленые (МФА), красно-фиолетовые (фурфурол) и черные (фуриловый спирт), во-втором — желто-коричневые пятна. [c.184]

Каплю анализируемого раствора наносят на нижнюю часть полоски на расстоянии 2—3 см от края (линия старта). Вторую линию наносят на расстоянии 2—3 см от верхнего края полоски (линия фронта растворителя). Край полоски ниже линии старта погружают в небольшой сосуд с соответствующим растворителем. Жидкость в силу капиллярности перемещается по полоске снизу вверх. (восходящая хроматография) и увлекает с собой растворенные вещества. Последние передвигаются по бумаге с разными скоростями. Это приводит к распределению веществ в разных местах вдоль полоски бумаги (распределительная бумажная хроматография). С наибольшей скоростью движется фронт растворителя, когда последний достигает верхней линии, полоску высушивают и опрыскивают раствором соответствующего реагента (проявителя). При этом разделяемые вещества образуют с реагентом окрашенные пятна. [c.101]

Используя двойные и тройные смеси растворителей, следует помнить о возможности расслоения этих смесей и образования второго фронта растворителя вследствие контакта с неподвижной фазой [71]. [c.110]

Оказалось вполне достаточным, чтобы фронт растворителя продвинулся по бумаге на расстояние 20—25 см, для чего требовалось около полутора часов. Уже через 20 мин. хроматографирования картина вполне определялась. Двухмерные хроматограммы белков могут быть получены за 5 час. В качестве второго растворителя также использовались различные буферные растворы. Например, в первом измерении производится хроматографирование с буферным раствором цитрат-КаОН, а во втором измерении — с буферным раствором фталат-КаОН, или тартрат-КаОН, или ацетат-НС1. Для второго измерения люгут применяться 1—5%-ные растворы солей или органических кислот. [c.160]

Для получения двумерной хроматограммы применяют квадратные листы бумаги. Каплю исследуемого раствора вначале наносят на бумагу в ее левом углу (рис. 146, а), а затем пятно высушивают. Далее нижний край бумаги опускают в один из растворителей и хроматографируют по восходящему методу. Как только фронт растворителя достигнет верхнего края бумаги, хроматографирование прекращают, бумагу высушивают и поворачивают на 90° (рис. 146, б). В таком положении бумагу помещают в другой сосуд для хроматографирования, опускают ее нижний край во второй растворитель и хроматографируют по восходящему методу, как и в первом случае. После высушивания хроматограммы ее проявляют заранее выбранным проявителем (рис. 146, в). [c.354]

Для выделения из восков отдельных классов соединений применен метод хроматографии на пластинках, покрытых кизельгуром О и высушенных при 120° в течение 90 минут [150]. Исследуемые воска и эталоны наносят на пластинку в виде хлороформного раствора. Проявитель— смесь трихлорэтилен — хлороформ (3 1), время проявления 1 час за это время фронт растворителя достигает 13—14 см температура 22° (для пчелиного воска) и 42° (для карнаубского, шерстяного, шеллакового восков и воска подсолнечника). Для хроматографии при температуре 42° пластинки после нанесения образцов нагревают 4—5 минут при 75°. Хроматографию шерстяного воска можно провести при 20°, если применить смесь указанных растворителей в соотношении 5 2. После проявления пластинки сушат 30 минут при 100°. Пятна открывают опрыскиванием хроматограммы 0,05% водным раствором родамина Вив ультрафиолетовом свете. Кетокислоты обнаруживают опрыскиванием хроматограммы раствором динитрофенилгидразина и раствором КОН в метаноле. Для разделения кислот и спиртов на отдельные компоненты воск омыляют, предварительно отделив углеводороды на колонке с силикагелем. Выделенные кислоты и спирты хроматографируют на пластинках, покрытых кизельгуром О или гипсом. Пластинки, высушенные в первом случае при 120°, а во втором — при 90—95°, пропитывают 5% раствором тетрадекана (фракция углеводородов с т. кип. 240—250°) в петролейном эфире (т. кип. 40—60°). [c.94]

С поведением алкалоидов он делил их на следующие группы. Первая группа алкалоиды, имеющие приемлемые значения Rf в системе Су (табл. 3.18), в которой более гидрофильные алкалоиды перемещаются вместе с фронтом растворителя. Вторая группа алкалоиды, остающиеся на стартовой линии при хроматографировании в системе Сг, но движущиеся вместе с фронтом растворителя при хроматографировании в системе Ст. В эту группу входит большинство алкалоидов спорыньи. Третья группа алкалоиды, которые при хроматографировании в системе Сг дают Rf до 0,9. Эта группа наиболее многочисленная. Четвертая группа алкалоиды со значениями Rt в системе Сг, превышающими 0,9, и такие весьма гидрофобные алкалоиды, как эупаверин, резерпинин и аспидоспермин (ранее их относили к третьей группе). Для разделения алкалоидов четвертой группы используют систему С1 или обращенно-фазные системы (неподвижная фаза — керосин, подвижная фаза — смеси пропанол — ди-этиламин — вода в разных соотношениях). В качестве примера в табл. 3.18 перечислены Rf алкалоидов, входящих в состав опиума с этими соединениями приходится сталкиваться чаще всего. [c.130]

Когда фронт растворителя во второй хроматографической камере достигнет верхней части бумаги (опыт может быть прерван, даже если фронт растворителя находится ниже), выньте из сосуда бумагу и быстро отметьте карандашом положение фронта растворителя. Опустите бумагу на несколько секунд в кюветку с раствором сульфида аммония. Отметьте положение проявившихся капель. Затем части хроматограммы, относящиеся к отдельным пятнам, обработайте кисточкой одну— раствором ализарина, другую — раствором дитизона. Если появились новые пятна, то отметьте их положение карандашом или проколом иголкой. Высуи нте хроматограмму. Миллиметровой линейкой измерьте расстояние 1р и расстояние для каждого пятна. Вычислите относительные скорости передвижения Я для всех пятен неизвестных катионов. [c.441]

I — отмеченная линия нанесения капель лигжя старта 2 — центр пятна одного из компонентов нсследуе.чой смесн 3 — центр пятна второго компонента 4 — линия фронта растворителя [c.152]

Растворитель (1) всегда применяют при разделении в первом, а любой из трех остальных растворителей — во втором направлении. Фракционирование проводят в обычной хроматографической камере, не выстилая ее стенок фильтровальной бумагой, смоченной растворителем. Растворитель наливают в камеру непосредственно перед опытом. Уровень растворителя должен быть на 15—20 мм ниже стартовой точки. Хроматографию продолжают до тех пор, пока фронт растворителя не достигнет верхнего края пластинки. После этого пластинку высушивают 5—10 мин при 90°С или 12 ч при комнатной температуре. На втором этапе разделения рядом со стартовой точкой ланосят стандартную смесь аминокислот и помещают пластинку в камеру со второй смесью растворителей. По окончании хроматографии пластинку 20 мин высушивают при 90°С. [c.235]

Пластинки оставляют в камере до следующего дня, извлекают из камеры и тотчас сверху прикрывают слой адсорбента другой стеклянной пластинкой таким образом, чтобы на одном конце первой пластинки оставалась незакрытой полоска шириной 15 мм. На нее как можно быстрее наносят фракционируемый материал и немедленно погружают пластинку в растворитель [верхняя фаза системы (1)]. После того как фронт растворителя пройдет 15 см, пластинку извлекают из камеры, 3 мин подсушивают на воздухе и вновь погружают в тот же самый растворитель. После второй хроматогрзг фии в том же направлении пластинку 10 мин подсушивают струей воздуха, на 10 мин помещают в термостат при 60°С и затем охлаждают в струе воздуха в течение 10—15 мин. После этого сразу же проводят разделение в перпендикулярном направлении. При использовании в качестве элюента систем растворителей (3) и (4) длительная горизонтальная хроматография продолжается 2—3 ч (см. рис. 46). [c.236]

Интересный результат получается при ТСХ ПММА в камере, насыщенной парами растворителя, при использовании системы хлороформ — метанол (4,5 16) (рис. VIII.14). Здесь верхние пятна полимера располагаются под углом к линии фронта растворителя, что свидетельствует об отсутствии на пластинке градиентных условий. Таким образом, в растворителе одного состава часть полимера остается на старте, в то время как другая часть движется на пластинке по законам элютивной хроматографии. Описанная ситуация может наблюдаться в том случае, если концентрация метанола в элюенте, обеспечивающая осадительную ТСХ ПММА, выше, чем концентрация, при которой происходит растворение этого полимера в области стартового пятна. Переход полимера из адсорбированной на пластинке твердой фазы в раствор происходит через образование гель-фазы. При этом для осуществления первой стадии растворения полимера необходим растворитель лучшего термодинамического качества (содержащий меньшее количество метанола), чем для второй, соответствующей элементарному акту осадительной ТСХ. Это согласуется [c.303]

I. Предварительно насыщают хроматографическую камеру парами растворителя. Для этого наливают на дно камеры растворитель I. Закрывают камеру и оставляют на час для насыщения пространства парами. Вырезают из хроматографической бумаги три полоски размером 30 X 40 см . Нижняя часть полоски оформляется как на рис. 136. Посередине узкой части карандашом наносят окружность диаметром 6 мм и отмечают линию старта. От линии старта отмечают чертой каждый сантиметр полосы и нумеруют полученные участки. На стартовой кружок микропипеткой наносят 0,05 мл соответствующего раствора изотопов на первую полоску кадмия-115, на вторую—цинка-65 и на третью—их смесь с общей активностью около 4000 имп/мин. мл (смесь выдается преподавателем). Бумага осторожно высушивается под инфракрасной лампой, и полоски подвешиваются так, чтобы половина нижней части погружалась в растворитель. Хроматограмму для проявления оставляют стоять на 3—12 час. Большее увеличение времени экспозиции ухудшает результаты. По окончании экспозиции хроматограмму осторожно вынимают, карандашом отмечают фронт растворителя и бумагу высушивают. Производят измерение активности вдоль всей полосы. Для этого хроматограмму разрезают на отдельные отрезки длиной 1 см, и измеряют активность каждого отрезка на торцовом счетчике, помещая препарат в пакете из кальки на специальный держатель. Если позволяет защитное устройство, полоску, не разрезая, передвигают под [c.311]

Многозональное проявление. В тех случаях, когда подвижная фаза состоит из двух и бопее растворителей с различной полярностью и растворитель расслаивается (см. гл. 3), наблюдается многозональное проявление. Расслоение растворителей обусловлено тем, что адсорбент имеет большее сродство к полярным растворителям, в результате образуется второй фронт растворителя. Подвижная фаза, находящаяся выше второго фронта растворителя, богаче менее полярными компонентами. [c.151]

Проявление тонкослойных или бумажных хроматограмм может осуществляться путем восходящего, нисходящего, горизонтального или радиального движения растворителя. При восходящей хроматографии ослол непия, связанные с образованием каналов при движении растворителя, сводятся к минимуму. При непрерывном проявлении растворитель продвигается до конца бумаги или тонкого слоя в одном опыте. При многократном проявлении после того, как фронт растворителя достигает края листа, растворителю дают испариться и повторяют проявление при том же направлении движения растворителя. Ступенчатое проявление включает проявление на пластинке в неполярном растворителе, испарение растворителя и второе проявление в более полярном растворителе. При двухмерном проявлении также последовательно применяют два растворителя сначала проводят хроматографирование в одном направлении, затем высушивают пластинку для испарения первого растворителя, поворачивают пластинку на 90° и проводят проявление вторым растворителем. При градиентном элюировании состав растворителя меняется в ходе проявления [94]. Эта методика, однако, сложна, в ней теряется простота тонкослойной или бумажной хроматографии. [c.553]

Предварительно насыщают хроматографическую камеру парами растворителя. Для этого наливают на дно камеры растворитель I, закрывают камеру и оставляют на час для насыщения пространства парами. Вырезают из хроматографической бумаги три полоски размером 3X16 см . Нижняя часть полоски оформляется, как показано на рис. 3.8. Стартовая линия отмечается карандашом на 2 см выше нижнего края полосы, конечная линия находится на 8 см выше стартовой. Посредине узкой части карандашом намечают окружность диаметром 6 мм и отмечают линию старта. На отмеченный кружок микропипеткой наносят по капле около 0,1 мл соответствующего раствора изотопов на первую бумажную полоску Сс1, на вторую— 7п и на третью — их смесь активностью 40 000 имп мин. Бумажные полоски осторожно высущивают под инфракрасной лампой, подвешивают так, чтобы половина нижней части погружалась в растворитель, и оставляют стоять до тех пор, пока фронт растворителя не достигнет конечной линии. По окончании проявления хроматограмму осторожно вынимают и высущивают в токе теплого воздуха. [c.158]

Хроматографирование. На середину хроматографической пластинки на расстоянии 1,5 см от края при помощи пипетки наносят исследуемую пробу в одну точку так, чтобы размер пятна не превышал 10—12 мм. Колбу с пробой трижды тщательно смывают небольшими порциямй эфира (по 0,5 мл), которые наносят на пластинку в центр того же пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят с помощью шприца стандартные растворы прометрина, так чтобы одно пятно содержало 5—10, а второе 10—20 мкг препарата. Пластинку с нанесенными пятнами помещают в камеру для хроматографирования, в которую налита смесь четыреххлористого углерода и эфира для почвы и растений, гексана и ацетона для воды в соотношении 4 1. Смесь может быть использована однократно. Края пластинки погружают в растворитель не более чем на 0,5 см. После того как фронт растворителя поднимается на 10 см, пластинку вынимают из камеры, отмечают линию фронта и оставляют на несколько минут для испарения растворителя. Затем пластинку помещают горизонтально в камеру для опрыскивания и опрыскивают проявляющим реактивом № 1 и помещают в сушильный шкаф на 20 мин. при температуре 50°. После охлаждения пластинку опрыскивают проявляющим раствором № 2. В случае наличия прометрина в пробе на пластинке появляется синее пятно, расположенное на одинаковом уровне и аналогичное пятнам стандартных растворов. Для закрепления пластинку опрыскивают реактивом № 3. [c.171]

Тогда Rf=xlxf, т. е. Rf равно отношению смещения зоны к смещению фронта растворителя. На рис. 84 дано пояснение этого соотношения. Здесь х и х — пути, пройденные соответственно первым и вторым компонентами разделяемой смеси от начального положения Xf— путь, пройденный фронтом растворителя. Если х фх , то и R J=Rf, следовательно, зоны компонентов разделятся. Величина идеальном случае характеризует скорость продвижения зоны компонента по бумаге и зависит от природы выбранных жидких подвижных и неподвижных фаз. Следовательно, определяется только коэффициентом распределения (который зависит от температуры) и параметрами бумаги. [c.70]

Это соотношение выполняется как для колонок, так и для плоскослойных систем. В первом случае L — это длина колонки, а во втором — расстояние от фронта растворителя до уровня элюирующей жидкости. Для газовой хроматографии соответствующая формула сложнее из-за того, что подвижная фаза сжимаема в этом случае [c.51]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология