Смешанное ингибирование продуктами

Смешанное ингибирование продуктами [c.205]

Однако на практике невозможно отличить зависимости, подобные приведенным на рис. 3, от тех, в которых имеет место ингибирование продуктами. Дело в том, что идеальные примеры конкурентного ингибирования продуктами встречаются достаточно редко и в реальных экспериментах часто осложнены дополнительным неконкурентным или смешанным ингибированием (см. [21]). В этих случаях также наблюдаются отклонения от линейности графиков в координатах интегрального уравнения скорости (хотя в целом сохраняется вид веера, как на рис. 3) с соответствующими нарушениями положения общей точки пересечения на [c.33]

Приложение этих принципов анализа ингибирования продуктом реакции к механизму с образованием тройного комплекса и упорядоченным связыванием субстратов [уравнение (5.2)1 показывает, что Р является смешанным ингибитором независимо от того, коцентрация какого субстрата (А или В) меняется в опыте, потому что для обоих субстратов член, содержащий Р, является постоянным , а член, содержащий аЬр, — варьируемым . В то же время д входит в виде сомножителя в произведение Ъхд, произведение же а X д отсутствует, и поэтому Р выступает в роли конкурентного ингибитора, когда в опыте варьируется концентрация А, и в роли смешанного — когда варьируется концентрация В. Дополнительные данные можно получить, рассмотрев обратную реакцию А является смешанным ингибитором по отношению к Р, но конкурентным по отношению к Р, в то время как В является смешанным ингибитором по отношению как к Р, так и к [c.131]

Существуют ингибиторы смешанного действия, осуществляющие оба типа торможения — конкурентное и неконкурентное. В зависимости от структурных и физико-химических особенностей парализатора (и фермента) в разных условиях может осуществляться то один, то другой тип ингибирования. Смешанный тип может возникать и тогда, когда ингибитор соединяется не с исходным фермент-субстратным комплексом, а с какими-либо промежуточными продуктами, которые образуются позднее. [c.63]

Ингибирование. Различают три вида ингибиторов — конкурентные, неконкурентные и смешанные. Первоначально этому придавался следующий физический смысл. Если ингибитор I является химическим аналогом субстрата 5, не способным претерпевать каталитическое превращение, но занимающим активное место в молекуле катализатора, возникает альтернатива образуется либо неактивный продукт К1, либо промежуточное соединение К5 [c.46]

Смешанное ингибирование — это чаще всего особый случай ингибирования продуктом. Если отщепление продукта происходит на стадии, приводящей к образованию формы свободного фермента, отличающейся от исходной формы, которая связывает субстрат, то следует ожидать ингибирования продуктом, описываемого уравнениямй (4.2) —(4.4). Этот вывод не зависит от того, делаются ли какие-либо допущения о существовании равновесных процессов, и прямо следует из допущения стационарности, как это можно было видеть при изложении методов вывода уравнения стационарной скорости в гл. 3. Простейшим механизмом подобного типа является механизм, в котором продукт высвобождается на второй из трех стадий [c.82]

В то)к случае, когда в реакционную смесь добавляется только один продукт, член, соответствующий обратной реакции в уравнении Скорости, равен нулю (за исключением редко Ьстречающих-ся односубстратных реакций, которые обсуждаются в разд.5.10). Единственный эффект, который оказывает введение продукта реакции, состоит поэтому в том, что оно приводит к увеличению знаменателя в уравнении скорости и, следовательно, к торможению реакции. На вопрос о том, в какой роли будет выступать ингибитор — как конкурентный, бесконкурентный или смешанный,— готового ответа не существует. Характер ингибирующего действия продукта реакции зависит от того, концентрация какого субстрата меняется в опыте. Однако если вопрос о выборе субстрата с варьируемой концентрацией решен, то анализ ингибирования продуктом становится очень простым. Знаменатель каждого уравнения скорости разбивают на варьируемые и постоянные члены первые содержат субстрат с варьируемой концентрацией, а вторые — нет. Как было показано в разд.5.5, зависит от варьируемых членов, в то время как аж м.каж — от постоянных . Поэтому (если мы вспомним, что говорилось о типах ингибиторов в гл.4) продукт выступает в роли конкурентного ингибитора в том случае, когда его концентрация входит только в постоянные члены, в роли бесконкурентного ингибитора — когда его концентрация входит только в варьируемые члены, и в роли смешанного ингибитора — когда концентрация продукта входит в оба члена. Если продукт может присоединяться только к одной из форм фермента, то в уравнение скорости входят члены, содержащие концентрацию продукта только в первой степени, и поэтому ингибирование будет линейным. Однако в том случае, когда продукт связывается также с ошибочными формами фермента и образуются тупиковые комплексы, возможно нелинейное иигибйрование. [c.131]

Возможны и другие механизмы односубстратных-однопродуктных реакций, но для иллюстрации достаточно обсудить два из них, приведенные выше. Отметим, что схема 1 в отличие от схемы 2 содержит стадию изомеризации фермента. Поэтому эти два механизма можно легко разграничить в опытах по ингибированию продуктом если выполняется схема 1, то РО и СР должны быть смешанными ингибиторами если выполняется схема 2, то РО и ОР — зто конкурентные по отношению друг к другу ингибиторы. В соответствии с этим Рэй и Росцелли [127], изучив реакцию, катализируемую фосфоглюкомутазой из скелетных мьшщ кролика, нашли, что ингибирование обоими фосфатами глюкозы носит чисто конкурентный характер, без всякой примеси неконкурентной составляющей. Они пришли к заключению, что в данном случае стадия изомеризации либо отсутствует, либо протекает так быстро, что формы Е и Е можно рассматривать как единую форму. Тем не менее Бриттон и Кларк [211, проведя серию элегантных экспериментов (см. ниже), сумели однозначно показать, что для этого фермента выполняется схема 1. [c.139]

В гл. 5 указывалось, что ингибирование продуктом реакциж совсем не обязательно должно быть конкурентным более того, конкурентный тип ингибирования не является типичным. Более общим является случай, когда продукт представляет собой смешанный ингибитор с константами ингибирования Кр и Кр соответственно [c.205]

Существуют ингибиторы и смешанного действия, что зависит от структурных особенностей ингибитора и фермента. Смешанный тип ингибирования может возникать и в случае, когда ингибитор соединяется не с исходным фе рмент-субстратньтм комплексом, а с какими-нибудь промежуточными продуктами, образующимися в процессе реакции. Известны виды торможения, когда ингибитор блокирует не фермент, субстрат или кофермент. Это наблюдается при концентрации ингибитора, близкой к концентрации субстрата или кофактора. [c.166]

Продукт реакции — глюкоза — ингибирует /3-глюкозидазу Г, = 0,5-16,4 мМ) [8-10, 12-14]. Отмечается также ингибирование бстратом — целлобиозой (/sT, = 10-41 мМ) [1, 12-14]. Сообща-ся о различных типах ингибирования глюкозой конкурентном 10], неконкурентном [1] и смешанном [8, 9, 12-14]. В работе [8] жазано, что а- и / -аномеры глюкозы ингибируют / -глюкозидазу i T.reesei в различной степени, причем более заметно выраже-I ингибирующее действие а-глюкозы. На основе механизма 1ешанного ингибирования Гонг и Тсао [12] описали кинетику [дролиза целлобиозы до 90%-ной степени конверсии субстрата )И варьировании его начальной концентрации от 5 до 40 мМ. [c.159]

На примере линолевой, линоленоюй и арахидоновой кислот исследовали влияние агрегации и добавок радикальных ловушек на процесс радиационного перекисного окисления в растворах мыл жирных кислот. Мерой начального образования гидроперекисей являлось образование сопряженных соединений, о котором судили по УФ-поглощению при длине волны 230 нм. Зависимость выхода гидроперекисей от концентрации мыла в системе и выход продуктов в смешанных системах свидетельствуют о том, что конфигурация ненасыщенных фрагментов играет существенную роль при определении длины цепи реакции перекисного окисления. На основании ряда экспериментов по конкурентному ингибированию и по влиянию добавок ЗгО показано, что основным радикалом, приводящим к инициированию цепей в данной системе, является ОН-ради-кал. Растворение спиртов, в особенности яреи-бутанола, в образованных мылом агрегатах приводит к незначительному снижению выхода сопряженных диенов, откуда следует, что радикалы спиртов в мицеллярной псевдофазе могут сами инициировать процесс перекисного окисления. Введение а -токоферола в агрегаты, образованные анионами линолевой кислоты, приводит к резкому торможению образования гидроперекисей даже при молекулярной концентрации относительно мыла, равной 1 10 . Облучение растворов мыла (Ь 10 М), содержащих низкие концентрации а-токоферола (2,5 10 М), может привести к потере антиоксидантны и возникновению у токоферола прооксидантных свойств. [c.327]

Эта схема включает четыре формы фермента (Е, Е8, Е1 и Е18) и шесть реакций, протекающих между ними. Все простые случаи можно получить, если не учитывать некоторых реакций. Так, ингибирование является конкурентным (разд. 4.2), если отсутствуют форма Е18 и протекающие с ее участием реакции неконкурентным (разд.. 4.4), если "отсутствует Е1, и смешанным (разд. 4.3), если в схеме присутствует как форма Е1, так и форма Е18, однако прямой переход между ними невозможен. Схема Боттса — Моралеса особенно полезна при анализе ингибиторов, которые не являются продуктами реакции. Несмотря на то что продукты реакции составляют важный класс ингибиторов и по своим кинетическим свойства близки к ингибиторам, не являющимся таковыми, их связь с рассмотренной схемой менее очевидна. [c.79]

Хернстен и другие [13] с помощью чувствительного к водороду РёМОППТ изучали влияние ампициллина на энтеробактерии. Для этого большое число проб энтеробактерий, взятых у пациентов с заболеваниями мочевых путей, культивировали в запаянных ампулах количество образовавшегося водорода определяли, вводя 2 мл изучаемого газа в ячейку сенсора типа РёМОППТ. Молекулярный водород является конечным продуктом смешанного кислотного брожения энтеробактерий и, следовательно, степень ингибирования образования водорода является мерой чувствительности бактерий к ампициллину. Почти во всех пробах в течение 5 ч удалось выяснить, остались ли бактерии жизнеспособными в присутствии ампициллина. Полученные результаты хорошо согласуются с выводами, достигнутыми с помощью обычного метода диффузии в агаровом диске. Эти результаты свидетельствуют о том, что определение продуцируемого водорода может стать полезным, простым и быстрым методом оценки устойчивости микроорганизмов к антибиотикам. [c.432]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология