Коэффициент активности молярного поглощения

Рис. 15.14. Изменения показателя преломления и молярного коэффициента поглощения е вблизи линии поглощения оптически активного вещества [5].

В дальнейшем речь будет идти о спектрах поглош,ения оптически активных соединений. Как правило, они записываются с помощью обычного спектрофотометра и приводятся в виде коэффициента экстинкции (или молярного поглощения) е. При его определении предполагается выполнимость закона Бугера — Ламберта — Беера и лишь сравнительно недавно [8, 9] химики, по-видимому, стали осознавать, что этот закон не выполняется для оптически активных растворов в тех областях спектра, где для них наблюдается круговой дихроизм. Строго говоря, расчет г для оптически активного вещества путем деления наблюдаемого поглощения О на толщину кюветы I и концентрацию с является неправильным. Причина того, что открытие этого факта было сделано так поздно, заключается в большинстве случаев в незначительности вводимых при этом численных ошибок. [c.107]

ВИСИМОСТЬ угла вращения от длины волны — вращательную дисперсию (ВД), —то можно отметить, что она может быть нормальной и аномальной. Нормальная вращательная дисперсия характеризуется монотонным убыванием угла вращения по мере увеличения длины волны. Для объяснения более сложного случая аномальной вращательной, дисперсии необходимо рассмотреть явление кругового дихроизма (КД). Последнее состоит в том, что в оптически активных средах в области длин волн, соответствующих полосе поглощения света, право- и левополяризованного поглощение света происходит по-разному. Для характеристики кругового дихроизма используют разность десятичного молярного коэффициента поглощения [c.130]

Выразив концентрации протолитических форм через кажущиеся константы Ка, и Ка протолитической диссоциации и активность А и перейдя к молярным коэффициентам поглощения, [c.656]

Ввиду использования высоких концентраций НАДН, имеющих оптическую плотность выше 1,5 ед. при 340 нм, измерения проводят не в максимуме поглощения НАДН, а при другой длине волны. Для этого обращаются к спектру поглощения НАДН, приведенному в приложении на с. 501. Пользуясь тем, что коэффициент молярной экстинкции НАДН при 340 нм равен 6,22-10 см рассчитывают его значение при других длинах волн. Для измерения активности ЛДГ выбирают длину волны, при которой поглощение раствора не превышает 0,6. [c.388]

Смесь оптически активных веществ может быть проанализирована спектрополяриметрическим методом, т. е. измерением угла вращения при разных длинах волн. Методика этого анализа очень близка к методике спектрофотометрического определения смеси двух окрашенных веществ. Расчетные формулы сохраняют свою применимость и в спектрополяриметрическом методе, если молярные коэффициенты поглощения е заменить удельными вращениями Оуд, учесть длину трубки и переход к другой концентрационной шкале. Точность анализа возрастает, если одно из анализируемых соединений (а еще лучше — оба) в исследуемой области спектра имеет длину волны нулевого вращения, так как при этой длине волны угол вращения будет определяться концентрацией только второго компонента. [c.158]

Бренстеда. Это можно объяснить, если предположить, что в реакциях диенового синтеза, катализируемых кислотами, имеются стадии переноса протона, обсуждаемые ниже. В случае фенолов, с другой стороны, наиболее активные катализаторы являются наименее сильными кислотами. Прибавление большинства из этих фенолов к раствору бензохинона в четыреххлористом углероде сопровождается увеличением молярного коэффициента поглощения света (470 ммк) по мере повышения величины k фенола. Эти наблюдения можно объяснить, если предположить [211] образование промежуточного соединения при переносе электрона от фенолов к бензохинону. В процессах переноса как протона, так и электрона образуются ионные пары HS+. .. В- и S . .. Н. .. В+ (S — субстрат НВ — катализатор). Предполагается, что молекула второго суб страта поляризуется в электронном поле этих ионных пар, что облегчает образование переходного состояния катализируемой реакции. Этим эффектом можно частично объяснить относительно низкие значения энергий активации (табл. 21). Не имеется указаний, что стереоспецифичность двух упомянутых выше катализируемых реакций Дильса — Альдера [211, 212] ниже по сравнению с некатализируемыми процессами. [c.86]

До сих пор рассматривалось только запаздывание К- и Ь-волн интересно также выяснить, что происходит с интенсивностью каждой из этих волн, когда они проходят через вещество. Если вещество оптически неактивно, поглощение обеих волн одинаково. Если, с другой стороны, вещество оптически активно, то тогда в интервале длин волн, при которых наблюдается поглощение (полоса поглощения), при каждой длине волны будет по-разному поглощаться свет с Ь- и Н-круговой поляризацией. Разность обычно выражается в терминах молярных коэффициентов погашения Ь- и К-компонентов света, еь и ек, т. е. [c.456]

Уравнение Ванселоу, основанное на химическом механизме процесса, выведено термодинамически с учетом валентности и коэффициентов активности обменивающихся ионов как в твердой, так и жидкой фазе. Поскольку методы онределения коэффициентов активности ионов в твердой фазе отсутствуют, Ванселоу предположил, что активности поглощенных ионов в твердой фазе пропорциональны их молярным долям, и дал уравнение [c.39]

Структура. В качестве метки в иммуноферментном анализе обычно используют глюкозооксидазу из Aspergillus niger. Фермент представляет собой гликопротеин, содержащий 16% углеводных групп, молекулярная масса 160 000, в состав входят 2 молекулы связанного флавинадениндинуклео-тида. Коэффициент молярного поглощения фермента при длине волны 450 нм —1,41-10 М -см . В нативном состоянии сульф-гидрильные группы в молекуле фермента не обнаруживаются, однако после денатурации в 8 М мочевине титруются 1—2 SH-группы на молекулу белка. Фермент обладает высокой стабильностью и сохраняет активность при хранении в течение нескольких лет в замороженном виде в концентрации 10 мг/мл. [c.72]

Принцип измерения каталитической активности основан на регистрации образующейся в реакции восстановленной формы кофермента (коэффициент молярного поглощения NADPH при длине волны 340 нм равен 6,22-10 М -см- ). [c.75]

Рис. 6.19. Теоретические соотнощения оптически активных полос поглощения света и оптического вращения (о), а также оптически активных полос поглощения и кругового дихроизма б). гп(1) — молярное оптическое вращение при длине волны Я, е(Х)—коэффициент экстинции полосы поглощения 0(Я.)—эллиптичность или. разность поглощения левого н правого циркулярно-поляризованных лучей света. [Bey hok S., S ien e, 154, 1288. 1966.Д

Для характеристики спектров КД вводят понятие разностного дихроичного поглощения Де, которое выражается уравнением Де = еь—ед, где п ед — молярные коэффициенты поглощения света, поляризованного по кругу влево и вправо соответственно. Величина Де имеет ту же размерность, что и величины е (л/моль-см). Для сравнения молярной амплитуды кривых ДОВ и КД удобнее использовать величину молярной эллиптичности [6]. получаемую из спектров КД. При прохождении плоскополяризо-ванного света через оптически активное вещество вблизи его полос поглощения свет приобретает некоторую эллипт1ичн0сть. Угол ф (см. рис. 20, г) является характеристикой этой эллиптичности. Величина tgф равна соотнощению малой и больщой осей эллипса [c.39]

Величина угла ф, выраженная в градусах, для 1М раствора оптически активного вещества при длине оптического пути 1 м называется молярной эллиптичностью [0]. Подсчет всех коэффициентов в уравнении (11.3) и приведение к нужной размерности дают следующую зависимость между величинами [0] и Де 0]=ЗЗОО Де. Применение молярной эллиптичности неудобно из-за того, что она измеряется в градусах, что часто приводит к путанице величин кругового дихроизма и оптического вращения, а кроме того, такие единицы измерения КД скрывают физическую сущность дихроичного поглощения. Величина же Де непосредственно связана с основным определением КД. [c.39]

В ходе реакции Q2 постоянно регенерируется и его концентрация остается постоянной. Окисленная форма СВ окрашена в фиолетовый цвет и имеет максимум поглощения при 612 нм (коэффициент молярной экстинкции — 12 000 М см ). Восстановленная форма СВ бесцветна. Таким образом, реакцию, катализируемую СУР, можно измерить спектрофотометрически при 612 нм по падению оптической плотности раствора СВ. Перед измерением активности препарат СУР размораживают и разводят в 50 раз буфером V. Фермент инкубируют при [c.425]

Множество проблем, описанных выше для алкогольдегидрогеназы, не являются особенностью этого фермента. Аналогичные трудности могут встретиться для любого металлофермента, если не применять со всей строгостью критерии Вейлли [4], предложенные для идентификации таких ферментов, а именно 1) прочное связывание иона металла белком 2) ловышение -соотношения металл — белок и специфической активности фермента в ходе его очистки 3) постоянное число грамм-атомов металла на моль очищенного фермента и 4) постоянное соотношение между содержанием металла и содержанием кофактора (или его связыванием). Хотя эти критерии вполне применимы для идентификации простых металлоферментов, например алкогольдегидрогеназы из дрожжей, в которой связанный металл и активные центры присутствуют в эквимолярных количествах, они могут привести к ошибкам в более сложных случаях, примером чего может служить история исследований алкогольдегидрогеназы из печени. В последнем случае получению ошибочных результатов также способствовала неопределенность в молекулярной массе и молярном коэффициенте поглощения фермента [91], и надо заметить, что неточность в определении этих параметров также приводит к ошибочному определению соотношения металл — белок. [c.459]

Со + Фосфатаза представляет особый интерес, так как электронный спектр Со(II) дает возможность судить о геометрии координации в активном центре. Видимый спектр Со2+-фермента имеет необычный вид [48, 55], и для него характерны максимумы при 640, 610, 555 и 510 нм. Молярные коэффициенты поглощения при этих длинах волн равны соответственно 250, 210, 350 и 280. Эта картина похожа на наблюдаемую для Со (II)-карбоангидразы (гл. 16). Она не отвечает ни октаэдрической, ни тетраэдрической координации лигандов Со П). В некоторой степени похожие спектры получены для пятикоординационных комплексов кобальта с расположением лигандов в вершинах псевдотригональ-ной бипирамиды [56, 57], хотя в случае фермента расщепление полос более выражено, что свидетельствует о пониженной снм мет-рии [48]. Спектры кругового дихроизма в видимой области сложны [48, 55]. Спектры ЭПР присоединенного к фосфатазе иона Сц2+ указывают на изменение его окружения при связывании второго иона этого металла [50]. [c.637]

В результате взаимодействия света, даже если он поляризован, с большинством веществ будут обнаруживаться только преломление и поглощение света. Однако взаимодействие некоторых молекул со светом чувствительно к плоскости поляризации падающего света. Такая молекула, или хромофор, называется оптически активной она характеризуется различными показателями преломления ль и лк и молярными коэффициентами погашения еь и ек для соответственно поля ризованных по кругу влево и вправо лучей. Оптическая активность характерна для многих органических веществ и почти всех биологических молекул. Будет хромофор оптически активным или нет, определяется его асимметрией. Если молекула асимметрична в том смысле, что она не может быть совмещена со своим зеркальным отображением, она является оптически активной. Примеры оптически активных структур даны на рис. 16-4. Здесь не будет объясняться [c.453]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология