Хроматограммы, оставляемые на ночь

Наливают подвижную фазу на дно цилиндра (высота слоя около 2 см) и подвешивают полоску бумаги таким образом, чтобы она не касалась ни стенок, ни жидкости. Оставляют ее так висеть в течение ночи, а на следующий день нижний край полоски погружают (по возможности не открывая камеру) приблизительно на 0,5 см в подвижную фазу (см. рисунок табл. 6). После того как растворитель поднимается на 20—25 см, полоску вынимают, отмечают карандашом положение фронта растворителя и хроматограмму высушивают. [c.79]

Подготовленные таким образом хроматограммы вносят в хроматографическую камеру, сразу же опуская концы бумаги в растворитель, и оставляют их в камере на 16—24 ч (обычно хроматограммы ставят в камеру на ночь). После извлечения из камеры хроматограмм их сушат вначале на воздухе, затем 5— 10 мин в сушильном шкафу при 60 °С для удаления из бумаги остатков органического растворителя. Высушенные хроматограммы из пульверизатора опрыскивают жидкостью для орошения (см.,выше) до тех пор, пока при просмотре на свет бумага равномерно не пропитается жидкостью. Далее хроматограммы снова сушат 5— 10 мин при 60 °С и облучают ультрафиолетовой лампой. О наличии тех или иных форм фосфорной кислоты в исследуемом растворе судят по появлению синих пятен, образующихся в результате восстановительного действия фосфомолибдата, и сопоставляют положение этих пятен с положением их на эталоне или рассчитывают значения параметра Rf. [c.210]

Для облегчения документаций тонкослойных хроматограмм использовали стеклянные пластинки с вытравленными плавиковой кислотой номерами. Для этого на угловой участок пластинки площадью 1 X 1 сж наносили пленку расплавленного воска, давали застыть и на его поверхности наносили иглой соответствующий номер. Номер смачивали несколько раз плавиковой кислотой при помощи ватного тампона на деревянной палочке. Пластинки оставляли на ночь, затем плавиковую кислоту смывали проточной водой, а воск счищали скальпелем. [c.7]

I. .I. Ltd. После пропитки бумагу вынимали из раствора и сушили при 100 °С. На хроматограмме бензоаты проступали в виде темных пятен на желтом флуоресцирующем фоне. Зоны с содержанием вещества около 10 М достаточно хорошо заметны. Количество вещества в зоне, равное около 10 М, превышало сорбционную емкость бумаги. Разделение проводили в насыщенных парами элюента камерах методом нисходящей хроматографии. Бензольный раствор бензоатов наносили на бумагу, которую затем помещали в камеру разделения, где находились три сосуда для растворителей. Бумагу подвешивали к центральному сосуду, в другую емкость наливали метанол, насыщенный гептаном, а в третью — гептан, насыщенный метанолом, и оставляли так на ночь. Затем в центральный сосуд наливали гептан через отверстие в крышке камеры и проводили разделение в течение 90 мин. За это время фронт элюента продвигался на 25 см. С помощью описанного метода разделили следующие спирты метанол (Rf=0,24) этанол (0,39) пропанол-1 (0,46) пропанол-2 (0,51) бутанол-1 (0,57) бу- [c.190]

Растворяют 0,5 г ацетата кадмия в смеси 50 мл воды и 10 мл концентрированной уксусной кислоты. Доводят до объема 500 мл ацетоном. К порции этого раствора прибавляют твердый нингидрин до конечной концентрации 0,2 7о. После опрыскивания хроматограмму наг девают 15 мин при 60 °С. Отмечают пятна аминокислот сразу же и через 24 ч хранения при комнатной температуре. Не возникает окрашенного фона, если хроматограмму после обработки реагентом без нагревания оставляют на ночь в темноте при комнатной температуре. У некоторых соединений (таурин, треонин) окраска проявляется очень медленно. Чувствительность обнаружения [c.269]

Чтобы снизить до минимума воздействие влаги воздуха на слой окиси алюминия, степень активности которой требуется определить, Гессе и сотр. [51] рекомендуют наносить контрольную смесь красителей иа предварительно активированный слой. Хроматограмму оставляют на ночь в эксикаторе над серной кисло- [c.54]

Заранее свернутый кусок хроматографической бумаги (25X27 см) разворачивают и на нижнюю часть- наносят узкоА полосой анализируемый раствор тигель ополаскивают двумя каплями раствора и промывную жидкость также наносят на бумагу. Затем бумага свертывается и опускается в приготовленный сосуд с растворителем. В том месте, где бумага пропускается через пробку, закрывающую сосуд, прокладывается-полоска целлофана. Для обеспечения равномерного испарения часть бумаги, которая находится на воздухе, разрезается в виде бахромы. Сосуд с хроматограммой оставляют на ночь. [c.37]

Для элюирования вещества с бумаги и концентрирования применяют специальные приспособления (фиг. 2). Нужное нятно вырезают из хроматограммы, оставляя острый кончик (фиг. 2, Л) затем его помещают между двумя небольшими стеклами (половинки предметных стекол) так, чтобы острый кончик бумаги выступал наружу стекла осторожно прижимают друг к другу скрепками и ставят вертикально (острым кончиком вверх) в чашку Петри с топким слоем (0,5 см) раствора 0,2 М ацетата, pH 7,5 (можпо-использовать и другие подходящие ростворители). Для работы с большим числом таких приспособлений (20 и более) можно использовать обычный гистологический штатив для предметных стекол, который ставят в чашку Петри. После того как вещество сконцентрируется на самом кончике уголка (обычно за ночь), бумагу высушивают, просматривают в ультрафиолете, отмечают поглощающую зону, вырезают ее и пришивают к листку бумаги Ватман 3 ММ. Если вырезанные пятнышки не используют сразу же, их можно хранить в небольшой ампуле. Разделение нуклеотидного материала с помощью двумерной хроматографии производят по методу Феликса и др. [2] так, как это описано далее в разд. П1. [c.15]

Что касается дикарбоновых кислот, то в виде гидроксаматов удается определить лишь несколько кислот, поскольку Rf для других значения часто перекрываются. В этом случае дикарбоновые кислоты могут быть идентифицированы хроматографически непосредственно в виде самих кислот. Для этого в качестве элюента использовали смесь пентанола-1, с 5Ai муравьиной кислотой (1 1 по объему). Стакан с водной фазой помещали в хроматографическую камеру. Хроматограммы оставляли на ночь, затем вынимали и сушили 1—2 ч током воздуха для удаления муравьиной кислоты. Хроматограмму опрыскивали 0,04%-ным раствором бромфенолового синего в 95%-ном спирте с pH ж 6,7. Кислоты проявлялись в виде желтых пятен на голубом фоне. Предел определения метода равен 0,1 мкмоль кислоты, значения Rf представлены в табл. 13.1. [c.445]

Разделение оснований ДНК проводят методом нисходящей хроматографии (с. 126). Растворитель заливают в камеру и оставляют на ночь для насыщения. На линию старта наносят по 0,05—0,1 мл гидролизата ДНК. На эту же хроматограмму наносят растворы оснований- свидетелей в количестве 0,05—0,07 мкмоль. Процесс разделения длится от 20 до 40 ч. Локализацию азотистых оснований проводят в ультрахемископе. Расположение оснований в порядке удаления от [c.178]

Для ускорения количественного превращения эфиров в производные с целью их последующего ГХ-анализа широко используют переэтерификацию, особенно метанолиз. Весь процесс требует немного времени и позволяет отказаться от использования концентрированной щелочи, которая может вызывать частичную изомеризацию полиненасыщенных кислот. Для проведения метанолиза на эфир действуют метанолом, содержащим кислоту или основание в результате образуется метиловый эфир соответствующей кислоты. Для определения метиловых эфиров жирных кислот, полученных из липидов [47] и эфиров воска [48], использовали метанольный раствор хлористого водорода. При анализе эфиров, полученных из воска, спирты и метиловые эфиры разделяли с помощью колоночной хроматографии, а затем уже анализировали методом ГХ, причем спирты определяли в форме трифторацета-тов. Для определения метиловых эфиров жирных кислот от Си до Сго, выделенных из липидов сыворотки человека [49], использовали метанол и серную кислоту еще одним реагентом для анализа липидов является ВСЬ в метаноле [50]. В работе [51] описан удобный метод получения производных при комнатной температуре и без выпаривания. В этом методе раствор жира в бензоле переносят в закрытую колбу, добавляют в колбу 2,2-диметокси-пропан (ДМП), метанольный раствор хлористого водорода и оставляют на ночь. После нейтрализации порцию полученного раствора вводят в газовый хроматограф. Кроме пиков метиловых эфиров на получаемой хроматограмме присутствуют и пики изо-пропилиденгликоля, образованного из ДМП и глицерина. Эти пики являются удобными стандартами для определения времен удерживания. ДМП связывает воду и способствует тем самым полному прохождению реакции. [c.141]

К 2 мл смеси метанола н уксусной кислоты (3 1), содержащей 400 мг реагента Т Жирардо (хлорид триметиламмоннйацетгидразида), добавляют раствор, содержащий 1—20 мг смеси веществ. Реакционную смесь оставляют на ночь при 37 °С в атмосфере азота, затем упаривают в вакуу.ме досуха остаток наносят на хроматограмму. [c.117]

В чугунный котелок емкостью 0,5 л, снабженный капельной воронкой и обратным холодильником, загружают нитрующую смесь состава 30% HNO3, 67% H2SO4, 3% Н2О — в количестве, эквивалентном 67,5 г (1,07 моль) азотной кислоты. Включив мешалку, в течение часа при температуре не выше 40° прибавляют по каплям 56 г (0,5 моль) хлорбензола. Когда вольют весь хлорбензол, массу медленно нагревают до 105° и выдерживают ее при этой температуре 1 ч. Реакцию считают оконченной, если в хроматограмме (растворитель I4) не обнаруживается зоны хлорбензола. После этого ее охлаждают до 70—75° и, размешивая, выливают в фарфоровый стакан с 500 г измельченного льда. Температура смеси не должна подниматься выше 20°. Ее оставляют в стакане на ночь. [c.25]

Полоску с веществом-свидетелем просматривают в ультрахе-мископе УН-1 и отмечают положение пятна. Полоски с испытуемым препаратом наклеивают на чистый лист писчей бумаги 30x40 и вносят в кассету для рентгеновских пленок, В темной комнате на лист с хроматограммами накладынают рентгеновскую пленку светочувствительной стороной вниз. Кассету закрывают и оставляют в темной комнате на ночь для получения радиоавтограммы. Утром пленку вынимают и проявляют. [c.43]

Стандартизированные методы активирования и реактивирования необходимы как условие для точной воспроизводимости. Авторы работы [13] считают, что пластинки со слоями из силикагеля О лучше оставлять на ночь при обычной температуре, чем высушивать в течение 30 мин при ПО—120° перед охлаждением в эксйкаторе. Хотя установлено [14], что значения Rf на слоях силикагеля О увеличиваются с изменением толщины слоя в пределах 0,25—1,0 мм, толщина слоя и угол наклона пластинок в камерах рассматриваются [15] как малозначащие факторы кроме того, отмечается, что температура и расстояние, пройденное фронтом растворителя, также не очень существенны особенно важны активность адсорбента и метод развития хроматограммы. Поскольку активность адсорбента сильно зависит от присутствия воды, рекомендуется насыщать пластинки с тонким слоем растворами солей для получения стандартных условий па пластинках. [c.54]

Хроматографирование проводят в течение 24 часов при 5 омнатной температуре. После этого хроматограмму вынимают из камеры, высушивают под тягой феном или вентилятором в течение 15—20 минут и оставляют на ночь. На другой день хроматограмму сушат при температуре 60—80° около 2 часов для удаления следов муравьиной кислоты. Затем хроматограмму проявляют. В качестве проявителя берут спиртовой раствор бром-фенолового синего в концентрации 0,05%. Хроматограмму равномерно опрыскивают этим раствором из пульверизатора или быстро на короткое время погружают ее в раствор. Органические кислоты проявляются в виде желтых пятен на голубом фоне. [c.129]

Закончив хроматографирование, бумагу подсушивз ют под тягой и оставляют на ночь. На следующий день хроматограмму сущат при температуре 60—80° в течение 2—3 часов для удаления следов муравьиной кислоты. [c.131]

Подготовленные таким образом хроматограммы вносят в хроматографическую камеру, сразу же опуская концы бумаги в растворитель, и оставляют их в камере на 16—24 ч (обьпшо хроматограммы ставят в камеру на ночь). После извлечения из камеры хроматограмм их сушат вначале на воздухе, затем 5—10 мин в сушильном шкафу при 60° С для удаления из бумаги остатков органического растворителя. Высушенные хроматограммы при помощи пульверизатора опрыскивают жидкостью для орошения (см. выше) до тех пор, пока при просмотре на свет бумага равномерно пропитается жидкостью. Далее хроматограммы снова сушат в течение 5—10 мин при 60° С и облучают ультрафиолетовой лампой. [c.224]

Ход определения. Навеску полифосфорной кислоты 2—3 г, взятую с точностью до 0,001 г, помещают в мерную колбу емкостью 100 мл, погружают колбу в охлаждающую смесь воды со льдом и медленно, не допуская разогревания, нейтрализуют 30%-ным раствором NaOH до появления слабо-розовой окраски (по фенолфталеину). Затем добавляют дистиллированную воду и доводят раствор до метки. На точки линии старта на хроматографическую бумагу микронн-петкой наносят по 0,01—0,02 мл анализируемого раствора (25—50 мкг фосфора). Подготовленные таким образом хроматограммы вносят в хроматографическую камеру, сразу же опуская концы бумаги в растворитель, и оставляют их в камере на 16—24 ч (обычно хроматограммы ставят в камеру на ночь). После извлечения из камеры хроматограммы сушат вначале на воздухе, затем 5—10 мин в сушильном шкафу нри 60 С для удаления из бумаги остатков органического растворителя. Высушенные хроматограммы при помощи пульверизатора опрыскивают жидкостью для орошения до тех пор, пока (просмотр на свет) бумага не пропитается жидкостью равномерно. Далее хроматограммы снова сушат 5—10 мин прн 60 С и облучают у.льтрафиолетовым светом. [c.126]

Пиретрины Бумагу ватман № 3 ММ хроматографически промывали последовательно 1 н. водным раствором аммиака водой и перегнанным этиловым спиртом и высупшвали. Образцы наносили специальной кистью и бумагу оставляли на ночь в парах раствора концентрированного водного аммиака в 95%-ном этиловом спирте (5 вес. % в объеме) и затем проявляли растворителем. Хроматограммы слегка опрыскивали раствором хлорфенола красного, бумагу разделяли на три зоны и элюировали водным раствором аммиака. Элюат очищали и остаток титровали раствором едкого натра с тимоловым синим в качестве индикатора. [c.85]

В особых случаях применяют специально импрегпированную бумагу, что позволяет одновременно использовать и другие адсорбенты. Для приготовления бумаги с окисью алюминия фильтровальную бумагу пропитывают раствором 20 г алюмокалиевых квасцов в 100 мл воды, отжимают между листами сухой фильтровальной бумаги, оставляют на ночь в атмосфере аммиака, затем промывают в проточной воде в течение 6 ч и высушивают при 110 °С. Проявление хроматограммы на такой бумаге следует осуществлять при помощи безводных растворителей. Для приготовления бумаги с силикагелем фильтровальную бумагу пропитывают разбавленным водой раствором жидкого стекла (1 1), так же отжимают ее между листами сухой фильтровальной бумаги, опускают в 6 п. соляную кислоту, после чего промывают в проточной воде в течение нескольких дней до исчезновения кислой реакции и высушивают при 110 °С. [c.293]

Для хроматографического анализа 3,4-бензпирена и ряда других полициклических ароматических углеводородов применяли бумагу, импрегнированную М,Н-диметилформамидом [12—15]. Разделение проводили гексаном, насыщенным N,N-димeтилфopмaми-дом, как ранее это описали Заффарони с сотр. [16, 17]. Лист, фильтровальной бумаги Ватман № 1 насыщали перегнанным N,N-диметилформамидом и высушивали в течение 1 ч. Зате.м раствор пробы в бензоле объемом 1 мкг наносили на расстоянии приблизительно 5 см от нижнего края хроматограммы. В камеру для разделения помещали фильтровальную бумагу и поддерживали насыщение газовой фазы парами растворителя. Систему оставляли для уравновешивания на ночь, после чего разделение проводили методом восходящей хроматографии в темноте для предотвращения разрушения образца под действием света [12]. В этот метод были внесены изменения, предусматривающие контроль за относительной влажностью, что улучшает разрешение и воспроизводимость величин Rf [13]. Для этого перед насыщением N,N-димeтил-формамидом бумагу сушили в течение 1 ч при 120 °С, после чего ее хранили в эксикаторе над хлоридом кальция. В разделительную камеру также помещали хлорид кальция. [c.183]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология