Окисление меченых субстратов

ОКИСЛЕНИЕ МЕЧЕНЫХ СУБСТРАТОВ [c.61]

Окисление меченых субстратов [c.69]

Анализ воды, полученной отгонкой из растений, дышавших в течение 13 ч. 30 м. меченым кислородом, обнаружил более заметное обогащение меченой водой, а спустя 96 час. это обогащение в воде стало уже весьма отчетливым. Эти данные дают возможность предположить, что тяжелый кислород непосредственно не соединяется с углеродом субстрата дыхания, а идет лишь на окисление его водорода до воды, в результате чего концентрация биосинтетической меченой воды в тканях растения постепенно повышается. С другой стороны, приведенные данные говорят скорее в пользу внедрения 0 через посредство воды, так как небольшое обогащение тяжелым кислородом обнаруживается в углекислоте лишь через 13 ч. 30 м., т. е. тогда, когда и в воде обнаруживается обогащение 0 . [c.127]

Показано, что превращения субстратов под влиянием ряда тканей и экстрактов соответствуют их превращениям по пути ЭМП. Например, ацетоновые препараты из семян гороха превращают количественно глюкозо-6-фосфат в этиловый спирт и СОг. Предполагалось, что радиоактивные атомы углерода меченой глюкозы при окислении по пути ЭМП попадут в этанол и СОг, как показано в табл. 13. [c.120]

ДМБ в системе метанол—0,5 М гидроксида калия не удалось найти убедительных доказательств осуществления того или иного механизма из-за низкого предела анодного тока в присутствии даже небольшого количества диоксида углерода. Тем не менее можно предположить, что первой стадией является окисление ароматического соединения, сопровождаемое реакцией ароматического положительного иона либо с метилат-ионом, либо с метанолом. Для выяснения механизма анодного метоксилирования 1,3-ДМБ электрохимическую реакцию проводили с субстратом, меченным изотопом по одной из метоксигрупп. Поскольку цродукт полностью сохранял радиоактивность, ясно, что окисление 1,3-ДМБ в 1,2,4-триметоксибензол происходит без потери исходной метоксигруппы, т. е. без рзо-атаки нуклеофила (как, например, в верхней строке схемы 5-4) с последующим элиминированием метанола. [c.215]

Окисление гидроксила в положении 4 до кетона делает возможным отщепление воды из положений 5—6, за которым следует восстановление в положении 6 и кетонизация конечного енола. Меченый водород из положения 4 субстрата переносится в положение 6 молекулы продукта реакции, [c.128]

Насекомым требуется пища, содержащая стерины, которые необходимы для образования гормонов линьки ряда экдизона [55]. В этом случае скелетной трансформации также предшествует модификация боковой цепи. Холестерин превращается в 7-дегидрохолестерин путем потери 7 - и 8[1-водородных атомов и последующего окисления с образованием характерной системы 14а-гидрокси-7-ен-6-она. Как было показано в опытах с применением меченых субстратов, в процессе биосинтеза экдистерона (62) Зр,14а-дигидр-окси-5[ -холестен-7-он-6 (61) гидроксилируется сначала по С-25 и затем по С-22 и С-21. В организмах травоядных насекомых происходит деалкилирование боковой цепи фитостеринов с образованием экдизона. Весьма примечательно, что соединения экдизо-нового ряда образуются в заметных количествах и в некоторых растениях биосинтез таких фитоэкдизонов также изучен. [c.499]

Дополнительные подтверждения упорядоченного присоединения кофермента и субстрата для НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ могут быть получены на основе измерения скоростей взаимного превращения восстановленных и окисленных форм субстрата и кофермента для системы, находящейся в равновесии, с помощью введения меченых реагентов [15—19]. В работе [20] изучили таким путем скорости взаимопревращений НАД НАДН и окса-лоацетат малат для находящейся в равновесии реакции, катализируемой малатдегидрогеназой из митохондрий сердца свиньи. С одновременным увеличением концентраций малата и оксалоацетата при сохранении постоянства отношения концентраций этих реагентов скорость их взаимного превращения при pH 8,0 (рис. 16) непрерывно растет, в то время как скорость взаимного превращения НАД и НАДН проходит через максимум и уменьшается практически до нуля. С увеличением концентраций субстратов растет доля тройных комплексов, и падение скорости обмена НАД НАДН означает, что выход НАД или НАДН из тройного комплтекса невозможен. Эти данные указывают на упорядоченное связывание кофермента и субстрата. Однако при pH 9,0 (рис. 17) скорость обмена НАДч НАДН при больших концентрациях малата приближается к предельной величине, заметно отличающейся от нуля, что свидетельствует в пользу частично упорядоченного механизма. Таким образом, несмотря на большую распространенность, [c.89]

Введение в З -концевое звено РНК 3, 5 -дифосфатов, меченных Р по 5 -фосфатной группе, может быть осуществлено с помощью РНК лигазы, присоединяющей субстрат к З -ОН-группе. З -Конец РНК может быть маркирован также тритием с помощью химических методов окислением перйодатом и восстановлением бортри-тидом натрия. При этом используется РНК, не содержащая З -фос-фатной группы. [c.317]

Гиббереллиновая кислота — представитель класса нордитер-пенов, полученных из Gibberella fujikuroi, вызывает необычную стимуляцию роста некоторых высших растений. Их биосинтез широко исследовался вследствие возможного применения этих соединений сельском хозяйстве и из-за их интересной структуры. На отдельных стадиях окисления этой сложной серии веществ выходы довольно низкие (их обычно оценивали по проценту включения меченого атома), но эти реакции потенциально полезны с синтетической точки зрения как. для данного ряда соединение,- так и для родственных групп веществ. Эти реакции были бы Особенно интересны, если бы можно было найти штаммы микроорганизмов, которые могли бы накапливать нужный продукт. Можно также модифицировать субстрат, чтобы повысить эффективность его микробиологического окисления. Например, превращение гиббереллина А12 в гиббереллиновую кислоту протекает с выходом только 0,7%, но диол, полученный при восста- [c.36]

Использование тяжёлого кислорода в биологических исследованиях. Касаясь использования кислорода, меченого в биологических исследованиях, необходимо отметить работы Б. Б. Вартапетяна [15-17], проведённые в Институте физиологии растений (ИФР) АН СССР, который изучал скорость поступления и распределение Н О в тканях различных органов растений фасоли. Автор обнаружил, что не во всех органах растений сразу достигается равновесие между водой в тканях растений и водой питательного раствора. В листьях и корнях растений имеется какое-то количество труднообмениваемой воды. В других работах автор исследовал с использованием Нз О и 2 окисление катехинов, которые играют большую роль для получения качественного чая при его технологической переработке. Было показано, что в состав окисляемых соединений включается как атмосферный молекулярный кислород, так и кислород Н2О. Наряду с прямым включением в состав конденсированных продуктов, молекулярный кислород используется как акцептор водорода субстрата окисления. В своих исследованиях дыхания растений с использованием и Н О автор показал, что молекулярный кислород, поглощаемый из атмосферы при дыхании проростков пшеницы, не выделяется прямо с СО2 дыхания, а идёт на образование Н2О в тканях растения, тогда как изотопный состав кислорода углекислоты дыхания соответствует изотопному составу воды ткани. Автором разработан метод для изотопного масс-спектрометрического анализа кислорода органических соединений. [c.552]

Только концевой трехуглеродный фрагмент молекулы жирной кислоты с нечетным числом атомов углерода является потенциальньп субстратом для образования гликогена, поскольку только из этой части молекулы при окислении образуется пропионат. Тем не менее меченые углеродные атомы жирных кислот после прохождения через цикл лимонной [c.295]

Другой пример применения радиоизотопов — установление последовательности работы ферментов при окислении глюкозы. Существует несколько возможных путей окисления глюкозы. В аэробных организмах их два гликолиз с циклом трикарбоновых кислот и пентозо-фосфатный. Зачастую в организме и соответствующих тканях присутствуют ферменты для обоих типов метаболизма, и интересно выяснить роль каяедого из них. Оба пути приводят к полному окислению глюкозы до двуокиси углерода, но щесть атомов углерода глюкозы принимают участие в ее образовании в разной степени (по крайней мере на начальных стадиях превращения экзогенно добавленного субстрата). Поэтому можно выявить двуокись углерода, образовавшуюся при окислении специфически меченой глюкозы (например, С-глюкозы, в которой радиоактивный изотоп С содержит только Св-атом глюкозы), и выяснить участие каждого из метаболических путей в процессе окисления. [c.209]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология