Меченые реагенты

Различные изотопы, в том числе радиоактивные, находят широкое применение в химии как средство получения меченых реагентов и последующего наблюдения за ними в процессе превращения в продукты реакции. Радиоактивные изотопы особенно удобны для химического анализа. [c.436]

Метод основан на осаждении ионов определяемого элемента в виде нерастворимого осадка избытком осадителя (реагента) известной концентрации, меченного радиоактивным изотопом. Удельная активность осадителя (реагента) должна быть известна. Метод применим во всех случаях селективного образования определяемыми ионами нерастворимого осадка с меченым реагентом. [c.346]

Для того чтобы установить, какая именно связь разрывается в сложном эфире, ацил — О или алкил — О, использовали меченый реагент Нг Ю. Если рвется связь ацил —О, меченый кислород должен появиться в молекуле кислоты, если же рвется связь алкил — О, он появится в молекуле спирта (т. 2, реакция 10-11). Хотя в реакции не участвуют радиоактивные соединения, наличие 0 в той или иной молекуле можно определить масс-спектрометрически. Аналогичным образом для метки водорода используется дейтерий в этом случае отпадает необходимость в масс-спектрометрических определениях, так как замещение дейтерием можно установить по ИК- и ЯМР-спектрам. [c.286]

Некоторые из меченых реагентов, используемых для определения гидроксильных групп алифатических соединений, применимы и для определения фенолов, структура которых не имеет пространственных затруднений, препятствующих их этерификации. [c.83]

Почти все радиохимические методы определения алифатических гидроксильных групп основаны на этерификации этих групп мечеными ангидридами кислот и хлорангидридами. При определении микро- и полу микроколичеств соединений с гидроксильными группами, в особенности стероидов и стеринов, присутствующих в биологических жидкостях, большое значение имеют радиохимические методы с исиользованием двух радиоактивных изотопов. Для выделения производных в этих методах широко применяют хроматографию. хМ а к р о к о л и ч е с т в а многих соединений можно определять, комбинируя методы меченого реагента и изотопного разбавле- [c.70]

Для определения макроколичеств соединений с активными гидроксильными группами был предложен комбинированный метод 123], в котором используется меченый реагент — З-хлор-4-метокси-бензоил- С1-хлорид в сочетании с прямым изотопным разбавлением. Реагент синтезируют в два этапа сначала обрабатывают Ах-метоксибензойную кислоту элементарным изотопом а затем полученный продукт с помощью тионилхлорида превращают в хлорангидрид. Первым шагом в анализе является приготовление чистого меченого эфира определяемого соединения. Для этого [c.77]

Лауриновую, миристиновую, пальмитиновую и стеариновую кислоты, каждая в количестве 40 мкг, разделяли методом хроматографии на бумаге с обращенными фазами. Для разделения использовали бумагу, пропитанную смесью низкомолекулярных углеводо-дов точность определения от —1,3 до +1,4%) [119]. В этом методе ориентационную, калибровочную и основную хроматограммы проявляли и высушивали одновременно. После кондиционирования аммиаком в течение 6—8 ч ориентационную (калибровочную) хроматограмму погружали в 0,03%-ный водный раствор нерадиоактивного Со(ОАс)2 и проявляли хорошо разделенные пятна 1%-ным раствором сульфида аммония. Остальные хроматограммы после кондиционирования аммиаком разрезали на кусочки размером 3 см. Те кусочки, которые содержали часть идентифицированных одиночных пятен, погружали в раствор меченого реагента и промывали, в результате чего образовывался Со5. После этого определяли полную радиоактивность °Со5, полученного из каждой кислоты. Содержание каждой кислоты в пробе вычисляли по полной радиоактивности соответствующих пятен основной и калибровочной хроматограмм, принимая во внимание, что полная радиоактивность пропорциональна количеству данной кислоты в пробе. Во избежание ошибок необходимо строго контролировать величину pH раствора. При pH < 5,8 образование соли не является полным, а при pH > 6,0 на бумаге адсорбируются трудно десорбируемые ионы кобальта. [c.163]

Дальнейшее изучение метода показало, что он не является абсолютным и не позволяет анализировать любое неизвестное соединение с использованием одного и того же калибровочного графика, построенного по результатам анализа подходящего известного соединения [20]. В этом исследовании вещества с различными (1)ормами активного водорода анализировали с использованием одной и той же порции меченого реагента. При этом для бензойной кислоты и я-бутанола были получены согласующиеся результаты, а результаты для анилина значительно отличались от соответствующих результатов, полученных с использованием меченого спирта. Растворимые образцы полиэтиленадипината, содержащие в основном концевые гидроксильные группы, хотя и давали прямолинейный калибровочный график, выделяли меньше трития, чем эквивалентное количество я-бутанола. Для того чтобы в анализе анилина количество выделяющегося трития было достаточно близким к количеству трития, выделяемого данным количеством амина, требовался свежий реагент. Этот анализ проводили с применением модифицированного оборудования, описанного ниже. Такой эффект, связанный с наличием в реагенте остаточных продуктов от предыдущих реакций, не наблюдался в анализе н-бута-нола в этом анализе можно было использовать раствор реагента, /ке использовавшийся в анализах анилина и бензойной кислоты. [c.253]

К веществам, для которых наблюдается сигнал ЭПР, относятся органические и неорганические свободные радикалы ионы с частично заполненными внутренними уровнями (3 /- и 4 /-переходные элементы и некоторые 4/элементы) атомы и молекулы с нечетным числом электронов кристаллы, имеющие центры окраски металлы и полупроводники, имеющие электроны проводимости. Ограничением метода ЭПР является малое число объектов, доступных для исследования, поскольку большинство ионов металлов и органических веществ диамагнитно. Возможности метода расширяют за счет комплексообразования диамагнитных ионов с органическими лигандами, являющимися стабильными свободными радикалами (спин-меченые реагенты). В этом случае концентрацию диамагнитного иона определяют по парамагнетизму органической части компонентов соединения. [c.335]

Иммунохимические методы, основанные на использовании меченых реагентов, широко применяют дпя определения биологически активных соединений самой разнообразной структуры — от низкомолекулярных гормонов до высокомолекулярных вирусов и целых клеток. Внедрение гомогенного варианта ИФА в область клинической биохимии содействовало созданию высокочувствительных методов определения гормонов, наркотических и лекарственных веществ. Большим преимуществом этого метода является возможность использования малых объемов анализируемой пробы (5—50 мкл) и отсутствие стадии пробоподготовки. [c.115]

Задача 20.25. Предложите, каким образом из бензола и следующих С-меченных реагентов можно получить С-бензойную кислоту. [c.322]

Теперь, если этот последний полимер превратить снова в исходный, но без меченого реагента, то полученное вещество будет иметь радиоактивность меньшую, чем исходный полимер, причем эта разница будет определяться относительной реакционной способностью быстро и медленно реагирующих групп и степенью конверсии, при которой первоначальная полимераналогичная реакция была остановлена и процесс направлен в обратную сторону. Такой сополимер будет иметь следующее строение [c.40]

Введение метки химическим синтезом. Известно, что метку предпочтительно вводить на последних стадиях синтеза из-за соображений радиационной безопасности и с целью уменьшения количеств используемого в реакции, и как правило, дорогостоящего меченого реагента. Как уже отмечалось, проблему получения необходимого немеченого предшественника иногда можно упростить, используя доступные коммерческие препараты, или выделяя соответствующий продукт из природных объектов (например, простагландин 3 для синтеза меченого простагландина Е2), или же модифицируя исходное соединение, например, превращением двойных связей в тройные [8]. Если [c.523]

Для определения концентрации реагента используют разли ь ные методы, например спектрофотометрические, титриметрические или радиохимические (меченый реагент, как, например, 8-меркаптохинолин, содержащий 8 ). Так как Рна обычно велика, во многих случаях определяют равновесную концентрацию в водной фазе, концентрацию в органической фазе находят по разности между общей концентрацией и концентрацией в водной фазе. [c.32]

При экстракции внутрикомплексных соединений лучше метить металл, а не реагент, и измерять радиоактивность органической фазы. В этом случае активность линейно связана с концентрацией комплекса. При измерении активности в водной фазе потребовалось бы находить отклонение радиоактивности от ее аддитивного значения. Использование меченого реагента не позволяет непосредственно использовать измеренную активность ни в том, ни в другом случае. Изменение радиоактивности металла в изомолярной серии показано на рис. 47. [c.134]

Экстракционное радиометрическое титрование можно проводить и с меченым реагентом а также в том случае, когда радиоактивными являются и определяемый элемент, и реагент. Кривые титрования при этом будут различными, причем они будут зависеть, естественно, также от того, активность какой фазы измеряется. [c.208]

Синтез долгоживущих Р. с. осуществляют разнообразными методами, включая одноэлектронные окислит.-восстановит. и региоселективные р-ции без затрагивания парамагнитного центра (подробнее см. статьи об отдельных группах долгоживущих Р. с.). Т. обр., напр., получают спин-меченые реагенты, высо сомол. радикалы и др. [c.156]

Принцип, положенный в основу методов RIA [91, 117], аналогичен принципу методов ELISA эти методы в основном различаются тем, что для мечения вместо ферментов применяются радиоактивные элементы (главным образом йод) [49]. Широко используемый вариант этого метода не предусматривает иммобилизацию одного из реагентов реакция проходит в растворимой фазе, поэтому очень важным дополнительным этапом является отделение меченых реагентов, участвующих в иммунокомплексах, от тех, которые не участвуют. Если антиген представляет собой белок, обычно проводят разделение иммунокомплекса, осаждая его антителами к иммуноглобулинам кролика (если специфические антитела к белку индуцированы у кролика) [49]. [c.108]

Существует радиохимический метод определения соединений с гидроксильными группами, в котором не требуется ни вводить поправок на нерадиоактивные примеси, ни готовить чистое меченое производное для каждого из определяемых соединений [126, 127]. Этот метод основан на использовании п-иодбензоил- Ч-хлорида. Он имеет высокую чувствительность и поэтому в принципе применим к определению пробы любого веса. Однако в этом методе требуется, чтобы определяемые соединения этерифицировались количественно и, кроме того, чтобы образующиеся эфиры можно было выделять или разделять с помощью жидкостной хроматографии. После введения в колонку порции раствора эфира или смеси эфиров обычным образом ведут проявление подходящим растворителем. При этом от верхнего конца колонки к нижнему перемещают датчик сцинтилляционного счетчика, которым измеряют уизлуче-ние изотопа и определяют тем самым распределение радиоактивности вдоль колонки. В другую такую же колонку (колонку сравнения) вводят известное количество подходящего эфира, образованного тем же меченым реагентом, и тем же способом измеряют распределение радиоактивности вдоль нее. После этого определяют площади пиков на полученных радиохроматограммах. Содержание М (мМ) каждого соединения с гидроксильными группами в пробе вычисляют по формуле [c.80]

Эффективность этого метода была продемонстрирована и его применением для оценки 1,3 - и 1,4 -связей в декстранах после окисления перйодатом и гидролиза [90]. В этом анализе о-глюкозу, образованную из структур с 1,3 -связями, и D-эритрозу, образованную из структур с 1,4 -связями, превращали в меченые циангидрины, которые затем подвергали гидролизу до солей щелочных металлов о-глицеро-о-гулогептоновой и о-арабоновой кислот соответственно. Гидролиз осуществляли в присутствии избытка цианида без выделения промежуточных продуктов. Перед выделением и перекристаллизацией полученных производных в раствор добавляли в качестве носителей соли щелочных металлов этих кислот. Для проведения калибровки известные количества d-глюкозы и D-эри-трозы обрабатывали тем же количеством меченого реагента, затем добавляли в растворы определенные количества указанных выше носителей и сравнивали удельные радиоактивности солей, выделенных из анализируемой и из стандартных проб. [c.117]

Для определения миристиновой кислоты был создан метод с использованием радиореагента и обратного изотопного разбавления 411], в котором применяется п-бромфенацил- С-бромид. Этот метод применим также и для анализа других жирных кислот. Степень этерификации миристиновой кислоты в 95%-ном этаноле (pH раствора выше 8,5) при температуре кипения достигает максимального значения (60%) за 50 мин и остается постоянной по крайней мере в течение 30 мин. Предварительно этот максимум определили путем анализа на бром. Сам метод основан на обработке анализируемой смеси меченым реагентом в условиях, аналогичных тем, [c.157]

Если спиновое движение электрона не осложнено взаимодействием с орбитальным, то -фактор близок к чисто спиновому значению 2,0023. Это реализуется в органических радикалах или, например, в спин- меченых реагентах. В остальных случаях имеет место отклонение g-фактора от чисто спинового значения, и оно тем больше, чем больше спин-орбитальное взаимодействие, поэтому g-фaктop — важная характеристика вещества, позволяющая проводить его идентификацию и обнаружение. [c.348]

Известно более 40 производных аминокислот, при помощи которых можно определять Ы-концевые остатки аминокислот в пептидах и белках. Однако эти соединения редко идентифицируют методом жидкостной хроматографии обычно удовлетворяются качественным анализом при помощи тонкослойной хроматографии. При этом с целью облегчения детектирования стремятся использовать окрашенные флуоресцирующие или радиоактивно меченные реагенты. В качестве примера можно привести 3,5-динитрофенилизо йоцианат [32—34] и 4-дИметила-мино-3,5-динитрофенилизотиоцианат [32—35]. Много внимания было уделено вопросу применения в аналитической химии белка меченого иодбензол-п-сульфонилхлорида (пипсил-хлорида) [36, [c.384]

Рис. 6.12. Аффинная хроматография на колонке с нуклеаза—сефарозой аффин-но-меченных реагентами I и II пептидов [61].

Методы введения тритиевой метки можно разделить на две основные группы различные варианты изотопного обмена и химические методы. В свою очередь, методы изотопного обмена подразделяются на реакции с газообразным тритием и реакции с тритиевой водой, а химические методы — на методы введения метки гидрированием или дегалоидированием газообразным тритием методы восстановления тритийсодержащими реагентами соответствующих предшественников методы с использованием конденсации сложных немеченых фрагментов с мечеными реагентами на последних стадиях синтеза или с использованием меченых предшественников в многостадийном синтезе. Кроме того, возможно превращение одних меченых соединений (полученных химическими методами или изотопным обменом) в другие ферментативными и химическими методами. Формулы ряда препаратов, в которые вводили метку перечисленными выше методами, приведены на соответствующих рисунках. [c.485]

Химические методы введения тритиевой метки. Введение метки методами гидрирования, селективного гидрирования, дегалоидирования и селективного дегалоидирования (молярные радиоактивности препаратов в приведённых примерах достигали нескольких ПБк/моль) в этой работе уже подробно описано. В данном разделе будут рассмотрены другие подходы введение метки восстановлением соответствующих предшественников комплексными тритидами металлов, конденсацией соответствующих предшественников с мечеными реагентами, химическим синтезом. [c.522]

Чаще всего [8] для введения метки конденсацией с меченым реагентом используется коммерческий С[ Нз]1. Применяют также [ Hз]MgI, приготовляемый из меченого иодистого метила (3,0-3,1 ПБк/моль) [8]. Например, синтез 4 -хлор[ Н]диазепама был осуществлён метилированием меченым подпетым метилом соответствующего предшественника. Синтез проводили следующим образом. Раствор деметил-4 -хлордиазепама в толуоле обрабатывали С[ Нз]1 (3,2 ПБк/моль) при соотношении реагентов (40 1) в присутствии [(С4Н9)4М]2804 и образовавшийся искомый продукт очищали ВЭЖХ [58 . [c.523]

Описаны способы радиометрического титрования мечеными реагентами, выполняемые методом осаждения образующегося внутрикомплексного соединения. Так, при помощи З-метил-5-фенилпиразолиндитиокарбами-ната, содержащего изотоп титровали таллий (III), индий и другие элементы [671, 672]. [c.208]

Меченые реагенты. Выше шла речь об использовании радиоизотопов экстрагируемых элементов. Однако иногда целесообразно применять и меченые реагенты. Это может облегчить, например, исследование распределения самих органических реагентов или изучение их химических взаимодействий. В качестве изотопов, которыми можно метить хелатообразующие реагенты, заслуживают внимания СР , Ряд меченых оое ди1нений, пригод- [c.241]

Вероятно, меченые реагенты удобно будет использовать и для других целей. Важно, чтобы свободный реагент не экстрагировался или легко удалялся из экстракта. Меченые реагенты могут оказался полезными при определении состава экстрагирующихся внутрикомплексных соединений методом изоморфных серий в его варианте, который использовал Шпеккер [812]. При этом измеряют выход в экстракт обоих компонентов, составляющих экстрагируемое соединение (в нашем случае — металл и органический реагент). В методе молярных отношений и методе изомолярных серий меченые реагенты будут полезны, если экстрагируемый комплекс не окрашен, а металл не имеет удобных радиоизотопов. Частной задачей является выяснение вопроса о том, входит ли вообще реагент в состав экстрагируемого комплекса. [c.241]

По-видимому, с помощью меченого реагента можно определить сумму одновременно экстрапгрующихся элементов, например примесей в чистых веществах. Проводится титрование реагентом и по [c.241]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология