Глюкоза количественный анализ

Задание. Выполнить количественный анализ раствора глюкозы для инъекций с использованием метода поляриметрии. [c.87]

Первый раздел Практикума должен помочь студентам освоить методические приемы и основы аналитической биохимии. Он содержит описание основных принципов и методов концентрационного анализа, принятых в биохимии (спектрофотометрического, колориметрического, манометрического), в частности, для количественного определения гликогена, глюкозы, неорганического фосфата, фосфорных эфиров углеводов, молочной и пировиноградной кислот. В раздел включены работы, посвященные анаэробному превращению углеводов. Каждая задача, выполняемая студентом, предусматривает анализ чистоты исходного препарата углевода или его фосфорного эфира, получение ферментного препарата (гомогената или экстракта ткани), постановку биохимического эксперимента, количественную оценку результатов. Количественное определение веществ проводится несколькими методами, результаты сопоставляются. Так, выполняя задание по теме Превращение фруктозо-1,6-дифосфата в молочную кислоту , студент анализирует фруктозо-1,6-дифосфат по фруктозе и по фосфату, молочную кислоту определяет спектрофотометрическим и колориметрическим методами. Подобным образом выполняются работы, связанные с превращением других фосфорных эфиров углеводов, гликогена, глюкозы. [c.5]

Качественный анализ глюкозы. С методами качественного анализа органических соединений учащийся ознакомился уже на практических занятиях в начале курса органической химии. Не останавливаясь поэтому на описании этих методов, отметим коротко, что в процессе качественного анализа в глюкозе могли быть обнаружены только два элемента углерод и водород. Никаких других элементов в составе глюкозы обнаружено не было. Остался открытым лишь вопрос о содержании в глюкозе кислорода, поскольку он решается обычно в процессе проведения количественного анализа вещества. [c.173]

Количественное определение углерода и водорода, которое нам надлежит осуществить в соответствии с результатами качественного анализа глюкозы, производится всегда одновременно, чаще всего с помощью классического метода Либиха, заключающегося в следующем. [c.173]

Наряду с контролем за скоростью одна из проблем, имеющих, практическое значение при проведении реакции,— это контроль за количеством взятых веществ. Так как химические реактивы дороги, необходимо тщательно следить за количествами используемых реагентов. Это необходимо также и потому, что некоторые реакции часто используются для проведения количественных анализов (например, холестерина крови, глюкозы мочи, способности крови связывать СО , кислотности желудочного сока). Для проведения количественных анализов совершенно необходимо знать,, каковы количественные соотношения между веществами, вступающими в реакцию, и продуктами реакции, а узнать это можно путем составления сбалансированного уравнения. [c.79]

Какие физико-химические методы анализа можно использовать для количественного определения глюкозы [c.376]

В последние годы благодаря использованию ферментов функции ионселективных электродов удалось существенно расширить и сделать их применимыми для быстрого клинического анализа на глюкозу, мочевину, аминокислоты и другие метаболиты. Такие электроды называются ферментными электродами или электрохимическими сенсорами. Создание электродов с указанными свойствами оказывается возможным благодаря тому, что ряд ферментов обладает высокой специфичностью, т. е. способностью катализировать превращения одного единственного вещества из многих сотен и даже тысяч веществ близкой химической природы. Если, например, фермент катализирует реакцию, в ходе которой изменяется pH среды, то рН-чувствительный электрод, покрытый пленкой геля или полимера, содержащей этот фермент, позволит провести количественное определение только того вещества, которое превращается под действием данного фермента. Из мочевины в присутствии фермента уреазы образуются ионы МН+. Если ионселективный электрод, чувствительный к ионам ЫН , покрыть пленкой, содержащей уреазу, то при помощи его можно количественно определять мочевину. Ферментные электроды — один из примеров возрастающего практического использования ферментов в науке и технике. [c.138]

Все инъекционные лекарства до стерилизации должны подвергаться химическому контролю на подлинность, а при наличии химика-аналитика в аптеке — и количественному анали-ау. Растворы новокаина, атропина сульфата, кальция хлорида, глюкозы и изотопический раствор натрия хлорида при любых обстоятельствах в обязательном порядке подлежат качественному (идентификация) и количественному анализу. [c.305]

Хотя при производстве листов хроматографической бумаги изготовители проявляют особую тщательность, все же для таких сложных структур, как бумага, будут встречаться различия между отдельными листами. Эти различия резче выражены в ТСХ, где большинство исследователей для приготовления пластинок пользуются ручным распределением сорбента по поверхности. Как уже сообщалось, результаты, полученные при развитии хроматограммы, в условиях, когда на бумагу наносят одинаковые количества вещества, могут немного различаться. Как бы то ни было, при количественном анализе всегда возникает следующая проблема можно ли результаты исследований со стандартными растворами достаточно надежно распространить на результаты, полученные с неизвестным и совершенно отличным количеством анализируемой пробы. Возникает еще и другой вопрос является ли постоянным для одного листа хроматографической бумаги наклон линии регрессии, связывающей количество вещества, найденного в конечной зоне, с количеством вещества, нанесенным в точку на линии старта. И если это условие выполняется, то сохраняется ли постоянным наклон линии регрессии при развитии хроматограмм на других листах бумаги в одинаковых условиях хроматографического опыта Авторы работ [3, 4, 7] уже показали, что наклон линии регрессии ие всегда постоянен, но, поскольку в этих работах источники ошибок обусловлены процессом нанесения начальных пятен, было решено изучить эту проблему заново, используя устройство, предназначенное для точного измерения начальных объемов. На каждый из 10 листов хроматографической бумаги наносили по 10 проб радиоактивной глюкозы, содержащих от 20 до 100 мкг глюкозы. Затем проводили процесс развития хроматограмм как с одним листом, так и с серией из четырех листов одновременно в одной камере при температуре 18°, поддерживаемой с помощью водяной бани. Описания линий регрессии для каждого листа приведены в табл. 4, а две наиболее отклоняющиеся [c.21]

Молекулярный вес глюкозы. Существует много разных методов для определения молекулярного веса органических вешеств. Наиболее часто молекулярный вес определяют по плотности пара данного вещества или с помощью криоскопического метода. Эти методы были усвоены учащимся в процессе прохождения курса физики и количественного анализа . Во избежание ненужных повторений мы не будем описывать здесь эти методы, а отметим лишь коротко, что молекулярный вес глюкозы, будучи определен с помощью криоскопического метода, оказался равным 180. [c.176]

Строение глюкозы. Итак, из данных качественного и количественного анализа, а также и определения молекулярного веса установлена общая молекулярная формула глюкозы — СбН]20б. Теперь надлежит установить строение глюкозы, т, е. определить порядок соединения имеющихся в ее молекуле атомов углерода, водорода, кислорода и вывести, таким образом, ее структурную формулу. [c.176]

О селективности тканевого глутаминового сенсора можно судить также по результатам количественного анализа контрольных образцов спинномозговой жидкости (СМЖ) [7]. После пропускания проб СМЖ через катионообменник для удаления фонового аммиака, который может влиять на сигнал биосенсора, концентрацию глутамина можно измерять с хорошей правильностью и воспроизводимостью во всем клинически важном диапазоне. При этих измерениях в рабочий буферный раствор следует вводить иодацетамид для подавления мешающей реакции с участием глюкозы. По-видимому, в результате гликолиза в почечных клетках из глюкозы образуется кислота, которая влияет на потенциал рН-чувствительного аммиачного датчика. Иодацетамид известен как ингибитор гликолиза и, как было найдено, эффективно подавляет чувствительность глутаминового биосенсора к глюкозе. Определение глутамина в СМЖ можно проводить в диапазоне концентраций 2,2-10 —1,29-10 М со средним относительным стандартным отклонением 5,6%. Такой сенсор может быть полезен, например, при изучении синдрома Рея, где высокий уровень глутамина рассматривается как диагностический критерий. [c.37]

Поскольку мы не знаем, в каком месте цепи располагается аномальное звено, примем в первом приближении, что оно с равной вероятностью может оказаться в любом положении. Тогда при одном аномальном звене на молекулу (неопределенность метилирования) ферментативный гидролиз будет останавливаться в среднем в середине каждой цепи. Это означает, что выход образующейся глюкозы составит 50% от общего содержания в образце. Такое расхождение с результатами, ожидаемыми для регулярного полисахарида (100%), можно обнаружить даже самыми грубыми методами анализа. Реальная же точность определения глюкозы стандартными методами составляет несколько процентов. Скажем осторожно, 5%. Это значит, что, если при ферментативном гидролизе такого полисахарида мы получаем глюкозу с количественным выходом, то с учетом 5%-й погрешности мы вправе утверждать, что, по крайней мере, 90% всех полимерных молекул в образце имеют регулярное строение и не содержат аномальных звеньев. Таким образом, применительно к нашему примеру регулярность, установленная методом метилирования, не дает даже права утверждать, что в полисахариде есть молекулы, не содержащие ни одного аномального звена, а регулярность, установленная с использованием ферментативного гидролиза, позволяет сказать, что не менее 90% всех молекул образца регулярны в строгом смысле слова. Разница количественная, но явно переходящая в качественную. [c.105]

С методами качественного и количественного анализа, так же как и с методами определения молекулярного веса и вывода эмпирической формулы химических веществ, учащиеся ознакомились уже в курсе неорганической и аналитической химии. Поэтому во избежание повторений мы не будем останавливаться на описании результатов анализов, позволивщих установить эмпирическую формулу глюкозы, а перейдем сразу же к вопросу о ее строении. [c.171]

Из водных растворов она выделяется в виде кристаллов с температурой плавления в пределах 145—148°. Сладость ксилозы составляет примерно 50% сладости сахарозы. Организмом человека она практически не усваивается. Эта особенность позволяет использовать ее в качестве сладкого вещества для больных диабетом. Организм травоядных животных усваивает ксилозу полностью. Она восстанавливает Фелингову жидкость приблизительно в такой же степени, как и глюкоза. Благодаря этому для количественного определения ксилозы в водных растворах обычно применяют методы восстановления меди, используемые при анализах глюкозных растворов. [c.364]

Какой химический метод количественного определения глюкозы может быть использован для ее анализа в данной прописи глазных капель Приведите уравнения реакций, значение грамм-эквивалента, формулу расчета содержания глюкозы в %. [c.263]

Поляриметрический анализ основан на измерении вращения (изменения) плоскости поляризации света оптически активными веществами. Это свойство обусловлено наличием в молекуле органического соединення хотя бы одного асимметрического атома углерода. Оптически активны большинство углеводов, а также антибиотики, глюкози-ды, алкалоиды, эфирные масла, некоторые другие соединения. Существуют количественные зависимости между концентрацией оптически активных веществ в растворах и направлением (или углом) вращения поляризованного света. Количественный анализ оптически активных веществ осуществляют при помощи поляриметров. [c.391]

Для количественного анализа смеси сахаров нами разработан боргидридно-ноляриметрический метод. Этот метод можно использовать, например, для анализа смесей сахарозы и глюкозы. Не имея альдегидной группы, сахароза не реагирует с боргидри-дом натрия или калия, таким образом, ее оптическое вращение в процессе обработки этим реактивом не меняется. Глюкоза же под действием боргидрида восстанавливается в сорбит, оптическое вращение которого практически равно нулю. Таким образом, оптическое вращение смеси до восстановления равно сумме вращений сахарозы и глюкозы, а оптическое вращение после восстановления создается только сахарозой. Два измерения вращения (до и после обработки боргидридом) дают необходимые данные для расчета состава смеси. Несколько по-иному строится анализ смеси глюкозы и фруктозы. Здесь оба сахара способны восстанавливаться боргидридом. Восстановление должно быть проведено в его количественном варианте оно позволяет определить сумму сахаров. Соотношение глюкозы и фруктозы в смеси определяется по величине вращения. Относительная ошибка в этих определениях 1 — 3%. [c.319]

Для количественного анализа смеси сахаров разработан боргидридпо-поляри-метрический метод, которым можно определять смеси сахарозы и глюкозы, глюкозы и фруктозы. [c.352]

Нагретую до 60°С колонку (45x1,5 см), в которую предварительно насыпали до уровня 43 см порошок целлюлозы марки ватман СР-12 (см. разд. И, Б, Хроматография на целлюлозе), применяли для разделения и количественного анализа сахаридов, построенных из 4—15 звеньев глюкозы [24]. Подвижную фазу подавали насосом из устройства для градиентного элюирования, которое состояло из конической колбы на 250 мл, запол- [c.84]

Количесгвенный элементарный анализ глюкозы. Количественное определение элементов, входящих в состав органического вещества, может быть проведено после разрушения молекулы вещества путем его окисления или сожжения. [c.173]

Ознакомимся теперь с некоторыми деталями количественного анализа на примере анализа глюкозы, выполненного с помошью макрометода. [c.174]

Проведенная ранее качественная хроматография фракций показала, что полный антиген и слабо связанная фракция бреславльской палочки и варианта № 36 имеют очень близкий состав сахаров. Это привело нас к мысли, что слабо связанная фракция, возможно, является частью полного антигена, который не полностью извлекается по методу Буавена. Количественный анализ позволил проверить это предположение. Процентный состав сахаров в полисахариде приведен в таблице. Как видно из таблицы, все полисахариды, которые входят в состав комплексов бреславльской палочки, резко отличаются друг от друга составом сахаров. Если антиген содержит 28,0% галактозы, то слабо связанная фракция — 37,1%. Наибольшее содержание глюкозы (23,3%) имеет прочно связанный полисахарид. Следует отметить, что все фракции содержат быстро движущийся при хроматографии компонент, который, по литературным данным, является дидезоксигексозой — абеквозой [10]. Быстро движущийся сахар, по данным Вестфаля [И], является той частью специфического полисахарида, которая обеспечивает серологическую специфичность вида. Нам кажется, что наличие во всех трех фракциях этого сахара указывает на присутствие в них специфического полисахарида, а уменьшение его количества в двух фракциях по сравнению с полным антигеном свидетельствует, что, кроме специфического полисахарида, в этих фракциях может содержаться и другой полисахарид. [c.289]

Гораздо труднее определить хотя бы простейшую формулу органического вещества, не диссоциирующего в растворе на ионы, например глюкозы СдН,20б для этого приходится производить не только качественный, но и количественный анализ. [c.16]

Штамм и его сотрудники [48Ь, 50] доказали химическую связь красителя с волокном, окрасив порошок частично гидролизованной целлюлозы Ремазоловым ярко-синим К и подвергнув его микробиологическому распаду под действием Се11и1отопаз ис1а. Им удалось выделить окрашенный растворимый продукт деструкции целлюлозы и доказать методом хроматографического анализа, что он является однородным веществом и что после полного гидролиза серной кислотой из него получается глюкоза. Впоследствии из гидролизата окрашенной целлюлозы были выделены гомогенные соединения, содержащие по 1 моль красителя и глюкозы. Эти соединения были подвергнуты исчерпывающему метилированию иодистым метилом и окисью серебра в диметилформамиде и затем связь с красителем гидролизовали щелочью, а метилглюкозид — кислотой. При сравнении с синтетическими метилглюкозами выяснилось, что глюкоза была замещена в положении 2 и 4. Полный количественный анализ показал, что замещение гидроксила у атома составляет 60%, а на обоих концах цепи—по 20% [534]. [c.317]

Глюкозоксидаза получается в промышленном масштабе и используется в частности для количественного анализа глюкозы в смесях сахаров. Важным свойством этого фермента является способность его активной группы — флавинового кофермента — непосредственно реагировать с молекулярным кислородом. [c.207]

Исследовано влияние строения и полярности НФ на селективность разделения. Найдено, что наиболее пригодными НФ для анализа фенолов, различающихся числом атомов С в боковой цепи, являются апие-Зон L и диметилполисилоксан, а для разделения по степени влияния пространственных затруднений на ОН-группу — эритрит или этиленмеркапто-а-глюкоза. Показана необходимость градуировки для количественного анализа при детектировании по теплопроводности. [c.137]

Количественный анализ сахаров крови ц мочи с помощью газовой хроматографии. (Анализ глюкозы, галактозы, фруктозы, пен-тозы, маннита в виде ТМС-эфиров.) [c.190]

Раствор дает отрицательную нафторезорцин-уроново-кис-лотную пробу. Согласно данным количественною анализа на содержание восстанавливающих сахаров при использовании антрона, в нем содержится 0,85 г глюкозы. [c.459]

Количественный анализ гликозидов проводили с помощью реакции с антроном после их вымывания из хроматограммы и отщепления глюкозы. [c.600]

Превращение фибриногена в фибрин происходит под действием протеолитического фермента тромбина, который в нормальных условиях до активации находится в плазме в виде своего предшественника — протромбина. Впервые протромбин и тромбин были выделены в очищенном виде Сигерсом и др. [160] в настоящее время для получения высокоочищенных препаратов протромбина и тромбина используются более совершенные методы [161—163]. Лами и Уо [1641 провели глубокое физико-химическое исследование протромбина молекулярный вес протромбина, по их данным, равен 62 700. По данным количественного анализа [165] углеводная часть протромбина содержит 6,5% гексоз, 1,7% гексозаминов, очень мало пентоз и не содержит гексу-роновых кислот. Превращение протромбина в тромбин может активироваться двумя способами [159] 1) солями в высоких концентрациях (25%-ным раствором цитрата натрия) и 2) добавками тканевых и плазменных факторов к растворам протромбина. Молекулы тромбина способны к агрегации, что приводит к большому разбросу величин его молекулярного веса, приведенных в литературе. По-видимому, минимальный молекулярный вес мономера тромбина примерно равен 8000 [159, 166]. Лоранд и др. [167] показали, что при активации протромбина 25%-ным раствором цитрата натрия от протромбина отщепляется углевод. На более ранних стадиях процесса активации протромбина 40—60% углеводов и примерно такое же количество азота становятся растворимыми в трихлоруксусной кислоте. Количества гексоз и гексозаминов, которые растворимы в трихлоруксусной кислоте при активации протромбина, также составляют 40—60%. Миллер и Сигерс ]168] исследовали углеводную часть, отщепившуюся от протромбина при активации. Тромбин осаждали из активированной смеси сульфатом аммония, а из надосадочной жидкости выделяли углеводную фракцию. При гидролизе углеводной фракции в гидролизате была найдена только глюкоза. Поскольку никаких гексозаминов обнаружить не удалось, было выдвинуто предположение, что в процессе активации протромбина гексозамин может ферментативно отщепляться от гексоз. [c.253]

Правильно подобрав пористость гранул и тщательно разработав экспериментальные условия, можно разделить очень сходные молекулы или, наоборот, молекулы, относящиеся к совершенно разным классам. Особенно трудно разделить смесь различных веществ, но в этих условиях не так важна высокая скорость потока. Поскольку на небольших колонках обычно получают количественные выходы, после разделения компонентов на не-перекрывающиеся пики их можно подвергнуть количественному анализу с помощью неспецифических методов. Таким путем можно разделить, а затем обессолить на сефадексе 0-15 ряд простых сахаров, например ра-финозу, мальтозу и глюкозу [28]. Такое разделение основано, как правило, на различиях в молекулярных массах анализируемых веществ. Однако иногда оно обусловлено и другими причинами, вызывающими задерживание определенных молекул в колонке, например адсорбцией полярного растворенного вещества из неполярного растворителя. [c.223]

При количественном анализе аллостерической регуляции с помощью АТР, ADP и АМР в неочищенных экстрактах, содержащих глюкозофосфатизомеразу, важно не допускать значительных изменений концентрации Ф-6-Ф в результате изомеризации. Для этого можно добавить 0,2 М нейтрализованный раствор глюкозо-6-фос-фата (Г-6-Ф) и 20 ед. Г-6-Ф-изомеразы на 1 мл. В течение 1 ч при комнатной температуре в растворе будут находиться 0,05 М Ф-6-Ф и 0,15 М Г-6-Ф. За международную единицу принято количество фермента, которое фосфорилирует 1 мкмоль Ф-6-Ф в 1 мин в описанных выше условиях при 25 °С [ДАз4о-ь2- 6,22-10 = (микромоли в 1 мл)-2 = микромоли на кювету]. [c.398]

Ферментативный иммунохроматографический метод. Добавляют 10—20 мкг образца (буферного раствора, сыворотки или цельной крови) к 1 мл ферментного реагента (приготовленного на 0,1 М натрий-фосфатном буфере, pH 7,0 и содержащего 0,2 моль хлорида натрия 0,2—1,0 мг конъюгата [теофиллин — пероксидаза] 100 мг глюкозооксидазы 2 г неиммунных IgG барана). В полученную смесь погружают край индикаторной полоски (4x90 мм), содержащей иммобилизованные антитела против теофиллина ( 30 мкг/см ),и дают растворителю подняться за счет капиллярных сил до противоположного края полоски (на это уходит 10 мин). Переносят полоску в проявитель (приготовленный на 0,01 М натрий-фосфатном буфере, pH 7,0, и содержащий в 1 л 0,02 моль хлорида натрия 0,5 г тритона QS-44 400 мг 4-хлорнафтола 0,05 моль глюкозы 2 г бычьего сывороточного альбумина). Через 5 мин на бумаге появляется голубая окрашенная область в форме ровной полосы или ракеты. Высота окрашенной области пропорциональна концентрации определяемого вещества. Для количественного анализа предварительно строят калибровочную кривую, отражающую зависимость высоты окрашенного фронта от концентрации теофиллина. [c.135]

Рефрактометрию применяют для количественного экспресс-аналиэа глюкозы, кислот (борной, аскорбиновой, никотиновой) солей неорганических и органических кислот (калия и натрия бромиды, хлориды, йодиды кальция хлорид и глюконат, калия ацетат, натрия тетраборат, тиосульфат, гидрокарбонат, цитрат, бензоат, салицилат) водорастворимых натриевых солей сульфаниламидов (стрептоцида, норсульфазола, этазола, сульфацила). Более точные результаты достигаются, если концентрация лекарственного вещества выше 5 %. Иногда при анализе многокомпонентных смесей рефрактометрию сочетают с титриметрическими методами. [c.251]

Гидролиз гликогена в кислой среде протекает очень легко количественным выходом глюкозы. Это используется в анализ-тканей на содержание гликогена горячей щелочью из ткане) извлекают гликоген, осаждают его спиртом, гидролизуют 1 кислой среде и определяют количество образовавшейс глюкозы. [c.416]

Строение крахмала. 1. Первоначальные исследования не учитывали того, что крахмал является неоднородным соединением. Рассмотрим некоторые результаты, полученные в этом первом периоде. Эмпирическая формула крахмала, определенная элементарным анализом, соответствует (СбНю05) , т.е. точно такая же, как и у целлюлозы. В результате кислотного гидролиза крахмал превращается в D-глюкозу с количественным выходом. [c.312]

Если не вдаваться в детали, то в количественном отношении наиболее широко в медицине применяются фермент-содержа-щие датчики нескольких разновидностей для определения содержания глюкозы. На их основе будет разработан ряд устройств, например дешевые, точные и надежные приборы для проведения анализов in vivo. Считается, что основное применение они найдут при регуляции содержания сахара в крови у больных диабетом. Недостаточно точный контроль уровня сахара при этой болезни, по-видимому, приводит к развитию отдаленных, опасных для жизни побочных последствий диабета. Использование датчиков позволит замкнуть цепь контроля в аппаратах искусственная поджелудочная железа . [c.19]