Триптофан модификация

Химотрипсин и различные его модификации наиболее активны по отношению к пептидным связям, образованным тирозином, фенилаланином и триптофаном. [c.377]

Разрушение цистеина являегся причиной уменьшения количества поперечных связей в протеинах шерсти, что проявляется в изменении ее прочности. Действие на триптофан и тирозин приводит к существенным изменениям в боковых группах. Повышение pH водных экстрактов облученной шерсти указывает на возмон -ность протекания реакции декарбоксилирования. Следует отметить, что модификация шерсти веществами, содержащими в своем составе ароматические группы, приводит к значительному возрастанию радиационной стойкости протеиновых волокон, и является очень интересным вопросом как с теоретической, так и с практической точек зрения. [c.70]

Расщепление по триптофану проходит почти количественно независимо от строения соседних аминокислот. Реакция не сопровождается расщеплением или модификацией других аминокислот. Проведению реакции не мешает присутствие небольших количеств солей, ионных детергентов или кумасси голубого. [c.111]

В гидролизатах коллагена и эластина содержатся десмозин и изодесмозин их разделяли в модифицированных условиях по одноколоночной [59, 60], а также по двухколоночной схемам анализа [61, 62]. Множество работ посвящено хроматографии серусодержащих аминокислот. Определены объемы выхода производных цистеина [63] и цистина, полученных после модификации белков и последующего гидролиза [64]. Найдены условия разделения производных лизина, полученных при модификации нативного белка, а также разработаны условия ускоренного анализа этих соединений [65, 66]. Метилгистидин и некоторые редкие аминокислоты разделяли на 15-сантиметровой колонке [67]. При снижении скорости потока в реакторе вдвое было достигнуто 10—20-кратное увеличение чувствительности при определении N-метиламинокислот, которые разделяли в специально разработанных условиях [68]. Триптофан и его производные разделяли на амберлите G-50 [69]. [c.349]

Триптофан является довольно лабильной аминокислотой, поэтому для его частичной модификации используется ряд других методов окисление озоном [83], фотоокисление [84, 85], иодирование [86], модификация 2-нитрофенилсульфенилхлоридом (НФС-С1) и 2,4-динитрофенилсульфенилхлоридом (ДНСФ-С1) [87]. [c.357]

Каждый из этих ферментов атакует вполне определенные пептидные связи. Трипсин катализирует гидролиз пептидных связей, карбонильная группа которых принадлежит одной из основных аминокислот, обычно аргинину или лизину. Пепсин и химотрипсин предпочтительно катализируют гидролиз тех пептидных связей, в образовании которых участвуют ароматические аминокислоты, в частности триптофан, тирозин и фенилаланин. Среди протеолитических ферментов наиболее высокой специфичностью обладает трипсин поэтому именно он наиболее подходит для такого рода анализа. Ясно, однако, что при помощи только одного, пусть даже абсолютно специфичного, фермента невозможно определить полную последовательность аминокислот в полипептиде. Если, например, триптическое расщепление полипептида дало пять фрагментов (пептидов), в сумме соответствующих всей цепи, и если даже для каждого из них удалось установить аминокислотную последовательность, то это еще не все требуется узнать, в каком порядке эти пептиды располагались в нативном полипептиде. Чтобы узнать это, необходимо получить другие пептиды, которые перекрывались бы с первыми. Главное преимущество ферментативного гидролиза — специфичность реакции расщепления в отношении природы расщепляемых пептидных связей накладывает в то же время строгое ограничение на применимость этого метода. В идеале желательно было бы, например, иметь возможность расщеплять иногда те пептидные связи, которые в норме трипсином не атакуются, или, наоборот, предохранять от расщепления связи заведомо чувствительные. Недавно были предложены некоторые модификации методики, которые позволяют в какой-то мере решить эту задачу. Так, например, реакция е-аминогруппы лизина с этилтрифтортиоацетатом в слабо щелочном растворе дает блокированный по аминогруппе остаток, пептидная связь которого не атакуется трипсином [c.90]

Щелочной гидролиз и определение триптофана. Триптофан при кислотном гидролизе белка распадается почти полностью и поэтому для его определения, как правило, проводится отдельный анализ с щелочным гидролизом. Ранее для определения триптофана в щелочном гидролизате широко использовались многочисленные модификации колориметрического метода, основанного на реакции триптофана с пора-диметнламинобензальдегидом [7, 17, 42, 68]. Однако этот ме тод применим лишь при определении триптофана в чистых растворах и в какой-то мере в гидролизатах чистых белков, В случае использования его для определения триптофана в гидролизатах пищевых продуктов среда окрашивается в rpflSHOBato-зеленые тона, соверщенно не сопоставимые с ярко-синим стандартом [47]. [c.191]

Лишь недавно был реализован еще один вариант расщепления с помощью модификации аминогруппы превращение в диастереомерные основания Шиффа с 2-гидроксипинаноном-З (65). Таким путем расщеплен ряд алифатических а-аминокислот, фенилаланин, триптофан, глут- аминовая кислота [41]. [c.56]

Колонка стеклянная капиллярная, 20 мХ0,28 мм неподвижная фаза хирасил-]/а1 газ-носитель водород, избыточное давление 38 кПа программирование температуры начальная температура 35 °С, быстрое увеличение до 82 °С. изотермический режим в течение 4 мин, подъем температуры до 195 °С со скоростью 4 °С1мин и геотермический режим в течение 20 мин температура инжектора и детектора 250 °С. Идентифицированы следующие соединения 1 — аланин 2 — валин 3 — треонин 4 — а-изолейцин 5 — глицин 6 — изолейцин 7 — пролин 8 — лейцин 9 — серии 10 — аспарагиновая кислота 11 —цистеин 12 — метионин 13 — фенилаланин 14 — глутаминовая кислота 15 — тирозин 16 — орнитин 17 — лизин 18 — М-этоксикарбонилгистидин (модификация по атому азота имидазольного кольца) 19 — аргинин 20 — триптофан. [c.80]

Для микроопределения триптофана в белках и бактериях предложена модификация колориметрического метода Сюлливана и Гесса [397]. Образование соединения с желто-зеленой флуоресценцией при действии на триптофан непосредственно в белках хлорной кислоты в присутствии бихромата при комнатной температуре является, повидимому, специфической реакцией [401]. Описано применение этой пробы в более ранней модификации для количественного определения триптофана в негидролизованных белках, дающее результаты с точностью до 5% [350 а]. Определение лизина по окраске, образуемой фенольным реагентом после бромирования, хотя и не специфично, однако было использовано с соответствующей поправкой на гистидин при исследовании основной фракции, выделенной на пермутите [360]. [c.162]

После проведения окисления определяют аминокислотный состав исследуемого белка, контролируя прежде всего содержание цистеиновой кислоты. Выход цистеиновой кислоты должен составлять >85%, а выход 5,5-диоксида метионина (при наличии остатка метионина) не менее 95% триптофан при окислении разрушается полностью. При наличии хлоридов может происходить модификация тирозина, поэтому перед анализом рекомендуется удалять из образца ионы хлора. Колонку с дауэксом 2 (100 меш) в ацетатной форме промывают 3 М ацетатом натрия до отсутствия в элюате ионов хлора (контроль—реакция с нитратом серебра). Затем через колонку шропускают раствор белка (0,1 г белка на 1 мл объема ионита) [c.64]

Как было убедительно показано на примере нуклсазы [132], для расщепления по триптофану необходима продолжительная инкубация в присутствии избытка реагента (20— 100-кратного). При сокращении времени и небольшом избытке реагента можно обнаружить лишь частичную модификацию триптофана. [c.108]

СНз Вг Однако тирозин превращается в 3,5-дибромо-производное, цистеин окисляется в цистеиновую кислоту, метионин — в метионин-5-оксид, идет модификация остатка гистидина. Оптимальными условиями расщепления по триптофану являются следующие 3 экв. трибромокрезола, рП 3, 20 С, 5—15 мин. В случае лизоцима селективное расщепление идет с выходом 5—60%. Принято считать, что реакция идет по механизму окислительного галогенирования, как и в случае Ы-бромосукцинимида. [c.114]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология