Цитрат-фосфатный буфер

В качестве примера высокоэффективного метода фракционирования при помощи органического растворителя можно привести метод фракционирования белков плазмы крови человека. Разделение основано на применении последовательно различных концентраций этанола, различных буферов, обеспечивающих на каждом отдельном этапе необходимую (различную) ионную силу и ионный состав. В составе буферов использовались ацетат натрия, глицин, цитрат натрия, ацетаты цинка, бария, уксусная, лимонная кислоты, компоненты фосфатного буфера. Осаждение вели при температурах —5°, —6—7°С, в различных зонах pH, примерно от 5,5 до 6,7. Точное выполнение условий pH, ионной силы и температуры имеет в этом сложном методе решающее значение. [c.146]

М цитрат-фосфатный буфер Смешайте [c.63]

Борке и Кирх [216] в 1953 г. первыми применили в ТСХ забуференный адсорбент. Приготавливали они его следующим образом. Смесь кремневой кислоты с оксидом магния (по 10 г каждого) смешивали с 4 г алебастра и 0,250 г силиката цинка и 0,250 г сульфида цинка-кадмия. Последние два реагента выполняли роль флуоресцирующей добавки. Порошки тщательно перемешивали в ступке, после чего добавляли 38 мл фосфатного буфера (pH 6,6) и растирали 2 мин до получения кремоподобной суспензии, которую наносили на стеклянные полоски. При использовании флуоресцирующих добавок буферные смеси с pH ниже 6,6 непригодны, поскольку при большей кислотности флуоресцентные свойства этих добавок исчезают. Хонегер [217] готовил пластинки с адсорбентом, забуференным цитратом. Он смешивал 25 г силикагеля О с 50 мг 0,1 М буферного раствора на основе цитрата натрия (pH 3,8). Из приведенных примеров видно, что любой требуемый буфер можно ввести в адсорбент, заменив воду в суспензии на соответствующий буферный раствор. [c.63]

Значения Д/ в системах 1 — трет-бутанол—соляная кислота—вода (700 мл 132 мл вода до 1 л) 2 — изо-пропанол—соляная кислота—вода (170 мл И мл вода до 250 мл) 3 — 1ио-масляная кислота—0,5 н. аммиак (10 6, pH 3,6) 4 — 5 %-й раствор двузаме-щенного фосфата натрия, наслоенный шо-амиловый снирт 5 — 5 %-й раствор цитрата аммония (pH 9,6), наслоенный изо-амиловый спирт 6 — этанол — 1 М ацетат аммония pH 7,5 (7,5 3) 7 — этанол — 1 М ацетат аммония pH 3,8 (7,5 3) — насыщенный раствор сульфата аммония — 0,1 М фосфатный буфер (pH 6) — шо-пропанол (79 19 2). [c.327]

Для бактериальных ростовых сред наиболее широко используются фосфатный, трис-солянокислый, цитрат-ный и ацетатный буферы. Эти четыре буферные системы охватывают практически весь интервал значений pH, в котором могут расти бактерии. В табл. 6,3 приведены смеси, используемые для приготовления буферов, а также соотношения компонентов для получения данного pH смеси. Как упоминалось выше, pH любого буфера зависит от температуры. Таблицы для приготовления других смесей, обладающих буферным действием при различных температурах, приведены во многих руководствах [2, 3, 9, 16]. [c.169]

Шиплей изучал изменение потенциала железа в зависимости от pH в буферных растворах и установил, что шри значениях pH, выше которых становится возможным образование пленки, потенциал внезапно повышался (в положительную сторону) приблизительно на 0,7 V. Этот скачок потенциала имеет место в фосфатных буферах п,ри значениях pH между 3,1 и 4,0, в боратных буферах — между 4,3 и 4,6 и в цитрат-ных буферах (которые, как известно, не благоприятствуют образованию пленок) между 10,1 и 10,9. Хлориды имеют тенденцию повышать значения pH, при которых происходит этот скачо к потенциала и делают его менее резко ограниченны , что является вполне понятным. [c.406]

Для электрофореза гемоглобинов широко используют также крахмальный и полиакриламидный гели. При разделении разных форм гемоглобина характерный для этих гелей эффект молекулярного сита не играет никакой роли, в то же время их превосходные стабилизирующие свойства имеют очень важное значение, так как благодаря этим свойствам диффузия в гелях ограниченна, что облегчает разделение компонентов, лишь слегка различающихся по электрофоретической подвижности. Для повседневных анализов гемоглобинов рекомендуется использовать систему трис-борат-ЭДТА, а для разделения минорных гемоглобинов с низкой подвижностью лучше применять неоднородную систему трис-цитрат-ЭДТА [334]. Для обнаружения аномальных метгемоглобинов все присутствующие в образце гемоглобины переводят в восстановленную форму и затем проводят электрофорез при pH 7,0—7,1 [430]. Гемоглобин Н можно отделить от гемоглобина Барта и гемоглобина I с помощью электрофореза в фосфатном буфере при pH 7,7 (это значение pH является критическим) [592]. [c.323]

Изящный вариант каскадной методики такого типа был продемонстрирован недавно на примере выделения цитрат-син-тетазы (К. Ф. 4.1.3.7) и фумаразы (К. Ф. 4.2.1.2) с использованием одной и той же аффинной колонки, содержащей пиромел--литовую кислоту (ПМК), присоединенную к сефарозе 4В через пространственную группу диаминопропанола. Экстракт ткани наносят на колонку с ПМК-сефарозой 4В в 0,01 М фосфатном буфере (pH 7,3), содержащем 0,01 М меркаптоэтанол. Цитрат-синтетаза сорбируется полностью, в то время как связывание фумаразы в присутствии фосфата подавляется (фосфат — конкурентный ингибитор этого фермента). Цитрат-синтетазу элюируют тем же буфером, содержащим 0,01 М лимонную кислоту. Полученный элюат наносят на колонку с гелем голубой сефарозы 4В, где фермент связывается количественно, и далее элюируют 0,01 М фосфатным буфером (pH 7,3), содержащим меркаптоэтанол (но не содержащим лимонной кислоты). Фракцию фумаразы, не сорбированную на ПМК-сефарозе 4В в условиях элюирования фосфатом и содержащую 100% ферментативной активности, подвергают диализу против 0,01 М трис-ацетатного буфера (pH 7,3), содержащего 0,014 М меркаптоэтанол и наносят на колонку с ПМК Сефарозой 4В в указанном буфере. При этом наблюдается количественное связывание фермента, элюирование которого проводят в присутствии ь-яблочной кислоты и далее, после удаления последней, фумаразу сорбируют на колонке с голубой сефарозой, а затем проводят элюирование, вновь добавляя яблочную кислоту в рабочий трис-ацетатный буфер. [c.190]

Рис. 25-4. Развитие окраски в отрицательном контроле в присутствии различных буферных компонентов 7 — 0,01 трис-НС1, pH 7.2 /7 — 0,1 М трис-цитрат, pH 8,0 777 — 0,1 М цит-ратно-фосфатный буфер, pH 7,0 IV — 0,1 трис-цитрат, pH 7,2 V — 0,1 М цитратно-фосфатный буфер, pH 6,0 V7 — 0,1 М. цитратно-фосфатный буфер pH 5,0 V77 — 0,1 М HEPES-бу-фер, pH 5,0.

Удобен и эффективен метод концентрирования и очистки вируса гриппа из аллантоисной жидкости при помощи сернокислого бария [574]. Сульфат бария в виде водной суспензии (12,5 г на 100 мл дистиллированной воды) прибавляют к равному объему вируссодержащей аллантоисной жидкости и встряхивают 10 минут при комнатной температуре. Смесь оставляют на ночь при 4°. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок сульфата бария ре суспендируют в Vio исходного объема 0,25 М цитрате натрия, pH 8. Осадок перемешивают в гомогенизаторе нри комнатной температуре 5 минут. После стояния в течение ночи при 4 эяюат отсасывают, а осадок промывают 0,25 М раствором цитрата натрия, pH 8. Элюаты объединяют и центрифугируют при 800 g в течение 15 минут. После цикла дифференциального центрифугирования вирус ресуспендируют в 0,01 М фосфатном буфере, pH 7,2. Выход вируса составляет 70—75% при 500-кратной очистке. [c.103]

Ингредиент Раствор Рип-гера (концент-риропанный) Раствор цитрата натра Раствор фосфата натра Раствор хлористого натра Пептонно-со-левой раствор Раствор фосфатного буфера (концентрированный) Пептонная вода [c.329]

Стандартный метод приготовления- разведений. Для приготовления десятикратных разв едений используют различные растворы — раствор Рингера, цитрата натрия, ф осфата калия, хлористого натра, фосфатного буфера, пептонную. воду, пептон.по-солевой раствор (табл. 154). , [c.330]

А/дм . При этом увеличивается доля тока, затрачиваемого на выделение водорода и реакцию перехода Аи(1) в Аи(Н1) (рис. 4.7). Учитывая окислительные процессы, ограничивают введение в цитратный электролит добавок органических соединений. Исключение составляет относительно устойчивая диамин-тетрауксусная кислота, которая повышает выравнивающую способность и электропроводимость электролита, играет роль буфера, способствует формированию полублестящих покрытий. Более распространены неорганические добавки — фосфатные или сульфатные соединения никеля, кобальта. Эти металлы в небольших количествах включаются в покрытие, улучшают его внешний вид и некоторые эксплуатационные свойства. Для предварительного золочения рекомендован электролит, содержащий (г/л) 1 —1,5 КАи(СЫ)2, 40—50 цитрата калия, 0,3—0,4 Со504-НгО pH 4,0— 4,5. Режим электролиза /к=1- -2 А/дм , / = 18—30°С. [c.109]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология