Гистохимические методы

ИЛИ биохимической реакции выпадает в осадок в виде тяжелого металла, такого, как соли свинца, урана или висмута. Большинство окрашивающих и гистохимических методов, которые используются в РЭМ, является модификацией методов, используемых в оптической и просвечивающей электронной микроскопии, и читателю рекомендуется просмотреть эти источники для выявления методик, которые можно приспособить для растровой электронной микроскопии. Метод авторадиографии может быть использован для локализации областей со специфической физиологической активностью, в то время как проявленные зерна серебра можно отобразить в режиме отраженных электронов. В работе [357] ири изучении клеточного цикла культуры тканей с успехом использовались в совокупности оптический микроскоп, метод авторадиографии и РЭМ. Обзор этих методов представлен в работе [358]. [c.244]

В настоящее время благодаря быстрому развитию гистохимии имеется возможность выявлять локализацию тканевых ферментов и их субстратов, а также других веществ в микроструктурах ткани. Можно обнаруживать не только те или иные вещества в местах прижизненного расположения, но и биохимические процессы, протекающие в тканях. Применительно к целям нашего исследования с помощью гистохимического метода можно не только установить изменения, которые происходят в коже при всасывании через нее различных веществ, но и при определенных условиях выяснить, по каким путям идет всасывание. В литературе имеются примеры, хотя и единичные, использования гистохимического метода для изучения именно этого вопроса. [c.138]

Н. В. Лазарев (1938) указывает на гистохимический метод как на один из методов, пригодных для выяснения путей всасывания веществ через кожу, а также говорит о факторах, которыми обуславливается сравнительно плохая проницаемость кожи для многих соединений. [c.138]

Несмотря на то что нуклеиновые кислоты были открыты еще в 1865 г. и долгое время привлекали внимание многих исследователей, их роль в жизни клетки оставалась совершенно неясной. На их фундаментальное значение в процессах жизни указывало, во-первых, их присутствие в составе пе только растительных п животных клеток, но и бактерий и вирусов и, во-вторых, их локализация в клетках, изученная гистохимическими методами. Однако сущность их роли оставалась загадкой до тех пор, пока не обнаружили, что вещество, ответственное за трансформацию пневмококков, является полинуклеотидом [1, 3, 10, 13, 14]. [c.299]

В наших исследованиях с этой целью использованы морфологический и гистохимический методы. С помощью первого были выявлены резкие изменения эластических волокон кожи, которые встречались как в сетках на границе кожи и эпидермиса, так и в других сплетениях, в частности, вокруг и в толще влагалищ волосяных фолликулов. Можно с известным основанием полагать, что в данном случае нарушается способность кожи и влагалищ волосяных фолликулов вновь сокращаться после растяжения, что еще больше увеличивает возможность проникновения веществ через эпидермис и волосяные фолликулы. [c.180]

Участие ферментов, кроме опытов Фрейденберга, было подтверждено и гистохимическим методом [ИЗ]. [c.107]

Рекомендуется применять гистохимические методы исследования ферментов в тканях и клетках в сочетании с биохимическими определениями активности тех же ферментов в сыворотке крови. Угнетение первых в сочетании с повышением активности вторых может свидетельствовать о начавшемся процессе разрушения клеток. Некоторые авторы рекомендуют гистохимические исследования для прямого обоснования ПДК, что представляется не всегда убедительным без дополнительных функциональных исследований. [c.140]

Блестящие результаты этот метод может дать в комбинации с гистохимическими методами. [c.141]

Перечисленные выше анализы проводились на живых срезах, которые были сделаны через каждые 10 сж по длине корня. В данном случае применение гистохимического метода позволило подробно исследовать активность дыхательных ферментов и распределение некоторых веществ в различных тканях корня в зависимости от расстояния от начала корня (основания корневища). [c.30]

Гистохимические методы б сочетании с ультрафиолетовой микрофотографией [c.122]

Содержание гликогена может исследоваться биохимическими и гистохимическими методами оба пути изучения имеют черты сходства и различия. Но, к сожалению, в большинстве публикуемых работ отсутствует наиболее важная черта — взаимодействие и взаимопомощь обеих специальностей в решении общих задач выяснения биологической роли полисахарида в нормальных или патологических условиях жизнедеятельности. Казалось бы, тезис о необходимости не только сопоставления, но взаимопроникновения результатов химико-аналитического и цитологического обнаружения гликогена является бесспорным. Но на деле разрыв и расхождение между материалами, полученными отдельными биохимиками или микроскопистами, значительны отсюда — недопонимание преимуществ или ограничений, свойственных каждому техническому пути, и — как общее следствие — простая констатация фактов, без синтетической оценки существа явления. [c.157]

Возможность выявления гликогена гистохимическими методами позволяет выяснить его локализацию в клетке и по морфологии его отложения составить себе некоторое представление как о его состоянии, так и об уровней особенностях углеводного обмена в клетках. Вместе с тем такое исследование дает характеристику состояния клетки по одному из важных и специфических показателей ее обмена веществ. [c.213]

Микро- или гистохимический метод основан на применении специальных реактивов, дающих с соответствующими веществами цветные реакции. Этот метод считается классическим методом анатомии растений. Он позволяет видеть локальное распределение химических веществ в ткани, тогда как обычные методы химического анализа дают лишь количественную характеристику веществ. [c.12]

В принципе гистохимический метод имеет преимущества перед другими для наблюдения за угнетением холинэстеразы, главным образом потому, что при этом меньше повреждаются клетки. Главным его недостатком является невозможность сколько-нибудь точно количественно оценивать результаты. На основании исчерпывающих [c.222]

Ферменты локализованы во всех компартментах клеток. Ядерные ферменты катализируют синтез информационных макромолекул, а также процессы их созревания, функционирования и распада. В митохондриях действуют ферменты энергетического обмена, в аппарате Гольджи — ферменты, катализирующие созревание белков, в лизосомах — гидролитические ферменты. Значительное число ферментов ассоциировано с внешней и внутренними мембранами. Так, ферменты, защищающие клетку от действия чужеродных химических веществ, локализованы в эндоплазматическом рети1сулуме. Распределение ферментов в клетках определяют методом дифференциального центрифугирования гомогената тканей. Локализация некоторых ферментов идентифицирована гистохимическими методами in situ. Для этого при помощи микротома получают срезы ткани и обрабатывают их раствором субстрата. Идентификация продуктов ферментативной реакции облегчена, если последние окрашены. [c.65]

Гистохимический метод позволил определить локализацию и изменения активности холинэстеразы в коже животных и человека при аппликации ФОИ. Тот факт, что холинэстераза, локализующаяся в нижних слоях эпидермиса и вокруг волосяных фолликулов, инактивируется почти одновременно и с одинаковой интенсивностью, по нашему мнению, свидетельствует о поступлении ингибитора трансфолликулярно и трансэпидермально. Эту особенность изученных веществ также необходимо учитывать при объяснении сравнительно легкого их всасывания в кожу. [c.180]

Величина этого параметра определяет возможность применения тех или других антител. Иммуноанализ и гистохимические методы требуют антител с высоким сродством (/Ссв=Ю-э—чтобы комплексы антигена с антителами были очень прочными С другой стороны, имму-ноаффинная очистка лучше осуществляется с низкоаффинными антителами Ксв=10- —10- ), поскольку в этих условиях адсорбция и освобождение антитела проходят при относительно мягких условиях без повреждения антигена и антител и колонка может использоваться повторно. Анализ взаимодействия антител с антигеном проводят по методу Скэтчарда (см. с. 343) с использованием радиоиммунного анализа. [c.324]

Присутствие гидролазы (р-глюкозидазы) в лигнифицирующихся клетках и ее отсутствие в нелигнифицирующихся камбиальных клетках было подтверждено гистохимическим методом с использованием индикановой цветной реакции [81 ]. Однако лишь недавно удалось выделить и охарактеризовать эту глюкозидазу из сеянцев ели [183, 184]. Механизм транспорта кониферина через плазматические мембраны к глюкозидазе клеточной стенки еще неизвестен, хотя некоторые опытные данные наводят на мысль об участии телец Гольджи [2281 (см. 6.2.3). [c.107]

Для различения лигнина разных растений применяли гистохимические методы (цветные реакции Мейле и Визнера— см. 10.3.1) [195, 243, 253]. [c.119]

Гистохимические методы исследования. Изучение тонких гистохимических изменений в тканях и клетках нервной системы и внутренних органов лабораторных животных помогает в уяснении патогенеза интоксикаций и дает возможность выявить ранние морфологические изменения при действии малых доз изучаемых веществ, когда обычные гистологические методы еще не выявляют патологического процесса. Наиболее общими приемами являются изучение содержания рибонуклеиновых кислот в протоплазме различных клеток и дезоксирибонуклеиновых кислот в ядре клеток. Изучение содержания и распределения в тканях и клетках сульфгид-рильных групп помогает в уяснении патогенеза интоксикации, например, тяжелыми металлами и органическими перекисями, которые блокируют сульфгидрильные группы. [c.140]

Так, например, способность холинэстераз катализировать гидролиз эфиров тиохолина, лежащая в основе гистохимических методов выявления локализации этих ферментов (см., например, [19— 21, 59]), была использована для создания количественных методов измерения активности холинэстераз. Мейер и Вильбрандт [60], применяя ацетил- и бутирилтиохолины, определяли скорость гидролиза субстратов по количеству 2,6-дихлорфенолиндофенола, восстановленного продуктом реакции — тиохблином. [c.154]

В. Н. Ш а л у м о в и ч, ДАН СССР 105, № 3, 584 (1955). Изучение структуры н е.1точной оболочки куриного яйца при помощи люминесцентной ультрафиолетовой микроскопии и некоторыми гистохимическими методами. [c.302]

Применение. В гистохимии (с добавкой или без добавйи сахарозы) в качестве гипертонической среды для защиты ферментов от разрушения [1] и диффузии ферментов в инкубационную среду [2], В микроскопии в качестве основы водорастворимых сред для заключения объектов. Такие среды отличаются хорошей совместимостью с красителями, они обеспечивают сохранность красителей, используемых во многих гистохимических методах (ЩИК) альциановый -синий, целестиновый голубой, альдегид-фуксин и др.), образование пузырьков при использовании поливинилпирролидона в качестве среды для заливки минИ мально [3]. В медицинской практике для получения кровезаменяющнх растворов, пролонгации действия некоторых лекарственных средств и для целей дезинтоксикации. В косметической промышленности для изготовления лаков, кремов, губной помады и др. [c.320]

Перед нами стояла задача определить при помощи гистохимических методов локализацию фенольных веществ в клетках плода и выявить те нарушения, которые происходят в клетках при проникновении в них гиф гриба В. inerea. [c.277]

Как уже отмечалось в гл. I, нуклеиновые кислоты были открыты при изучении химического состава клеточного ядра. Представление о том, что нуклеиновые кислоты в основном являются компонентами ядра, так или иначе признавалось до тридцатых годов. Впервые оно было серьезно поколеблено в 1938 г., когда Беренсу при помощи сложных и трудоемких методов удалось разделить растительные ткани на ядерную и цитоплазматическую фракции и показать, что последняя содержит значительное количество РНК. Оно было окончательно опровергнуто результатами, полученными при помощи только что описанных гистохимических методов. В 1938 г. Каснерсон и Шульц [77] показали, что цитоплазма некоторых быстро размножающихся клеток богата веществом, интенсивно поглощающим в ультрафиолете и дающим характерную для нуклеиновых кислот кривую поглощения. На основании того, что это вещество не окрашивается по Фёльгену, оно было идентифицировано как РНК. При помощи гистохимической рибонуклеазной пробы было подтверждено наличие РНК в цитоплазме. Окончательно вопрос был решен путем выделения РНК из цитоплазматической фракции, свободной от следов ядерного материала. [c.125]

Для изучения химического состава хромосом Браше [207] пользовался гистохимическими методами, представители школы Касперсона учитывали интенсивность поглощения хромосомами ультрафиолетовых лучей, а Мирский и Рис [208] подвергали химическому анализу изолированные хромосомы. Мирский и Рис [c.142]

Первое указание на возможность какого-то участия РНК в белковом синтезе было получено довольно давно в работах Касперсона [20] и Браше [21]. Независимо друг от друга и при помош,и различных гистохимических методов Каснерсон и Браше обнаружили, что особенно богаты рибонуклеиновой кислотой клетки, в которых синтез белка происходит особенно интенсивно. Эти наблюдения многократно подтверждались. В настоящее время мы уже хорошо представляем себе роль и т-РНК и s-PHK в белковом синтезе. [c.264]

Определение тиольных и дисульфидных групп в срезах тканей. Хорошо известная нитропруссидная реакция на —SH-группы и (после обработки дисульфида цианистым калием) на группы -—S—S— изучалась многими исследователями с целью применить ее в гистохимии. (Цианистый калий вызывает расшепление группы —S—S— с образованием KS-и N S-rpynn.) Обобщенная методика приведена Липпом в руководстве, посвященном гистохимическим методам [33]. Там же имеется подробное описание определения сульфгид-рильных групп в белковых веществах, не связанного с использованием нитропруссида натрия [34—36]. Метод основан на применении 2, 2 -диокси-6, б -динафтилдисульфида (III), который, будучи в избытке, реагирует при pH 8,5 с SH-rpyn-пами белковых веществ ткани, образуя при этом бесцветное соединение V (группа —S—S— реагента в процессе этой реакции расщепляется SH-группами белкового вещества), не растворимое в воде или в смеси спирта с эфиром в то же время реагент и вторичный продукт расщепления — тиол [c.16]

Так как употребляющиеся в гистологической технике гистохимические методы окраски срезов (реакция берлинской лазури, турнбуль-лазурная реакция для железа, новейшая реакция для меди, предложенная Маллори) весьма скудны и к тому же не вполне удовлетворительны, Лизеганг опытался другим путем получить доказательство наличия неорганических веществ в срезах. Предложенный им и разработанный Поликаром [c.76]

Гистохимическими методами изучена динамика содержания гликогена в клетках первично-эксплантированных (почечная ткань макаки-резус, клетки амниона человека, фибробласты куриного эмбриона) и перевиваемых (амнион человека, сердце макаки-циномоль-гус, НеЬа, Нер-2) однослойных культур ткани. Обнаружена зависимость интенсивности отложения гликогена от количества его в исходных тканевых клетках. В первично-эксплантированных культурах в течение первых суток культивирования отложение гликогена незначительно, оно усиливается на 3—4-е сутки культивирования. В перевиваемых клеточных линиях уже на первых этапах культивирования отмечены значительные отложения гликогена. Это связано, очевидно, с разной степенью адаптации клеток двух категорий [c.217]

Гистохимические методы, при помощи которых можно отдифференцировать рибонуклеотиды от дезоксирибонуклеотидов, основаны на обработке клеток рибонуклеазой. До обработки клеток рибонуклеазой выявляют при помощи окрашивания или ультрафиолетовой микроскопии места расположения обеих нуклеиновых кислот. После обработки рибонуклеазой те же методы обнаруживают в клетках только не доступную действию рибонуклеазы дезоксирибонуклеиновую кислоту [62]. [c.392]

Такого же рода данные в основном с помощью гистохимических методов были получены п в отношении почек древесных растени , кустарнпков, луковиц п клубив цветочных растений [2-5]. [c.184]

Существуют два основных пути определения активности ферментов in vivo в каждый данный момент I) изменение активности в гомогенатах тканей, реже в срезах или целых тканях II) использование гистохимических методов. [c.221]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология