Метод авторадиографии

ИЛИ биохимической реакции выпадает в осадок в виде тяжелого металла, такого, как соли свинца, урана или висмута. Большинство окрашивающих и гистохимических методов, которые используются в РЭМ, является модификацией методов, используемых в оптической и просвечивающей электронной микроскопии, и читателю рекомендуется просмотреть эти источники для выявления методик, которые можно приспособить для растровой электронной микроскопии. Метод авторадиографии может быть использован для локализации областей со специфической физиологической активностью, в то время как проявленные зерна серебра можно отобразить в режиме отраженных электронов. В работе [357] ири изучении клеточного цикла культуры тканей с успехом использовались в совокупности оптический микроскоп, метод авторадиографии и РЭМ. Обзор этих методов представлен в работе [358]. [c.244]

Авторадиография [2] состоит в регистрации собственного излучения изделия — в простейшем варианте путем помещения на его поверхность мелкозернистой чувствительной фотопленки, на которой фиксируется распределение ионизирующего излучения от близко расположенных активных участков. Метод авторадиографии успешно применяется для контроля полуфабрикатов и изделий, содержащих радиоактивные вещества в составе материала или какой-либо его части. [c.339]

В последние годы в исследованиях, направленных на установление путей всасывания вещества через кожу, широко используются меченые соединения и, в частности, метод авторадиографии. Однако и в настоящее время еще нет достаточно убедительных данных для окончательного решения этого вопроса. [c.21]

При любом детальном исследовании биологического материала следует сравнивать информацию, получаемую с помощью широкого набора приборов. Во многих случаях полезно начинать исследования с РЭМ, поскольку его диап азон увеличений включает в себя область увеличений от получаемых с хорошей лупой до получаемых в просвечивающем электронном микроскопе высокого разрешения. В РЭМ также мы получаем привычное нам изображение. Сравнительные исследования относительно просто выполнять, подготавливая образец либо для просвечивающего электронного микроскопа, либо для оптического микроскопа после изучения образца в РЭМ. Пример сравнительного исследования приведен на рис. 11.3, а дальнейшие подробности можно найти в статьях [316—319] и в книге [320]. В работе [321] подробно описываются методы, которые могут быть использованы для сравнения всех трех типов изображений с гистохимическими данными, а в статье [322] дается подробное описание сравнительных исследований в световом микроскопе методом авторадиографии и в РЭМ. [c.220]

При использовании изотопов с мягким р-излучением хорошие результаты дает простой в экспериментальном оформлении метод авторадиографии. Образец разрезают либо вдоль направления диффузии, либо под малым углом к торцевой плоскости образца. Срез прикладывают к фотопластинке и после экспозиции и проявления пластинку фотометрируют. Плотность почернения в какой-либо точке пропорциональна удельной активности образца в соответствующей точке образца. Следует, однако, иметь в виду, что из-за конечного пробега излучения в веществе образца авторадиограмма получается размытой и не точно соответствует концентрационной кривой. Во избежание этого время изотермической [c.557]

Более подробно процесс отложения адгезива на корде был изучен при применении метода авторадиографии . Сущность этого метода сводится к пропитке корда адгезивом, содержащим в своем составе радиоактивный изотоп углерода С. Резорцино-формальде-гидную смолу готовили, применяя формальдегид с радиоактивным изотопом углерода. При изучении поперечных микросрезов корда, пропитанного латексно-резорцино-формальдегидным составом с радиоактивным изотопом, получили такую же картину отложения адгезива на корде но при этом было обнаружено проникновение смолы в волокна полиамидного корда. [c.55]

Отвлекаясь от вопроса о структуре хромосом высших организмов, укажем, что, пользуясь методом авторадиографии, Тейлор нашел, что их хромосомы в целом редуплицируются также полуконсервативно, и предложил модель, связывающую редупликацию хромосом с редупликацией ДНК [163] (см. также [6]). [c.537]

Выше уже упоминалось о сложности измерения радиоактивности на двумерных хроматограммах. В некоторых лабораториях применяют специально сконструированные для этой цели приборы, однако оборудование такого рода промышленностью пока не выпускается. Чаще всего в этом случае применяют метод авторадиографии или искровую камеру, а далее выявленные радиоактивные пятна исследуют методом жидкостного сцинтилляционного счета. Обзор текущей литературы показал, что двумерная БХ в настоящее время используется значительно реже, чем ранее, и безусловно реже, чем ТСХ. [c.50]

Метод сканирования применяют чаще всего при работе с одномерными хроматограммами, а для регистрации распределения активности на двумерных хроматограммах обычно используют авторадиографию. Особенности применения метода авторадиографии в бумажной хроматографии затрагивались в ряде работ [3, 34]. Подробно методика авторадиографии описывается в гл. 4. [c.59]

Чувствительность метода авторадиографии при детектировании С на тонкослойных хроматограммах [22] [c.113]

Детектирование трития в полиакриламидном геле методами авторадиографии и флюорографии [48] [c.146]

Обычная авторадиография является одним из наиболее подходящих методов определения радиоактивности на полиакриламидных гелях при работе с соединениями, меченными одним изотопом (но не тритием). Этот метод удобен и для сравнения нескольких гелей, когда с образцов делают продольные срезы, накладывают их на бумажную подложку, высущивают и скрепляют с одним листом рентгеновской пленки для получения авторадиограммы. Для регистрации соединений, меченных тритием, по-видимому, чаще всего используют флюорографические методы Боннера и Лески [48], а также Лески и Миллза [50]. Однако при работе с соединениями, меченными двумя изотопами, метод авторадиографии становится довольно трудоемким. [c.152]

Голден и Роу [16] предложили простой прибор для исследования переноса радиоактивного карбида вольфрама на поверхность стали и меди при средних скоростях скольжения. Небольшой ползун из карбида вольфрама прижимался к вращающемуся плоскому металлическому диску диаметром около 150 мм. Нагрузка при испытании увеличивалась до 4 кГ, а ползун передвигался от центра диска по радиусу. След износа представлял собой спираль длиной около 6 м. Достоинство этого метода— возможность обработки поверхности разных участков металлического диска различным образом. Точно так же в разных точках спирального пути трения к ползуну можно прилагать неодинаковые нагрузки, а его движение можно ускорять пли замедлять. Влияние изменения условий испытания на интенсивность переноса радиоактивных изотопов оценивалось методом авторадиографии. Для исследований при высоких температурах под вращающимся диском устанавливали электроподогреватель мощностью 500 вт, что обеспечивало температуру в зоне трения порядка 200 °С. [c.49]

Присутствие радиоактивных изотопов позволяет производить непосредственное измерение давления пара по его радиоактивности, а использование при этом метода авторадиографии — контролировать распределение конденсата по плотности отпечатка [31]. Повышение точности ранее известных методов определения параметров пара при использовании радиоактивных изотопов основано. [c.367]

Отбор бактерий-трансформантов можно продемонстрировать, используя плазмиду pBR322 (см. рис. 5.10), содержащую два гена устойчивости к тетрациклину и ампициллину. Для отбора этих бактерий в агар добавляют антибиотик — или ампициллин, или тетрациклин в зависимости от того, какой из генов (Ыа или tet) остался интактным после введения чужеродной ДНК. На такой среде клоны образуют клетки только с плазмидами. Для отделения рекомбинантных бактерий часть материала каждого клона переносят на другую чашку Петри, содержащую антибиотик, ген устойчивости к которому был разрушен при создании рекомбинантов. На этих чашках Петри дают клоны только те бактерии, которые содержат исходную плазмиду, а рекомбинантные бактерии их не образуют. Такая тщательная селекция клонов по устойчивости к антибиотику позволяет идентифицировать рекомбинантные клоны. При поиске рекомбинантных клонов успешно применяют метод авторадиографии. [c.121]

Методом авторадиографии или непосредственным измерением активности определяется положение зон. Определением периода полураспада или максимальной энергии р-частиц удается идентифицировать разделенные изотопы. [c.211]

Ввиду того что в аналитической практике встречается необходимость отделять стронций от преобладающих количеств кальция, исследовали возможность разделения смесей этих элементов с весовым соотношением Са Sr от 10 1 до 100 1. В этих опытах вначале один из элементов смеси был радиоактивным, а затем другой. Положение зон определяли методом авторадиографии или [c.219]

Отпечатки хроматограмм были получены методом авторадиографии путем наложения рентгеновской пленки на хроматограмму. Экспозиция равнялась 8—10 дням. [c.192]

На реакционную способность графита существенное влияние оказывает наличие примесей, которые могут служить катализаторами процесса окисления. Особенно сильное влияние оказывают примеси некоторых металлов, например, железо, медь, ванадий, натрий [18, с. 134—137]. Окисление в присутствии примесей имеет локальный характер, а с уменьшением содержания примесей становится более равномерным. Удаление примесей из графита, например нагревом в вакууме при 3000 °С сужает разброс значений скоростей реакции окисления графита различных марок, плотность которых находилась в интервале 1,37-1,80 г/см . Области, в крторых проходит усиленное окисление, определены методами авторадиографии и рентгенографии как области с повышенным содержанием металлических примесей. Повышение скорости окисления может происходить при содержании чрезвычайно малых количеств примесей [18, с. 134-137]. [c.123]

В высокоэластических полимерах аморфную часть следует рассматривать как область наиболее дефектных мест кристаллической решетки полимера. При наличии сферолитной структуры следует считать, что аморфная часть полимера сосредоточе-йа по границам сферолитов и, следовательно, диффузия в таких полимерах, так же как и в металлах с мелкокристаллической структурой, должна протекать в основном по межсферолитным пространствам, что и было показано в ряде работ методом авторадиографии 2з. [c.157]

Методом авторадиографии была изучена редупликация кольцеобразной двойной спирали ДНК — единственной хромосомы Е. соИ. Включение тритиевой метки идет последовательно от нуклеотида к нуклеотиду. Хромосома редуплицируется, начиная с некоторого локуса [164] (см. также [6]). [c.537]

Для определения глубины проникновения чаще всего пользуются индикаторным методом . Суть его заключается в том, что из образца, определенное время экспонированного в испытуемой среде, делают тонкий срез в плоскости, совпадающей с направлением диффузии, и помещают этот срез в раствор подходящего индикатора. Через некоторое время в области, в которую проник электролит, индикатор изменяет цвет (проявление) и под микроскопом измеряют ширину этой области. Для некотор1.1х систем, например, поливинилхлорид — азотная кислота, за продвижением фронта диффузии удобно наблюдать в ультрафиолетовом свете, не прибегая к применению индикаторов. Для определения в непрозрачных материалах, например, резинах или наполненных пластмассах, используют специальные люминесцентные индикаторы или А1етоды, которые условно можно назвать методами отпечатка . Суть этих методов заключается в том, что срез прижимают к пластинке с индикаторным слоем, изменяющим оптическую характеристику под влиянием электролита. В случае использования меченых атомов — это метод авторадиографии. Следует подчеркнуть, что иногда обычным индикаторным методом пе удается обнаружить проникновение электролита в полимер, например соляной кислоты в полиэтилен НП. Это связано с тем, что нри проявлении электролит диффундирует из полимера быстрее, чем индикатор диффундирует в полимер. С помощью метода отпечатков диффузия хлористого водорода в полиэтилен НП легко наблюдается. [c.77]

Соотношение (VII.36) должно выполняться для хроматографических пятен с любыми значениями Rf при условии постоянства величин Dl и с р. Первая из этих величин достаточно постоянна для веществ с близкими молекулярными массами. Постоянство с р будет иметь место, если чувствительность детектирования сравниваемых веществ одинакова. Равенство (VII.36) может быть использовано для анализа радиоактивных веществ методом авторадиографии. Если природа радиоактивного излучения этих веществ одинакова, то для них Срр = onst и формула (VII.36) является точной (единственная неточность метода связана с допущением постоянства для анализируемого и эталонного веществ). [c.276]

Методом авторадиографии изучается характер распределения микропримесей в сплавах. Отмечены случаи равномерного распределения меченого элемента, концентрирования его на поверхности или рассеяния в междендритных пространствах. [c.206]

Во внутренних полостях стали (порах, трещинах, неслитинах, Скоплениях дислокаций и прочих пустотах) находится газ, содержащий молекулярный водород с ничтожной (отвечающей равновесному содержанию водорода при данных температуре и давлении Нг) примесью Н-атомов (при давлении 0,0981 МПа и температуре 298°К /Сдис=2,56-10" [51]). Методами авторадиографии присутствие молекулярного водорода установлено не только в микропустотах, но и по границам зерен [135]. [c.6]

Методом авторадиографии с использованием меченного тритием тимидина показано, что введение амбунола (бОлг/кз) вызывает блокирование переходов Gi S ж Gz- М ж не влияет на прохождение клетками фазы S. Последействие препарата проявляется в 1 детках второй генерации значительным увеличением длительности [41]. [c.321]

Методом авторадиографии [2] установлено, что энергия активаций салюдиффузии хрома в объеме зерен составляет 76 ООО кал1г-атом. Эта величина хорошо согласуется с результатами более поздних работ [34, 35]. Так, по данным автора работа [34], изучившего самодиффузию хрома в интервале 1200— 600° С, коэффициент самодиффузии может быть описан уравнением вида [c.167]

Исследования влияния фенольных ингибиторов на жизненный цикл раковых клеток также показали высокую активность этих соединений 21. На примере клеточной культуры рака шейки матки Hela было установлено, что фенольные ингибиторы подавляют митотическую активность этих клеток и увеличивают количество хромосомных аберраций. Методом авторадиографии с использованием меченного тритием тимидина было показано, что причиной этих явлений является торможение адаптивного синтеза тимидинкиназы, необходимой для синтеза белковых структур раковой клетки [c.330]

Наиболее широко метод авторадиографии применяется в тонкослойной хроматографии (см. гл. 4), а в БХ его применение, судя по всему, ограничено. Авторадиографически можно зарегистрировать большинство слабых р-излучателей, однако для таких изотопов, как Н ( тах = 18,5 кэВ ср = 5,7 кэВ), время экспозиции может составлять больше двух недель. [c.44]

Детектирование изотопа на электрофоретограммах методом авторадиографии также не эффективно, как в ТСХ и БХ. Обычно для этого лучше использовать жидкостный сцинтилляционный счет. В связи с тем что этот метод является разрушающим и отнимает много аремени, Боннер и Лески [48] применили для детектирования в полиакриламидном геле методы флюорографии, которые раньше использовались в хроматографии (гл. 4). [c.146]

Для регистрации излучений широко используют методы авторадиографии и жидкостного сцинтилляционного счета с предварительным растворением геля, а Картер и Хэковори [65] использовали для определения Н флюорографический метод [48], описанный выше. Некоторые исследователи, например Брэнд с сотр. [8], при- [c.153]

Воздействие гормонов на гены было доказано в очень интересных работах. Гормон альдостерон регулирует прохождение ионов натрия и калия через клеточные мембраны. Меченный радиоактивными атомами альдостерон проникает в клеточное ядро, что доказывается непосредственно методом авторадиографии. Спустя примерно полтора часа после того, как концентрация аль-достерона стала максимальной внутри клетки, усиливается перемещение ионов натрия через мембрану. Это происходит в результате усилившегося синтеза специфического белка. В самом деле, если клетки предварительно обработаны антибиотиком пуромицином, го гормон своего действия не производит. Между тем известно, что пуромицин блокирует действие генов, препятствуя тем самым синтезу белка. [c.310]

В совместной работе с Календо [9] мы попытались проследить нарушение синтеза быстрометящейся РНК в клетках под влиянием облучения. Работая с клеточной культурой HeLa и применяя меченный тритием уридин, инкубированный с культурой в течение короткого времени (1,5 мин., импульсная метка), можно было при помощи метода авторадиографии проследить за накоплением в ядре и цитоплазме [c.157]

Прн изучении распределения диффундирующих ионов в области границы были применены методы авторадиографии, измерения микротвердости и точечного рентгеноспектрального анализа. Для построения изокопцентрациопных- кривых анализировалась плоскость скола, перпендикулярная межзеренной границе и поверхности, содержащей диффундирующую компоненту. [c.101]

Г. Н. Воронин (1960), исследуя методом авторадиографии поджелудочную железу крысы после однократного облучения рентгеновским лучами, отметил задержку включения — метионина в экзокринкую часть железы. Используя метод меченых атомов, Р. И. Сафаров (1960) показал роль нервной системы в синтезе белков тканей желудка. [c.447]

Следует также отметить, что при температурах, превышающих температуры точки О, и растворимость на границах, и равновесная граничная концентрация ниже, чем полная растворимость. Это означает, что выше точки О должно иметь место рассасывание граничных сегрегаций углерода и происходить обеднение границ углеродом. Методом авторадиографии с изотопом углерода " С установлено, что с приближением температур изотермической обработки к точке О, граничные сегрегации С в стали 12Х18Н10Т исчезают. Положение точки О, зависит как от содержания углерода в стали, так и от энергии активации процесса адсорбции. [c.102]

Распределение мочевиносодержащих смол было изучено с помощью метода авторадиографии. Применяли мочевину, меченную С , и наблюдали ее расположение в поперечных срезах тканей [47, 48]. [c.314]

Передвижение гербицидных тиокарбаматов изучали Фанг с сотр. [7—10] и Ямагучи [11], применяя методы авторадиографии и метод прямого счета. При предвсходовой обработке почвы меченный по сере эптам поглощается многими плодовыми культурами и распространяется по всем частям растения [8, 9, 11]. Установлено, что после обработки листьев эптамом, меченным по сере, метка накапливается в верхушках стеблей и корней. При обработке корневой системы препарат распределяется в растениях более равномерно [11]. Палевая и сотр. [6] сообщили, что эптам- С легко поглощается из питательных растворов корнями растущих растений люцерны. За пять дней в растениях накапливалось примерно в два раза больше метки, чем за два дня причем накапливался во всех частях растений, хотя в более молодых частях его было несколько больше. В работе [10] говорится о поглощении тиллама растениями томатов из почвы при пред- или послевсходовой обработке. Внесенный в почву тиллам быстро поглощается корневой системой растений, и метка на стадии цветения продвигается в листья и плоды. При норме расхода 1,12 кг/га концентрация метки в листьях достигала максимума через семь дней, после чего оставалась почти постоянной в течение 70 дней. При норме расхода 4,5 и 9 кг/га концентрация метки в листьях достигала максимума [c.152]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология