Локальной фиксации метод

Рис. 4.4. Метод локальной фиксации потенциала мембраны. МЭ - микроэлектрод, ИК - ионный канал, М - мембрана клетки, СФП - схема фиксации потенциала, I - ток одиночного канала

Рис. 9.2. Синаптические свойства нервно-мышечного соединения, проявляющиеся при разных способах регистрации потенциалов. А. Внутриклеточное отведение потенциала концевой пластинки (ПКП), вызывающего потенциал действия (ПД) в мышечной клетке схема эксперимента показана слева. Б. Отведение с большим усилением, демонстрирующее суммацию миниатюрных потенциалов концевой пластинки (МПКП). В. Отведение с очень большим усилением, демонстрирующее шум, вызываемый ионофоретическим нанесением АХ (сравните с контрольной записью внизу). Г. Внеклеточное отведение методом локальной фиксации, демонстрирующее токи, связанные с Na-каналами. (А—В из работы Каца с сотрудниками, цитируемой в тексте Г—Neher, Steinba h, 1977.)

Метод локальной фиксации потенциала (гл. XXI, 6) позволяет осуществлять непосредственную запись тока через одиночные каналы (рис. XXI.24), что дает прямую информацию о его флуктуациях около среднего значения. Проводимость ко отдельных Ма-каналов варьирует от 4 до 24 пСм и слегка возрастает с температурой (<9/0 1,0-2,5). Плотность Ма-каналов в мембране достигает величин 500-2000 на один мкм . [c.147]

Благодаря достигнутым в последнее время успехам в синтезе твердых тел с геометрически и химически правильной струк-турой поверхности [1, 37—39] и разнообразию приемов химиче- ского [1, 13—15, 40, 41] и адсорбционного [1, 42—44, 44а] модифицирования поверхности адсорбентов оказывается возможным экспериментально исследовать комплексом различных методов локальные молекулярные взаимодействия адсорбирующихся молекул практически только с одним сортом атомов или функциональных групп адсорбента. Жесткая фиксация таких групп на поверхности позволяет изучить влияние на взаимодействие ориентации, разветвленности структуры и химического состава молекул. [c.17]

В промышленности используют различные материалы, отличающиеся химическим составом, степенью деформации, макроструктурой, термической обработкой, плотностью и другими физическими свойствами. Наличие в них дефектов вызывает локальное изменение свойств материала, которое может быть обнаружено с помощью различных МНК. Так, например, поверхностные и подповерхностные дефекты в ферромагнитных сталях могут быть обнаружены намагничиванием детали и фиксацией образующихся при этом полей рассеяния с помощью магнитных методов. В то же время такие же дефекты в изделиях, изготовленных из немагнитных сплавов, например жаропрочных, нельзя выявить магнитными методами. В данном случае необходим другой метод контроля, например электромагнитный. Однако и этот метод окажется непригодным, если изделие изготовлено из пластмассы. В этом случае поверхностные дефекты можно обнаружить капиллярными методами. Ультразвуковой ме- [c.38]

Для реализации перечисленных функций в принципе можно использовать несколько подходов, один из которых основан на применении интерактивного режима работы ЭВМ. Ему отдается предпочтение, так как он позволяет исследователю динамически управлять обработкой данных при решении локальных задач, не поддающихся строгой формализации. К таким задачам, например, относятся проведение чистки вольтамперограммы от случайных помех, искажающих ее форму, исключение шумового сигнала, фиксация характерных точек вольтамперограммы, вычитание сигнала фона и т. д. Но интерактивный диалог не всегда обеспечивает нужную информативность и наглядность при анализе результатов обработки экспериментальной вольтамперограммы. Устранить эти недостатки можно использованием средств и методов машинной графики. [c.149]

Значительным событием в электрофизиологии явилась разработка Нейером и Сакманом метода петч-клампа (метод локальной фиксации) [4]. Микроэлектрод помещается на анализируемую возбудимую мембрану так, чтобы был непосредственный контакт между концом электрода и мембраной. Такой подход предотвращает утечку тока из эктоплазмы по электроду и, следовательно, устраняет препятствие для измерения токов через мембрану. В месте контакта сопротивление составляет [c.123]

Формально органический капельный анализ возник раньше неорганического капельного анализа, так как первые капельные реакции использовались для открытия органических соединений. Еш,е в 1859 г. Гуго Шифф показал, что можно обнаружить мочевую кислоту, поместив каплю исследуемого раствора на фильтровальную бумагу, содержаш,ую карбонат серебра. В результате реакции получается металлическое серебро, причем мелкодисперсный металл образует серое или черное пятно, отчетливо выделяющееся на белой бумаге. Этой пробой была установлена принципиальная возможность проведения капельных реакций на фильтровальной бумаге. Опыты Шиффа показали также, что при такой технике работы достигается значительная чувствительность. Для уровня развития химического анализа того времени это явилось замечательным открытием. Оно совпало с началом классических исследований Христиана Фридриха Шёнбейна и Фридриха Гоппельсредера. Эти авторы на примере капиллярного анализа показали, какое большое значение для аналитической практики может приобрести метод нанесения на фильтровальную бумагу растворов органических и неорганических соединений, приводящий к локальной фиксации небольшого количества растворенного вещества на бумаге. [c.15]

Использование метода локальной фиксации потенциала позволило исследовать работу одиночных каналов Са -выброса после слияния пузырьков СР с бислойной липидной мембраной. Са -каналы имеют высокую проводимость для Са" (100 пСм) и низкую селективность для двухвалентных ионов по сравнению с одновалентными Рса2+/Рк+ З. Са (мкМ), АТФ (мМ) и инозитол-1,4,5-трисфосфат (IP3) (мкМ), добавленные со стороны цитоплазмы, увеличивают время открытого состояния каналов в СР скелетных мышц. В результате совместного действия Са и АТФ канал может находиться в открытом состоянии длительное время. Каналу свойственны, по крайней мере, шесть закрытых и шесть открытых состояний, активируемых лигандами (Meissner, 1994). [c.87]

Метод локальной фиксации (pat h lamp). До сих пор речь шла об исследованиях мембранно-ионных механизмов, в которых почти исключительно использовалась внутриклеточная запись. При такой записи кончик микроэлектрода находится внутри клетки. Однако значительно большую информацию можно было бы получить, поместив кончик электрода непосредственно на наружной поверхности мембраны. Для этого необходимо, чтобы кончик был гладким, ровным и плотно примыкал к мембране. В последние годы исследователям из ряда стран удалось разработать и усовершенствовать подобную методику. Для этого кончик микроэлектрода прижимается к клеточной мембране, в микроэлектроде создается небольшое отрицательное давление и кончик вместе с плотно подсосавшимся к нему участком мембраны отводится от клетки (рис. 7.9). Такой метод микрофиксации позволяет непосредственно изучать деятельность отдельных мембранных каналов и изменения этой деятельности под влиянием веществ, подводимых прямо к мембране. Использование этой новой методики, по-видимому, позволит существенно расширить наши знания о механизме работы ионных каналов, лежащем в основе генерации потенциалов действия и синаптических потенциалов. В главе 9 будет [c.163]

Действие одиночных молекул АХ было изучено с помощью медленного внесения АХ из микропипетки в область концевой пластинки — метода, известного под названием микроионофоре-за. При отведении от концевой пластинки регистрировалась ожидаемая медленная деполяризация, но, кроме того, на нулевой линии были видны маленькие флуктуации (рис. 9.2В). На основании анализа шума было выдвинуто предположение, что они связаны с открыванием и закрыванием ионных каналов одиночными молекулами АХ в процессе их взаимодействия с рецепторными молекулами постсинаптической мембраны. Отведения по методу локальной фиксации (ракЬ-с1атр) показали, что через эти каналы проходят кратковременные трансмембранные токи (см. также гл. 8). [c.207]

Одним из эффективных методов экспериментального исследования ионных каналов стал разработанный в 80-е годы метод локальной фиксации потенциала мембраны ( Pat h lamp ), (рис. 4.4). [c.99]

На рис. 4.5 приведены результаты опытов, при которых на мембрану N раз подавали деполяризующ,ий сдвиг фиксированного потенциала ф = -40 мВ и регистрировали ток одиночного канала с помощ,ью метода локальной фиксации потенциала. Результаты опытов располагали один под другим 1-й, [c.100]

В чем принципиальное отличие метода фиксации потенциала от метода локальной фиксации потенциала (pat h lamp) Одинаковые ли формы токов 1 получаются при использовании этих методов [c.110]

В сердце, действуя через мускариновые рецепторы, ацетилхолин открывает К -каналы и уменьшает тем самым частоту сердечных сокращений. Обработка клеток сердца коклюшным токсином блокирует эту физиологическую реакцию на ацетилхолин, на основании чего можно предположить, что в сопряжении процессов активации рецепторов и открывания каналов участвует G-белок. Непосредственно действие ацетилхолина можно изучать на вывернутых мембранах с помощью модифицированной техники локальной фиксации (пэтч-кламп). По этому методу микропипеткой вырывают фрагмент клеточной мембраны, так что наружной стороной он контактирует с раствором в пипетке, а цитоплазматической стороной-с омывающим раствором, который можно быстро менять (рис. 12-9). В таком фрагменте мембраны сохраняются рецепторы, К -каналы и G-белки. [c.225]

Развитие способов подготовки образцов наиб, активно происходит в области электронно-микроскопич. исследования структуры полимерных материалов и влагосодержаших объектов и связано преим. с разработкой криогенных методов (сверхбыстрое замораживание в струе хладона, прижим к металлич. блоку, охлаждаемому жвдким Не, низкотемпературное замещение воды орг. р-рителями, криоультратомия, криомикроскопия и др.). Эти методы позволяют избежать нарушений структуры и локального состава образцов, наблюдаемых при хим. фиксации и нанесении электропроводных покрытий. [c.441]

Для более эффективного фракционирования первые 2-3 фракции (с наибольшими ММ) переосаждают с целью снижения в них доли низкомолекулярных примесей. С этой же целью после четкой фиксации помутнения (т.е. после введения определенной дозы осадителя) систему целесообразно нагреть на 10- 15 °С [4]. После прогрева помутнение исчезает, а при охлаждении системы до первоначальной температуры начинается плавное выпадение осадка, т.е. соответствующей фракции полимера. При таком режиме фракционирования (с включением цикла нагревание-охлаждение) практически устраняются нежелательные эффекты, связанные с локальным выделением (со)по-лимера АА вблизи зон ввода осадителя. Поскольку для большинства реальных систем приходится иметь дело с достаточно высокомолекулярными образцами (со)полимеров АА ММ > 2-10 , то для выполнения условия (первое - переосаждение первых 2- 3 фракций) эффективного фракционирования приходится работать с достаточно разбавленными (С <0,5%) исходными водными растворами (со)полимеров АА. Достоинствами метода последовательного осаждения применительно к анализу ММР (со)полимеров АА являются простота и доступность аппаратурного оформления, возможность визуального контроля за объемом выделяемой фракции и получения достаточно больших (по массе) фракций. К недостаткам метода следует отнести большую продолжительность процесса фракционирования (до 5-10 сут.), что в принципе способствует развитию нежелательных деструктивных процессов (в частности, процессов гидролиза). Недостатком метода является и необходимость переосаждения наиболее высокомолекулярных фракций (со)полимеров АА. [c.147]

Еще один метод фиксации местоположения частиц в ПС состоит в непрерывной киносъемке слоя в рентгеновских лучах, которые в значительной степени проникают через стенки аппарата и массу частиц, но не проходят через частицы, помеченные, например, солями свинца. Съемка ведется синхронно в двух взаимно перпендикулярных направлениях, что дает возможность расшифровывать пространственное положение частиц и затем с помощью покадровой автоматизированной обработки кинопленки вычислять скорости их движения. Здесь отсутствуют возмущения в локальной структуре ПС, но требуется дорогостоящее оборудование, преобразующее рентгеновский диапазон излучения в световой. [c.524]

Рассмотренные методы фото- и киносъемки при различных способах создания информативного объема в капельной смеси, а также другие методы, связанные с локальной временной фиксацией ситуаций в двухфазном потоке, обладают тем существенным недостатком, что результаты измерений не имеют статической достоверности. Действительно, если, нагфимер, оптический спектрометр частиц за 1 с может заре- [c.64]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология