Флуоресценция в обратном направлении обратная флуоресценция

Такое утверждение представляется нам недостаточно обоснованным. В самом деле, в возбужденном состоянии на кислороде гидроксильной группы происходит значительное понижение электронной плотности. Одновременно, как показано Веллером 165], повышается электронная плотность на азоте азометиновой группы. Усиление при этом диполь-дипольного взаимодействия должно привести не к разрыву, а, наоборот, к упрочнению внутримолекулярной водород-/ ной связи. Можно предположить, что в молекуле, поглотившей квант света, в соответствии с новым распределением электронной плотности происходит перемещение протона вдоль координаты внутримолекулярной водородной связи. Но это не полное смещение протона к, азоту азометиновой группы, а лишь частичный сдвиг, способствующий образованию наиболее прочной водородной связи. Чем прочнее водородная связь в основном состоянии, тем меньше энергетические затраты на перенос протона в возбужденном состоянии, тем меньше стоксов сдвиг и выше интенсивность флуоресценции. После излучения кванта флуоресценции в молекуле вновь происходит перераспределение электронной плотности и сдвиг протона в обратном направлении. [c.71]

При дальнейшем повышении pH равновесие реакции 2 смещается влево и зеленая флуоресценция постепенно сменяется голубой, связанной с протеканием реакции 1 в обратном направлении. Количественный анализ системы приводит к величине рК возбужденного состояния, равной 10,6, что хорошо согласуется со значением, полученным из различия между двумя спектрами флюоресценции. В простой интерпретации предполагается, что реакция 2 протекает значительно быстрее реакции, обратной первой, т. е. что кислотная и основная формы возбужденного состояния находятся в равновесии. Зто довольно редкий случай, так как время жизни возбужденных состояний очень мало (порядка 10 с), и более детальный анализ системы дает информацию о скорости быстрого процесса переноса протона. Если задачей исследования является определение р/С, то эти процессы могут быть ускорены применением соответствующих буферных растворов. [c.133]

Чтобы понять суть первой из них, полезно обсудить, что происходит с атомом или молекулой после возбуждения электрона квантом подходящей для этого энергии. Если избыток энергии не удастся израсходовать, например, в столкновении с посторонней частицей (тушении), то квант — точно такой же или чуть похудевший из-за потерь энергии на колебательное возбуждение излучится снова. При этом он полетит уже не обязательно в том же направлении, что и возбудивший частицу луч, а куда попало. Такое событие — флуоресценция — совершается довольно быстро, спустя не более чем 10 с после возбуждения. И если к упокоенному атому без промедления поспеет следующий квант, он тут же снова возбудится, а спустя 10" с высветит квант обратно. Всего, таким образом, за секунду можно до 10 (сто миллионов раз ) возбудить частицу и заставить ее столько же раз засветиться . Для этого требуется лишь источник света, излучающий подходящие кванты узким и притом чрезвычайно плотным пучком, например, лазер с перестраиваемой частотой. [c.131]

Принципиальная схема рентгеновского спектрометра. Первичное излучение рентгеновской трубки вызывает флуоресценцию элементов, входящих в состав пробы. Излучение флуоресценции проходит вдоль набора продольных плоскопараллельных пластин, падает на кристалл-анализатор и, отражаясь от него, разлагается в спектр. Отражающееся в различных направлениях излучение определенных длин волн регистрируется счетчиком, совмещенным с гониометром. Такая схема прибора основана на принципе рентгеновской дифрактометрии. Этот метод отличается от рентгеновской спектроскопии только тем, что в нем задаются длиной волны регистрируемого излучения, а строение кристалл-анализатора остается неизвестным. В рентгеновской же спектроскопии имеет место обратное. [c.204]

М-р (монохроматор — проба). Излучение источника первоначально рассеивается монохроматором и падает вертикально на пробу. При измерении интенсивности отражения и флуоресценции свет падает под углом 45 при измерении интенсивности пропускания свет падает перпендикулярно плоскости пластинки. Р —М (проба — монохроматор). Схема облучения меняется на обратную, т. е. полихромное излучение (в случае необходимости можно использовать фильтры для выделения соответствующей области спектра) падает на пробу под углом 45 . Свет, отраженный в вертикальном направлении, проходит череа монохроматор и направляется в детектор. [c.213]

Флуоресценция более чувствительна к окружению, чем поглощение, поскольку процессы испускания охватывают сравнительно протяженный период времени. Можно регистрировать стационарные спектры излучения либо исследовать истинную кинетику затухания излучения. При достаточно близком расположении двух хромофоров происходит перенос энергии. Возбуждая один хромофор, можно наблюдать флуоресценцию другого. Вероятность переноса обратно пропорциональна шестой степени расстояния между хромофорами. Таким образом, измеряя эффективность переноса энергии, можно найти расстояние между двумя характерными точками макромолекулы. При пропускании через жесткие или замороженные образцы поляризованного света наблюдается преимущественное поглощение хромофорами, обладающими моментами переходов, ориентированными параллельно направлению поляризации. В отсутствие молекулярного движения флуоресценция будет иметь предельную поляризацию. Характерное время вращения молекул типичных белков и нуклеиновых кислот в растворе составляет от 10 до 100 не, в то время как время затухания флуоресценции лежит в интервале от I до 30 не. Таким образом, наблюдаемая для растворов степень поляризации определяется соотношением между временами затухания флуоресценции и молекулярного вращения. При помощи поляризационных [c.123]

Введение электронодонорных заместителей в пара-положение к тозиламиногруппе ослабляет прочность ВВС в основном состоянии. Поэтому в возбужденном состоянии энергетические затраты на перенос протона больше. Максимум флуоресценции этих соединений смещен батофлорно, а интенсивность свечения понижена. Электроноакцепторные заместители действуют в обратном направлении. От прочности ВВС зависят и времена жизни в возбужденном состоянии чем слабее ВВС в основном состоянии, тем больше время жизни. [c.139]

При исследовании флуоресценции или комбинационного рассеяния рассеяние в обратном направлении излучения лазера может ограничить чувствительность лазора. Это происходит по одно11 из двух причин. При недостаточно высоком спектральном разрешении какая-то часть отраженного лазерного [c.392]

Внутренняя конверсия. Это явление иллюстрируется рис. 6. Внутренней конверсией обычно называют безызлучательный переход между двумя состояниями одной и той же мультиплетности. Например, флуоресценция, за редкими исключениями, проходит исключительно с низшего возбужденного синглетного уровня 5ь даже если поглощающая молекула подвергалась действию света с длиной волны, соответствующей возбуждению до 5г. По-видимому, внутренняя конверсия с нижнего уровня на более высокий колебательный подуровень 51 (который мы обозначаем 5 ) проходит за время, много меньшее, чем 10 сек. Реальный переход с одного уровня электронной энергии на другой является адиабатическим и имеет равные вероятности протекания в любом направлении. Однако в конденсированных средах и в газах при давлениях выше нескольких тысячных миллиметра ртутного столба избыток энергии 5 быстро растрачивается при соударениях. Это нарушает ту, одинаковую для состояний 51 и 5г конфигурацию ядер, которая была в момент перехода. Поэтому процесс полной внутренней конверсии из 5г в 51 в значительной степени превалирует над обратным процессом. [c.76]

Как и в случае переменной флуоресценции, процесс, влияющий на выход ЗФ, — энергизация фотосинтетической мембраны и образование протонного градиента. Однако механизм влияния здесь другой. Разница между уровнями возбужденного хлорофилла Р и первичных восстановленных фотопродуктов составляет около 0,6 эВ, что соответствует энергии активации обратных процессов рекомбинации и объясняет, почему квантовый выход ЗФ очень мал и не превышает 10 -10 . Однако энергия активации может быть снижена за счет электростатического поля, направленного параллельно образующемуся дипольному моменту [P+Q ]. Так как рекомбинирующие заряды Р+ та Q расположены на противоположных сторонах мембраны, то разница электрических потенциалов Фм сторон мембраны изменяет величину энергетического барьера для послесвечения. В этом случае уравнение (XXVII. 10.8) для скорости рекомбинации, ведущей к ЗФ, имеет вид [c.357]