Флуоресцентная спектрофотометрия

Если атом, находящийся в парообразном состоянии, излучает после поглощения резонансного излучения, то возникает атомная флуоресценция. На использовании этого явления основан метод атомно-флуоресцентной спектрофотометрии. [c.381]

Рис, 16.5. Схема флуоресцентного спектрофотометра. [c.270]

Монохроматоры. Монохроматоры, применяющиеся во флуоресцентных спектрофотометрах, должны иметь высокие яркость и разрешение. [c.270]

Флуоресцентная спектрофотометрия — это измерение флуоресценции, т. е. фотолюминесценции, испускаемой веществом, подвергнутым воздействию света, ультрафиолетового или другого электромагнитного излучения. Как правило, максимум интенсивности света, испускаемого флуоресцирующим раствором, обнаруживается при длине волны, большей чем максимум возбуждающего света обычно на 20—30 нм. [c.52]

Во флуоресцентных спектрофотометрах монохроматоры имеют щель. Узкая щель обеспечивает высокое разрешение и спектральную чистоту, большая щель — высокую интенсивность. Выбор ширины щели определяется разницей в длине волны возбуждающего и испускаемого излучения, а также требуемой степенью чувствительности. [c.54]

Шкалу длин волн флуоресцентного спектрофотометра следует периодически калибровать. [c.54]

Концентрация испытуемых растворов для флуоресцентной спектрофотометрии обычно в 10—100 раз слабее концентрации растворов, применяемых в абсорбционной спектрофотометрии. Для аналитического применения необходимо, чтобы интенсивность флуоресценции была линейно связана с концентрацией вешества в области, используемой для измерений однако если раствор слишком концентрированный, то значительная часть падающего света поглощается веществом V поверхности кюветы, что приводит к снижению интенсивности потока света, достигающего центра кюветы. В результате получается, что само вещество действует как внутренний фильтр . Но поскольку флуоресцентная спектрофотометрия — высокочувствительный метод, часто можно использовать растворы в концентрации порядка 10 —10 моль/л. [c.55]

Для флуоресцентной спектрофотометрии часто важны температурные условия. Для некоторых веществ интенсивность флуоресценции может снизиться до I—2% на градус повышения температуры. В таких случаях, если необходимо получить максимальную точность, следует использовать термостатированные кюветы. Для рутинного анализа может быть [c.55]

Многие флуоресцирующие вещества светочувствительны. Будучи помещены во флуоресцентный спектрофотометр, они могут подвергаться фотохимическому разложению на более или менее флуоресцирующие продукты. Такой эффект можно обнаружить путем наблюдения показаний детектора во времени и снизить его, уменьшив интенсивность источника света с помощью фильтров или экранов. [c.56]

Люминесцирующие производные антрахинона нашли применение в качестве преобразователей энергии для активных лазерных сред в перестраиваемых лазерах на красителях. Растворы таких соединений подвергают облучению светом с длиной волны, близкой максимуму длинноволнового поглощения, а излучают свет с длиной волны, соответствующей полосе люминесценции [57]. Применение различных типов световой накачки - непрерывными или импульсными лампами, импульсными лазерами, использование красителей, обладающих полосами поглощения и люминесценции в различных областях спектра, позволили создать лазеры с разнообразным режимом работы. Лазеры на красителях дают возможность получать перестраиваемое излучение в широком диапазоне длин волн - от УФ до ИК области спектра. На их основе создано уникальное контрольно-измерительное технологическое оборудование, например, флуориметры, атомно-флуоресцентные спектрофотометры, предназначенные для научных исследований и использования в электронной промышленности, цветной металлургии, биотехнологии, экологического контроля окружающей среды. Перестраиваемые лазеры на красителях используют в медицине для диагностики и фотодинамической терапии рака [57]. У этой бурно развивающейся отрасли приборостроения большое будущее. [c.35]

Молекулярно-абсорбционная спектрофотометрии 017 — Молекулярно-флуоресцентная спектрофотометрия 10 [c.16]

Атомно-флуоресцентная спектрофотометрия 10 Ю " [c.16]

При анализе загрязнений воздуха с помощью ТСХ в больщинстве случаев получают данные о качественном составе смесей и полу-количественную оценку содержания каждого из компонентов. Поскольку анализируемые смеси обычно имеют сложный состав, очень редко удается получить отдельные зоны, соответствующие какому-либо одному чистому веществу, даже если применяют предварительную препаративную очистку или многократное разделение. Это затруднение можно преодолеть, используя специальные методы идентификации, например флуоресцентную спектрофотометрию и, в случае необходимости, абсорбционную спектрофотометрию. Для этого зоны анализируемых веществ извлекают экстракцией из сорбента с помощью подходящего растворителя. В флуоресцентной спектрофотометрии можно изменять частоту возбуждающего излучения, благодаря чему удается исключить влияние мешающих определению примесей. Эха особенность метода и его высокая чувствительность делают его очень полезным для идентификации и количественного определения органических компонентов в загрязнениях воздуха. [c.195]

Высокое содержание протохлорофилла обнаруживается лишь в редких случаях, причем не в фотосинтезирующих органах, а, например, в тонких оболочках семян многих видов тыквы, тканях перикарпия некоторых плодов. Недавно с помощью метода флуоресцентной спектрофотометрии обнаружен протохлорофилл в зеленых листьях ряда растений. [c.131]

Для измерения флуоресценции используют специально предназначенные для этой цели флуоресцентные спектрофотометры, позволяющие с помощью монохроматоров задавать длины волн для возбужда-i0щeг0 и испускаемого света. Испускаемый флуорофором свет обычно регистрируют под углом 90° к падающему свету. В отсутствие флу- [c.365]

Наряду с атомно-абсорбционной спектрофотометрией для определения 8Ь применяется также метод атомно-флуоресцентной спектрофотометрии как в пламенном [1017, 1018, 1075, 1251, 1392, 1591], так и в непламенном варианте [1322]. Метод основан на переводе анализируемого материала в атомный пар, переходе атомов определяемого элемента иэ невоэбужденного в более высокое энергетическое состояние в результате поглощения резонансного излучения внешнего источника возбуждения, последующем переходе возбужденных атомов в исходное невозбужденное состояние, сопровождающимся характерным для каждого элемента флуоресцентным излучением, интенсивность которого в определенных пределах пропорциональна концентрации атомов определяемого элемента в атомном паре. Атомную флуоресценцию измеряют перпендикулярно к пучку внешнего источника возбуждения, проходящего через атомный пар. [c.94]

В атомно-флуоресцентной спектрофотометрии ЗЬ в качестве источников возбуждения часто используют безэлектродные лампы [1017, 1075, 1591, 1608]. Описана [1075] двухэлементная безэлек-тродная разрядная лампа в виде трубки как источник линейчатого спектра для атомно-флуоресцентного определения ЗЬ и Аз. Для [c.94]

Флуоресцентный спектрофотометр отличается от флуорометра с фильтрами тем, что фильтры в нем заменены монохроматорами прнзменного или решетчатого типа. Для аналитических целей флуоресцентный спектрофотометр имеет преимущества перед фильтрующим флуорометром в отношении избирательности длины волны, возможности быстрого приспособления к условиям опыта и удобства пользования. [c.53]

Во флуорометрах и флуоресцентных спектрофотометрах используются различные источники излучения. Ртутные лампы относительно стабильны и излучают энергию в основном при дискретных длинах волн. Вольфрамовые лампы обеепе-ивают достаточно равномерное излучение по всей видимой [c.53]

Флуорометры и флуоресцентные спектрофотометры надо ежедневно стандартизовать по стабильному флуорофору для обеспечения правильной воспроизводимости ответа. Изменения обусловлены факторами, связанными с самим прибором, такими, как различия в интенсивности -лампы и чувствительности фотоумножителя. Флуорофором может служить чистый образец флуоресцирующего вещества, подвергаемого анализу, или другое легко очищаемое флуоресцирующее вещество с полосами поглощения флуоресценции такими же, что и у испытуемого вещества. Подходящим флуорофором для голубой флуоресценции является хинин в разведенной серной кислоте, для зеленой флуоресценции — флуоресцеин натрий и для красной — родамин. [c.54]

Для определения распределения белка внутри гранул носителя готовят тонкие срезы носителя с прикрепленным ферментом, принимая меры предосторожности против нарушения структуры матрицы. Для этого гранулы носителя включают в 20 /о-ную желатину. Частицы геля выдерживают 5 ч при 37 °С в растворе желатины, затем смесь переносят в подходящий для этих целей небольшой контейнер и оставляют на несколько часов в холодильнике. Желатиновые блоки замерзают, их режут микротомом на образцы толщиной 10 мкм. Полученные срезы наносят на предметные стекла и покрывают тонкими покровными стеклами для предохранения от высыхания. С помощью флуоресцентного спектрофотометра записывают спектры поглощения и излучения флуоресцеинизотиоцианата меченной флуоресцеином аминопептидазы, как свободной, так и связанной с агарозным или декстрановым носителем. [c.255]

Для количественного анализа смесей ароматических углеводородов используется ряд методов. Наиболее распространены флуоресцентная спектрофотометрия [62—66] или УФ-спектро-фотометрия [65—70] элюатов. Элюировать можно бензолом или диэтиловым эфиром. Мацушита и Арашидани [71] предпочитают разделение соединения с тонкого слоя диметилсульфоксида, так как в нем флуоресценция интенсивнее, чем в бензоле. Худ и Уайнфорднер [72] измерили интенсивность флуоресценции 16 многоядерных углеводородов при —196°С при содержании компонентов порядка 0,1 мкг. [c.48]

Для препаративной очистки часто используют колоночную хроматографию, проводя групповое разделение на классы веществ — нейтральные (ароматические углеводороды), кислые, основные, кислородсодержащие вещества и др. Соответствующие ссылки приведены в разд. 5.8 при описании примеров, в которых используются эти способы. Как уже упоминалось в разд. 5.2, в некоторых случаях при идентификации определяемых соединений отрицательное влияние мешающих анализу веществ можно устранить или уменьшить, используя флуоресцентную спектрофотометрию. Этого достигают, снижая интенсивность или исключая полностью флуоресценцию веществ, мешающих анализу. Достаточно часто бензольные экстракты можно использовать непосредственно, без предварительной очистки. [c.196]

Флуоресценция — исключительно чувствительный метод определения минимальных количеств вещества, поскольку для любого флуоресцирующего вещества интенсивность флуоресценции пропорциональна интенсивности падающего света (гл. 15). При этом главная проблема состоит в отделении флуоресценции от падающего свста. Во флуоресцентном спектрофотометре это достигается наблюдением образца под прямым углом к падающему свету. При применении флуоресцентного микроскопа задача значительно труднее и приходится использовать оптические фильтры (рис. 2-18). Фильтр, который пропускает в спектре флуоресцен- [c.53]

МХП достаточно прост, чувствителен, экспрессен и в зависимо от приборного оснащения может быть реализован как в специальных рт ых анализаторах, так и с использованием приставок к атомно-абсорбцио ш, атомно-флуоресцентным спектрофотометрам, атомно-эмиссионным ж-трометрам, а также к хроматографам и хромато-масс-спектрометра 1с-пользование таких специфических свойств атомарной ртути, как обр ванне амальгам с благородными металлами, позволило значительно noi лгь чувствительность определения ртути за счет предварительного конц жирования ее восстановленных паров на металлических сорбентах ил ол-лекторах, чаще всего золотых, золотоплатиновых или серебряных. [c.94]