Анализ органических веществ, метод флуоресценция

Принципиальная схема типового флуориметра показана на рис. 1.34. Излучение источника 1, выделенное первичным светофильтром 2, попадает на кювету с пробой 3. Возникающее излучение флуоресценции Уф через вторичный светофильтр 4 попадает на фотоэлемент или фотоумножитель 5, где оно преобразуется в электрический сигнал, пропорциональный интенсивности флуоресценции, который усиливается электронным усилителем 6 и измеряется миллиамперметром. При использовании линейного участка градуировочного графика воспроизводимость флуориметрических определений составляет приблизительно 5%. Метод применяют для чувствительного определения очень малых количеств элементов при анализе органических веществ, при определении малых количеств витаминов, гормонов, антибиотиков, канцерогенных соединений, нефтепродуктов и др. [c.97]

Флуоресцентный метод может быть использован для прямого и косвенного анализа. В первом случае для анализа используется непосредственно флуоресценция исследуемого объекта. Следует заметить, что среди неорганических веществ очень мало веществ, способных флуоресцировать самостоятельно. К числу таких веществ относятся соединения урана и редкоземельных элементов— церия, европия, самария и др. Значительно чаще встречаются флуоресцирующие органические вещества, например резорцин, хинин, морфин и многие другие. Для большинства неорганических ионов применение флуоресцентного метода связано с образованием флуоресцирующих соединений с различными органическими веществами. Некоторые из этих реактивов приведены в табл. 14. [c.154]

Качественный флуоресцентный анализ заключается в изучении спектральных характеристик флуоресценции, определяемых спектрографическом методом. На рис. 265 приведены спектральные характеристики флуоресценции некоторых сложных органических веществ. Как видим, форма кривых флуоресценции, расположение максимумов флуоресценции специфичны для флуоресцирующего вещества. [c.424]

Методы, основанные на флуоресценции веществ, большей частью разработаны в области органического анализа. В неорганическом анализе они нашли применение сравнительно недавно Флуоресцентный анализ заключается в исследовании света, испускаемого веществом, облучаемым ультрафиолетовыми лучами (обычно длиной волны между 3000 и 4000 А). Используются также и другие средства возбуждения флуоресценции, как, например, рентгеновские и катодные лучи. При использовании этого метода для количественного анализа необходимо тщательно продумать выбор источника возбуждения, светофильтров условий подготовки образца и способа измерения интенсивности флуоресценции. [c.176]

Микрозонд можно использовать для разнообразных образцов, включая органические и неорганические вещества, полимеры, биообъекты. Например, изучались неоднородности, образующиеся при затвердевании цемента, и другие твердофазные реакции проводился анализ крови на холестерин и состава функционирующих клеток, а также пятен на пластинах тонкослойной хроматографии. Метод позволяет определять следы вредных для здоровья ароматических углеводородов в пикограммовых количествах. К преимуществам микрозондового КР-анализа следует отнести резкое уменьшение рассеяния света и флуоресценции по сравнению с обычным КР-экспери-ментом. [c.778]

Причины возникновения флуоресценции были кратко описаны выше. Использование этого явления в анализе основано на способности некоторых веществ флуоресцировать под действием ультрафиолетового излучения. Число таких веществ невелико, так что метод вначале в основном применяли для анализа органических веществ и в меньшей степени для неорганических. В последние годы метод успешно применяют и для чувствительного определения многих неорганических соединений. [c.367]

В методе ослабления флуоресценции применяют фотометр, снабженный только одной ртутной лампой и фильтром. Для возбуждения флуоресценции удобна спектральная линия при 254 нм (или также излучение с длиной волны 281—313 нм). Таким образом, для измерения поглощения в УФ-области, очень важной для анализа органических веществ, пригодны только несколько длин волн выше 254 нм. Метод ослабления флуоресценции проигрывает в селективности и чувствительности при определении веществ, максимум поглощения которых находится в УФ-области. Это связано с тем, что в описываемом методе возбуждающее излучение обычно пе подстраивают к максимуму поглощения определяемого вещества. На рис, 8.9 (I, II) показано, как получить оптимальную высоту пика, изменяя длину волны излучения спектрофотометра. [c.190]

Люминесцентный, или флуоресцентный анализ, основанный на флуоресценции веществ, облученных ультрафиолетовым светом, и измерении интенсивности излучаемого ими видимого света. Флуоресцентные методы нашли широкое применение для определения следов различных примесей в неорганических и органических соединениях. [c.262]

В области анализа органических соединений фотолюминесценция имеет меньше конкурентов, особенно если речь идет об определении малых количеств. Помимо высокой чувствительности, метод имеет и то преимущество перед абсорбционной спектрометрией, что он дает не один, а два, а иногда и четыре спектра в качестве основы для идентификации (спектры испускания и возбуждения как флуоресценции, так и фосфоресценции). Известно, что для возникновения флуоресценции или фосфоресценции вещество должно поглотить свет, но не каждое поглощаю- [c.378]

Поскольку очень многие органические вещества обладают естественной флуоресценцией или могут быть превращены во флуоресцирующие вещества, косвенные методы используются редко, если не считать одной важной группы, а именно методов, используемых для анализа ферментов и исследования кинетики ферментативных реакций. Эти методы основаны на способности фермента катализировать определенную органическую реакцию, один из продуктов которой либо флуоресцирует, либо может быть переведен во флуоресцирующее вещество. Реакция проводится при соответствующих условиях, и скорость образования [c.439]

Анализ с разбавлением используют для определения больших содержаний тяжелых металлов в органических веществах. Кроме того, разбавление позволяет унифицировать состав анализируемых образцов за счет вещества-разбавителя, т. е. исключить матричные эффекты. Однако, выбирая условия разбавления, следует учитывать разные возможности РФА при определении низких концентраций легких и тяжелых элементов, которые заданы различным выходом флуоресценции. Для легких элементов выход /С-флуоресценции мал. Так, интенсивность /С-линии алюминия ограничена вероятностью /С-флуоресцен-ции, равной 8%, тогда как для молибдена большая интенсивность сигналов задана выходом флуоресценции, равным 70%. Поэтому метод РФА позволяет определять концентрации молибдена на порядок меньшие, чем концентрации алюминия. [c.245]

Люминесцентный метод может применяться - ак для химического анализа строительных материалов [9, 44, 45, 41], так и для изучения их проницаемости [48]. В основу его положено явление фотолюминесценции (или флуоресценции) растворов некоторых органических соединений. Молекулы веществ, способных флуоресцировать, при облучении фильтрованным ультрафиолетовым светом воспринимают добавочную энергию, переходя в возбужденное состояние причем обратный переход этих молекул в нормальное состояние связан с выделением избыточной энергии в виде света флуоресценции. [c.28]

Флуоресценция находит значительное приложение в аналитической практике, так как ряд органических соединений и комплексов ионов металлов значительно флуоресцируют даже присутствуя в незначительных количествах. Поэтому флуоресцентный анализ позволяет обнаруживать и определять ряд веществ при очень низкой концентрации. Рамановская спектроскопия находит применение преимущественно при изучении строения соединений и сравнительно редко используется как метод обнаружения и количественного определения вещества. [c.170]

Главы 14—17 представляют собой превосходное введение во все аспекты аналитических р азделений представлена информация о теории и практике дистилляции, природе фазовых равновесий я экстракции и применение различной хроматографической техники для разделения смесей неорганических, органических и биологических веществ. Наиболее интересные методы современного спектрохимического анализа изложены в главах 18—21 — взаимодействие ультрафиолетового и видимого излучения с атомами и молекулами, приводящее к абсорбции, эмиссии и флуоресценции применение инфракрасной спектрометрии и спектрометрии комбинационно го рассеяния для определения молекулярной структуры. [c.19]

Хроматографический анализ органических веществ развивался попутно с хроматографией неорганических веществ. В 1935— 1936 гг. появились первые сообщения об успешном применении метода Цвета в анализе синтетических красителей. Из жидкофазных вариантов хроматографии наиболее широкое применение в органической и биологической химии получила бумажная хроматография. Это тонкий микрометод, позволяющий разделять смеси нескольких десятков компонентов на полоске пористой бумаги, которая выполняет роль хроматографической колонки. Хроматограмма получается в виде пятен, окраска которых соответствует природной окраске разделяемых компонентов смеси. При анализе бесцветных веществ пятна проявляют, опрыскивая бумагу реактивом, образующим с разделяемыми компонентами окрашенные соединения. Например, при определении аминокислотного состава белков после их гидролиза бумагу опрыскивают раствором нин-гидрина, в результате чего на поверхности бумаги появляются пятна розового цвета, соответствующие индивидуальным аминокислотам (см. рис. 1.2). Если разделяемые бесцветные вещества обладают способностью к флуоресценции, бумагу облучают ультрафиолетовыми лучами (кварцевой или ртутной лампой) и тогда хроматограмма становится видимой. Этот случай можно наблюдать при разделении смеси антрахинонов, пятна которых в ультра- [c.9]

Исходя из возможности использования реакций органических соединений с ионами металлов в растворах можно на основе выполнения синтеза органического реагента разработать специфическую реакцию на то органическое соединение, которое используется для этого синтеза. Иными словами, подлежащее исследованию соединение используют для синтеза органического реагента, который затем может быть идентифицирован по его взан.моде -ствию с неорганическими ионами. Таким образом, вновь ясно видна связь между этими реакциями и поисками органических реагентов для неорганических ионов. Однако использование препаративных методов в анализе не должно ограничиваться синтезом органических реагентов и их последующим обнаружением при помощи неорганических ионов. Прием является более общим. Для аналитических целей всегда можно использовать так] е синтезы, при проведении которых получаемое новое вещество может быть идентифицировано неорганическим [или органическим реагентом, или его можно характеризовать по окраске, флуоресценции, растворимости и т. п. Более того, нужно учитывать, что обнаружение характерного побочного продукта реакции может в некоторых случаях служить прямым или косвенным доказательством наличия определенного компонента органического синтеза. В таких случаях нужно знать, какая стехиометрическая реакция лежит в основе синтеза. Выход продукта в этих случаях не столь важен. Важно, что при этом выявляются интересные обстоятель- [c.25]

Направление научных исследований анализ неорганических и органических соединений коррозия кондиционирование пластмассы краски защита от отравляющих веществ физика излучения применение физических и физико-химических методов исследования (спектрометрия, флуоресценция, колориметрия и др.). [c.342]

Методы, основанные на флуоресценции веществ, большей частью разработаны в области органического анализа. В неорганическом анализе они нашли применение сравнительно недавно . Флуоресцентный анализ заключается в исследовании света, испускаемого веществом, облучаемым [c.162]

До сих пор мало внимания уделялось разработке анализаторов неорганических загрязняющих веществ в воздухе, основанных на измерении атомной или молекулярной флуоресцентной эмиссии. Известны различные реакции между органическими и неорганическими веществами, которые могли быть исследованы с точки зрения их применения для анализа следовых количеств загрязняющих веществ в воздухе методом молекулярной флуоресценции. Однако многие из этих реакций чувствительны к процессам гашения, особенно в водном растворе [64]. [c.604]

Несомненно, что большие успехи спектрофлуориметрии в области биохимии, биологии и медицины в значительной степени обусловлены фундаментальными работами Юденфренда и сотрудников, большинство из которых описано в нр.екрасной монографии [342]. Мы кратко остановимся на этих областях применения прежде всего для того, чтобы проиллюстрировать использование метода для анализа органических веществ. Многие биологически важные соединения флуоресцируют (правда, иногда в области довольно коротких длин волн), и наилучшие методы, основанные на природной флуоресценции, заключаются обычно в регистрации испускания при больших длинах волн, где не мешают другие соединения, присутствующие в биологическом материале. Методы, основанные на естественной флуоресценции, используются, например, для анализа витамина А, рибофлавина, лекарственных препаратов (хинин и порфирины) и растительных пигментов. [c.435]

Мы попытались возможно полнее очертить сферу и методы целесообразного использования рассматриваемого приема люминесцентного анализа в целях идентификации или обнарунченпя веществ по флуоресценции, так как в недавнем прошлом отсутствие ясности в этом вопросе нередко приводило к тому, что при помощи люминесцентного анализа пытались разрешать задачи, заведомо этим методом неразрешимые. Так, например, в немецкой работе, опубликованной в 1940 г. [14], в статье, озаглавленной Люминесценция пахучих веществ , автор описывает свечение 252 ( ) просмотренных им органических соединений (спиртов, альдегидов, кето-нов, простых и сложных эфиров) и в конечном счете приходит к выводу, что флуоресценция — свойство настолько атипичное, что не годится для целей распознавания веществ. Разумеется, автор прав нельзя решить, посмотрев люминесценцию жидкости, какое вещество она собой представляет. Однако неправильно поставлена сама задача невозможность ее решения этим путем с очевидностью вытекает из самой природы явления и не требует подтверждения экспериментом. [c.64]

В люминесцентном химическом анализе известны органические красители, которые изменяют интенсивность или цвет флуоресценции при изменении pH раствора. Их применяют в титриметрических методах анализа, основанных на окислительно-восстановительных реакциях. Кроме того, некоторые флуо ресцирующие органические вещества в адсорбированном состоянии теряют способность к свечению они нашли применение в осадочном титровании в качестве адсорбционных флуоресцирующих индикаторов при определении некоторых катионов (Ag РЬ, Hg и др.) и анионов, и в первую очередь галогенидов. [c.217]

IV, V и VI. Представителем вольфрама(VI) является окись ШОз, растворяющаяся в щелочах с образованием вольфрамат-иона Нейтрализация или подкисление раствора приводит к образованию полимерных вольфрамовых кислот, выпадающих в осадок. Подобно молибдат-иону, вольфрамат-ион может также образовывать гетерополикислоты. Методы отделения (У1) от веществ, мешающих его определению, включают растворение в щелочах и соосаждение его окиси с Ре(ОН)з, А1 (ОН)з или арсе-натом свинца при нейтрализации аммиаком или гексаметилен-тетрамином. Различия в устойчивости тартратных комплексов молибдена и вольфрама позволяют отделять молибден от вольфрама осаждением МоЗз из кислых растворов. Подобно молибдену, вольфрам образует осадки с а-бензоиноксимом (экстрагирующийся хлороформом) и купферроном (экстрагирующийся изоамиловым спиртом). В разбавленных солянокислых растворах с вольфрамовой кислотой реагирует родамин В, причем окраска изменяется от желто-красной до фиолетовой. Эту реакцию можно также использовать в анализе, измеряя уменьшение интенсивности флуоресценции родамина В. Дитиол с Ш(У1) дает соединение, окрашенное в сине-зеленый цвет, которое экстрагируется органическими растворителями. При реакции образуется, вероятно, трис-комплекс. В растворах серной кислоты высокой концентрации между (У1) [а также Мо(У1) и Ti(IV)] и гидрохиноном идет реакция с образованием окрашенных веществ неизвестного строения. [c.318]

Методом рентгеновской спектроскопии можно анализировать монолитные или порошкообразные твердые пробы, жидкие вещества и иногда газы. Твердые пробы можно анализировать непосредственно. Для проведения количественного анализа их разбавляют введением подходящих веществ (наполнителей) (разд. 5.2.2.4) или добавлением внутреннего стандарта. Можно также готовить таблетки сплавлением с В2О3. В таких таблетках частицы вещества пробы достаточно малы (-<50 мкм) и равномерно распределяются по их толщине. Металлы следует протравить и тщательно отполировать (максимальная глубина трещин 100 мкм). При более глубоких трещинах — особенно если они будут перпендикулярны падающему и испускаемому излучениям — интенсивность флуоресценции уменьшается. Неоднородные твердые пробы гомогенизируют растворением. В качестве растворителей используют кислоты, воду или органические растворители, такие, как ацетон, ксилол. Матричный эффект с разбавлением уменьшается. Руководствуясь аналогичными соображениями, готовят тонкие слои толщиной приблизительно 1000—2000 А. При этом взаимное влияние элементов выражено еще мало и калибровочный график — почти прямая линия. [c.207]

При нримененпи методов люминесцентного анализа к органическим соединениям наблюдения в ближнем ультрафиолетовом свете являются наиболее эффективными, так как возбунсдение флуоресценции более коротковолновыми ими ультрафиолетовыми или катодными лучами всегда сонря5кено с риском вызвать в веществе глубокие химические изменения. [c.24]

Хотя для анализа смесей можно иногда разработать прямые спектрофлуориметрические или спектрофосфориметрические методы, их применение является далеко не универсальным. В связи с затруднениями, связанными с процессом выделения (высокий фон реагента, случайные загрязнения и потеря вещества), стоит рассмотреть любые другие методы, с помощью которых можно различить компоненты смесей родственных органических соединений. Здесь мы обсудим возможности сенсибилизованной замедленной флуоресценции. Испускание сенсибилизованной замедленной флуоресценции (см. раздел II, Г, 5) может происходить по двум механизмам, первая стадия которых предполагает перенос энергии от триплета донора к синглету акцептора [c.428]

Количественный флуориметрический анализ (флуоримет-рия ) является очень чувствительным методом химического анализа и поэтому особенно эффективен для определения весьма низких содержаний искомых веществ. В его основе чаще всего лежат флуоресцентные реакции — химические реакции определяемого вещества с органическими реактивами, приводящие к образованию флуоресцирующих продуктов под воздействием соответствующего внещнего облучения такие продукты сами становятся источниками света, но с прекращением этого облучения их свечение гаснет. Разложение и подготовку проб к определению производят обычным химическим путем, яркость флуоресценции конечных растворов служит мерой содержания в них искомого вещества. [c.3]

Определение мнкропримесей катионов в особо чистых веществах люминесцентным методом в большинстве случаев основывается на применении органических люминесцентных реагентов - Наилучшие результаты (в смысле чувствительности) были получены с такими реагентами, которые в растворенном состоянии не флуоресцируют, а их комплексное соединение с определяемым катионом обладает яркой флуоресценцией - Теоретические основы действия таких реагентов и их применение описано в обзорных статьях" " и руководствах по люминесцетно-му анализу [c.110]

В результате творческого подхода к методам молекулярного анализа раскрываются возможности к открытию новых областей его применения, например, можно рассмотреть исследование спектров люминесценции сложных органических соединений при низких температурах. Мы указывали, что спектры люминесценции жидкости или твердых тел являются недостаточно характерными, представляя собой широкие расплывчатые полосы, с плохо выраженными максимумами, что значительно затрудняет их использование для спектроаналитических целей. Однако, если вызвать люминесценцию некоторых веществ при температуре жидкого азота или водорода и подобрать растворитель для данного вещества, то спектр резко меняет свой вид спектр флуоресценции или фосфоресценции представляет собой ряд резких спектральных линий, ширина которых не превосходит [c.135]

Меллет и Вудс [166] разработали чувствительный фотофлуорометрическин метод количественного определения ТЭФ в биологических жидкостях. В отличие ют обычных методов определения этиленимина этот метод специфичен для неизмененного ТЭФ и может использоваться для определения ТЭФ и тиоТЭФ как порознь, так и в присутствии друг друга. При необходимости одновременного определения равные количества образца подвергают анализу на ТЭФ и тиоТЭФ. Методика, описанная для ТЭФ, позволяет определить оба соединения, и, таким образом, результат дает общее содержание алкилирующих веществ. Вторая методика специфична для тноТЭФ, и по разнице определяют содержание ТЭФ. Вкратце метод для определения ТЭФ сводится к экстракции 10% (по объему метанолом в хлороформе, реакции с бета-нафтолом, после чего следует серия экстракций водными и органическими растворителями с определением интенсив-яости флуоресценции конечной кислой вытяжки. При смешивании ТЭФ с мочой и плазмой этим методом определялось 88 15% первоначального количества. [c.164]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология