Выделение и очистка белков

Белки, их химические и физико-химические свойства. Методы выделения и очистки белков классические —диализ, высаживание из растворов современные — распределительное и ионообменное хроматографирование, хроматографирование па молекулярных ситах, электрофорез. Индивидуальность белков. Цветные реакции белков биуретовая, ксантопротеиновая, нингидринная, реакция Миллона. Первичная, вторичная, третичная и четвертичная структуры белков, факторы, опре- [c.248]

Молекулы белков очень сложны и обладают уникальными свойствами, поэтому нет универсальных методов выделения и очистки белков каждый белок требует индивидуального подхода и специальных методов. Подходящей процедурой будет та, которая позволяет получить максимальное количество белка в наиболее чистом виде и с сохранением природных свойств (как принято говорить - в нативном состоянии). При выделении ферментов очень важно сохранить их активность. [c.24]

В основу работы по выделению и очистке белков положены такие свойства белков, как растворимость, наличие заряда, молекулярная масса. На различиях в растворимости белков основаны методы высаливания, а именно осаждение белков сульфатом аммония или хлоридом натрия. Такое осаждение представляет собой обратимую денатурацию, так как белки при добавлении воды вновь растворяются и не теряют нативных свойств. [c.24]

Основное требование при выделении и очистке белков - избегание необратимой денатурации, поэтому вся работа должна проводится при +4 °С. [c.24]

МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ БЕЛКОВ [c.23]

Сейчас разработаны хорошие методы выделения и очистки белков [1]. Удается получить белки и в кристаллической форме. Вместе с тем многие важные белки до сих пор в чистом виде не выделены (например, ацетилхолинэстераза). Методы идентификации характерных групп и связей в белках описаны в биохимической литературе (см., в частности, [2]). [c.68]

Область применения. Выделение и очистка белков. [c.228]

Выделение и очистка белков [c.54]

Для выделения и очистки белков используются специфические методы химии белка диализ (отделение неорганических солей и низкомолекулярных органических соединений от белков благодаря тому, что белки не проходят через полупроницаемые мембраны из коллодия, целлофана и т. д.), электрофорез, хроматографирование на ионнообменных смолах и молекулярных ситах, лиофильная вакуумная сушка (испарение замерзшей воды в высоком вакууме) и т. д. [c.500]

Следует отметить, что используемое обозначение искусственная пища отражает то, что в данном случае речь идет в основном о применении природного пищевого сырья, например белков сои, малоценных пород рыб, листьев, жмыхов, водорослей, одноклеточных и т. д., а основные процессы производства сводятся к выделению и очистке белков, их последующему формованию и структурированию в пищевые изделия. [c.310]

Из сказанного ясно, что выделение и очистка белков представляют собой весьма сложную задачу. Большинство из них чувствительны к нагреванию, действию кислот, щелочей, органических растворителей, ионов многих солей и других факторов. Обычные методы, применяемые при выделении органических веществ, почти непригодны в химии белка. [c.22]

ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА БЕЛКА (ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЕ, КРИСТАЛЛИЗАЦИЯ, ДИАЛИЗ И ЛИОФИЛИЗАЦИЯ) [c.53]

Выделение и очистка белка [c.55]

В последние годы в методах выделения и очистки белков произошли большие изменения. Эти изменения связаны главным образом с тем, что были разработаны новые, очень эффективные и универсальные методы разделения белков, из которых одним из наиболее важных следует считать ионообменную хроматографию. [c.55]

Ввиду большой термолабильности большинства ферментов необходимо с первых же стадий работы по выделению и очистке белка — фермента все операции проводить при охлаждении. [c.134]

Белки и живая материя 2. Определение понятия белок . Отличительные особенности со става, строения и свойств белков Глава I. Выделение и очистка белков. [c.3]

ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА БЕЛКОВ [c.11]

Выделение и очистка белков одна из самых сложных проблем белковой химии. Как правило, в биологических объектах присутствуют смеси и соединения большого числа белков, причем многие из них очень близки друг к другу по физико-химическим свойствам. Нередко наблюдается практическое совпадение отдельных физико-химических характеристик разделяемых белков. Это заставляет прибегать к сочетанию нескольких способов очистки, которые позволяют использовать наиболее широкий круг возможных различий. Положение осложняется также неустойчивостью белков, опасностью денатурации в процессе очистки, что значительно ограничивает применение многих эффективных приемов. Все это, а также большое разнообразие белков приводит к невозможности рекомендовать какую-то единую схему выделения и очистки. Даже для одного и того же белка предлагают подчас несколько схем, примерно одинаковых по эффективности. [c.11]

Важной особенностью большинства частных методов выделения и очистки белков является обилие эмпирически установленных деталей процесса. Неукоснительное выполнение рекомендуемых прописей вплоть до, казалось бы, мелочей (значение которых бывает иногда не вполне ясным даже автору метода) — обязательное условие успеха. [c.11]

I. Общие рекомендации, соблюдение которых полезно при выделении и очистке белков [c.11]

Упражнение Методы выделения и очистки белков (по [c.53]

Дайте общую характеристику и напишите схему выделения и очистки белков. [c.54]

Глава 7. Выделение и очистка белка (Центрифугирование, кристаллизация, диализ и лиофилизация). ...............................465 [c.426]

Глава 7 ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА БЕЛКА [c.465]

Гл. 7. Выделение и очистка белка [c.469]

В процессе выделения и очистки белков контролируют степень чистоты полученных препаратов, причем этот контроль приобретает особенно большое значение па последних стадиях очистки. Если белок имеет характерную биологическую активность, то критерием его чистоты может служить тот факт, что при дальнейшей очистке число единиц активности [c.21]

На примерах хорошо изученных ферментов рассмотрены современные представления об активном центре, механизме действия, специфичности, активации и ингибировании ферментов. Вопросы, связанные с кинетикой ферментативных реакций, изложены весьма кратко (более подробно с этими вопросами можно познакомиться в книгах М. Диксон, Э. Уэбб Ферменты и Ферменты под ред. А. Е. Браунштейна). Поскольку основные методы выделения и очистки белков описаны в разделе Белки , в данном разделе затронуты только вопросы, связанные со специфическими свойствами белков-ферментов. [c.188]

Ферменты являются очень лабильными, легко инактивируемыми соединениями. Этим и объясняется специфичность методов выделения и очистки белков-ферментов. [c.198]

Методы выделения и очистки белков [c.6]

Выделение и очистка белков и вирусов является обычно очень сложной операцией, влекущей за собой много источников ошибок. [c.546]

Предназначена для биохимиков, иммунологов, химиков и других специалистов, занимающихся выделением и очисткой белков. [c.4]

Выделение и очистка белков во многом представляют собой самостоятельную область биохимии, и достигнутые здесь успехи в значительной мере предопределили тот огромный прогресс в наших знаниях о химии живого, который наблюдается в последние десятилетия. Овладеть этой наукой не так просто. Для этого мало знать теоретические основы используемых методов — необходимо также научиться искусно обращаться с белками, и здесь советы бывалых людей крайне ценны. [c.5]

Разделение на основе различной растворимости относится к наиболее старым методам выделения и очистки белков. При изозлектрическом осаждении разделение достигается благодаря минимальной растворимости глобулярного белка в изоэлект-рической точке (ИЭТ). Следует обратить внимание, что ИЭТ белков помимо прочего зависит от ионной силы раствора. ИЭТ некоторых белков приведены в табл. 3-6. [c.346]

Чрезвычайно эффективным средством фракционирования белков из смеси оказалась колоночная хроматография с гидроксилапатитом, различными ионообменными смолами и производными целллюлозы в качестве носителей. При выделении и очистке белков используют четыре основных типа хроматографии адсорбционную, распределительную, ионообменную и аффинную (хроматография по сродству)-в соответствии с разными физическими и химическими механизмами, лежащими в основе каждого из них. Хроматография широко применяется не только для выделения белков, но и для разделения множества других органических и неорганических веществ, входящих в состав живых организмов. [c.27]

На заключительном этапе выделения и очистки белков исследователя всегда интересует вопрос о гомогенности полученного белка. Нельзя оценивать гомогенность индивидуального белка только по одному какому-либо физико-химическому показателю. Для этого пользуются разными критериями. Из огромного числа хроматографических, электрофоретических, химических, радио- и иммунохимических, биологических и гравитационных методов наиболее достоверные результаты при определении гомогенности белка дают ультрацентрифугирование в градиенте плотности сахарозы или хлорида цезия, диск-электрофорез в полиакриламидном геле, изоэлектрическое фоьсусирование, иммунохимические методы и определение растворимости белка. Действительно, если при гель-электрофорезе белок движется в ввде одной узкой полосы и в этой зоне сосредоточена его биологическая активность (ферментативная, гормональная, токсическая [c.32]

Для выделения и очистки белков используются специфические мето-1Ы химии белка диализ (отделение неорганических солей и низкомоле-сулярных органических соединений от белков благодаря тому, что 5елки не проходят через полупроницаемые мембраны из коллодия. [c.381]

Белки, их химические и физико-химические свойства. Методы выделения и очистки белков классические — диализ, высаживание из растворов современные — распределительное и ионообменное хроматографирование, хроматографирование на молекулярных ситах, электрофорез. Индивидуальность белков.. Цветные реакции белков биуретовая, ксантопротеиновая, сульфгидрильная, Милона, нингидринная. Первичная, вторичная и третичная структуры белков, факторы, определяющие эту структуризацию. Проблема установления первичной структуры белка. Вторичная структура а-спираль и Р-структура, третичная структура. Классификация белков простые и сложные. Простые белки альбумины, глобулины, проламины, прот амины, гистоны и склеропротеины. Сложные белки (протеиды) нуклеопротеиды, глюкопротеиды, липопротеиды, фосфопротеиды, хромопротеиды, металлопротеиды. Заменимые инезаменимые аминокислоты. Проблема синтеза искусственной пищи. [c.189]

Выделение и очистка белков. Изучение белковых веществ связано с большими затруднениями, так как белки находятся в природе в смесях и разделить их не всегда удается. Применить испытанный в органической химии метод дробной перегонки, хотя бы и в высоком вакууме, совершенно невозможно, так как при нагревании белки сначала претерпевают существенные изменения, а затем разлагаются на Н2О, СО2, NHg, H2S, H N, ароматические углеводороды и другие вещества. Использовать дробную кристаллизацию также не удается, так как методика кристаллизации пока еще несовершенна. К тому же белковые кристаллы обычно упорно удерживают посторонние примеси. Воспользоваться свойством белковых тел как коллоидов — не проникать через животные перепонки и коллодион-ные пленки—тоже не приходится, так как белки упорно удерживают последние следы минеральных солей. Поэтому при выделении белков обычно прибегают ко всем доступным способам одновременно, добиваясь чистоты да[1-ного препарата. [c.310]

Книга известного австралийского биохимика, написанная на основе собственного 20-летнего опыта работы в области препаративной биохимии. Изложены принципы и методы основных способов выделения и очистки белков, определения нх концентрации и ферментативной активности. [c.4]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология