Инфицирование клеток-мишеней

Инфицирование клетки-мишени. [c.488]

Инкубируйте в течение 2—3 дней до формирования слитного монослоя, затем рассейте инфицированные клетки-мишени на новые чашки в свежей среде. [c.296]

Некоторые патогенные микроорганизмы действуют опосредованно, вызывая развитие аутоиммунной реакции на инфицированные клетки организма-хозяина. Для таких заболеваний можно создать систему специфического уничтожения клеток-мишеней, сконструировав ген, кодирующий химерный белок, одна часть которого будет связываться с инфицированной клеткой, а другая - уничтожать ее. Эта система не является истинной вакциной, хотя она и действует только на инфицированные клетки, устраняя саму причину развития аутоиммунной реакции. [c.228]

Вирусная ДНК встраивается в случайные сайты генома клетки-хозяина. Инфицированная клетка содержит от одной до десяти копий провируса. В каждом сайте внедрения образуются короткие прямые повторы ДНК мишени. Их длина у разных вирусов может быть равна 4, 5 или 6 парам оснований. Наличие прямых повторов свидетельствует о том, что механизм интеграции включает образование ступенчатых разрезов в ДНК хозяина, аналогичных тем, которые образуются при бактериальной транспозиции. Сайт интеграции специфичен в отношении вируса, и интегрированная ДНК отличается от неинтегрированной двумя парами оснований в каждом конце. Таким образом, интегрированная вирусная ДНК утрачивает две пары оснований в левом конце 5 -концевой последовательности из и две пары оснований в правом конце З -концевой последовательности U5. [c.491]

Вирусы не имеют собственного биосинтетического аппарата и для своего воспроизведения используют клетки хозяина. Являясь внутриклеточными патогенами, они защищены от прямого действия нейтрализующих антител, и только выход во внешнюю среду в результате разрушения клетки хозяина делает их доступными для специфических иммуноглобулинов. Основным фактором, препятствующим активному размножению вирусов и инфицированию пораженного организма, являются зрелые цитотоксические Т-лимфоциты ( DS Т-клетки). Очевидным свойством этих клеток является специфичность их действия на клетку-мишень — уничтожение только тех клеток тканей, которые поражены вирусными частицами. В этой выборочности действия заключен вполне кон-ретный биологический смысл. Не нарушая ткань в целом, цитотоксические Т-лимфоциты освобождают организм от вирусной инфекции, уничтожая только пораженные вирусом клетки. [c.228]

I В отличие от В-клеточного рецептора ТкР обычно обладает низким сродством к антигену и распознает его только в комплексе с молекулами МНС класса I или II. Во взаимодействиях Т-клеток с клетками-мишенями ключевая роль принадлежит также вспомогательным молекулам клеточной поверхности, выполняющим ряд функций. Какие процессы, кроме распознавания антигена, происходят в том случае, когда Т-клетка вступает в контакт с инфицированной вирусом клеткой-мишенью [c.127]

ШИ рис. 9.17). Цитотоксические Т-лимфоциты (Тц) зараженного животного способны поражать инфицированные вирусом клетки-мишени того же самого, но не иного Н-2-гаплотипа. [c.159]

Цитотоксичность Цитотоксические клетки могут поражать инфицированные вирусами клетки-мишени собственного организма, весьма важные для его жизнедеятельности, например клетки центральной нервной системы. Если это происходит при иммунном ответе на вирусную инфекцию, которая сама по себе не вызывает гибели или функциональных нарушений зараженных клеток, повреждение тканей относят к иммунопатологии. [c.188]

Новорожденных мышей инфицировали вирусом в дозах 0,3 или 1000 бляшкообразующих единиц (БОЕ) и изучали действие цитотоксических Т-лимфоцитов (Тц) на инфицированные вирусом клетки-мишени. Одновременно определяли продукцию ИФу (Тх1-цитокин) и ИЛ-4 (Тх2-цитокин) в ответ на заражение вирусом. У мышей, инфицированных низкой дозой вируса, возникали Тх1-ответ и защита от инфекции. Результаты представлены в относительных единицах. [c.238]

Облученным мышам-реципиентам двух типов (А и Б) вводили для восстановления кроветворения лимфоциты доноров А X Б (клетки костного мозга или селезенки). Таким способом получали мышей-химер, у которых лимфоциты имели тип донора (А х Б), а все другие ткани - тип реципиента. После этого животных иммунизировали вирусом осповакцины, получали от них Т-клетки селезенки и определяли их цитотоксическую активность по отношению к В-клеткам типа А или Б, инфицированным вирусом. Клетки мышей, получивших после облучения клетки костного мозга, могли лизировать только клетки-мишени, относящиеся к тому же типу, что и реципиент (1 и 2). В отличие от этого зрелые лимфоциты животных, получивших клетки селезенки (А х Б), были способны лизировать клетки-мишени обоих типов - А и Б, независимо от типа реципиента (3 и 4). Полученные данные можно объяснить следующим образом. Незрелые стволовые клетки костного мозга после введения облученным мышам проходили обучение в тимусе реципиента и после этого могли распознавать антиген лишь в ассоциации с молекулами МНС гаплотипа реципиента. Однако зрелые клетки селезенки донора уже были обученными . В большинстве случаев для успешного обучения клеток донора в тимусе реципиента необходимо, чтобы донор и реципиент имели по крайней мере один общий МНС-гаплотип с идентичными генами класса II. [c.249]

При заражении вирусом кори в организме образуются цитотоксические Т-клетки С04 , которые распознают и лизируют инфицированные вирусом клетки-мишени, экспрессирующие молекулы МНС класса II. Это указывает, что процессинг и презентация антигенов вируса кори происходят обычным способом - путем фагоцитоза и расщепления (см. гл. 9). Однако существует, предположительно, и другой, еще неизвестный механизм, посредством которого белки или пептиды вируса кори перемещаются из цитозоля в везикулы класса II. [c.310]

Рестриктированное по гаплотипу поражение инфицированных вирусом клеток-мишеней цитотоксическими Т-лимфоцитами (Тц). Мышей гаплотипа 14-2 прими-ровали вирусом, после чего из селезенки выделяли Тц и определяли их способность поражать инфицированные тем же вирусом клетки-мишени гаплотипов Н-2Ь и Н-2 . Тц поражают клетки-мишени N-2 , но не Н-2к,т. е. Т-клетки распознают специфическую структуру, возникающую в результате ассоциации продукта класса I Н-2К (или Н-20) с вирусным антигеном (например, комплекс вирус/Н-2К). В контрольном эксперименте клетки-мишени обоих гаплотипов обработаны антителами, распознающими отпочковывающийся вирус и не ограниченными в своем эффекте гаплоти-пом. В результате противовирусные антитела и комплемент поражают инфицированные клетки-мишени независимо от гаплотипа. [c.159]

То, что молекулы МНС представляют чужеродные антигены Т-клеткам, бьшо впервые четко показано в 1974 г в эксперименте с цитотоксическими Т-клетками Мышей линии X заражали вирусом А, Через семь дней в селезенке у этих мышей бьши активные цитотоксические Т-клетки, которые в клеточной культуре могли за несколько часов убить зараженные вирусом фибробласты линии X, Как и следовало ожидать, они убивали фибробласты, инфицированные только вирусом А, но не вирусом В, следовательно, цитотоксические Т-клетки были вирус-специфичны. Однако неожиданно оказалось, что те же самые Т-ютетки не убивают фибробластов, инфицированных тем же вирусом А, если эти фибробласты взяты от мышей линии X фис 18-51) Значит, цитотоксические Т-лимфоциты узнавали не один только вирус, но и какое-то различие меаду двумя типами фибробластов Испсшьзуя специальные линии мышей (так называемые конэгнные аинии), которые бьши либо генетически идентичны, за исключением локусов МНС класса I, либо генетически различны, за исключением тех же локусов, удалось показать, что инфицированные клетки-мишени могли бьггь убиты только в том случае, если они экспрессировали хотя бы одну такую же молекулу МНС класса I, что и первоначально инфицированная мышь Это показывало, что гликопротеины МНС класса I необходимы для представления вирусных антигенов, связанных с клеточной поверхностью, цитотоксическим Т-клеткам Поскольку Т-клетки данной особи узнают антиген лишь тогда, когда он ассоциирован с собственными молекулами МНС этой особи, такое совместное узнавание часто называют рестрикцией-МНС. Только спустя 10 лет в серии экспериментов с цитотоксическими Т-клетками, реагирующими на вирус гриппа, удалось выяснить химическую природу вирусных антигенов, узнаваемых этими клетками, [c.267]

Так же как и вирусные антигены, представляемые цитотоксическим Т-клеткам, антигены, представляемые Т-хелперам, - это обычно фрагменты разрушенных чужеродных белков. Полагают, что эти пептиды связаны с молекулами МНС класса II таким же способом, как пептиды вирусного происхождения с молекулами МНС класса I (см. рис. 18-53). Однако в отличие от инфицированной вирусом мишени для цитотоксической Т-клетки антиген-представляющая клетка не синтезирует чужеродный белок. Вместо этого чужеродные белки, по-видимому, поглощаются путем эндоцитоза и частично расщепляются в кислой среде эндосом или эндолизосом (разд. 6.5.9), после чего отдельные их фраг- [c.271]

D8 Т8 у человека, Lyt2 и Lyt3 у мыши 60000 (гомодимер) 70 ООО (гетеродимер) На цитотоксических Т-клетках Стимулирует адгезию к клеткам-мишеням, инфицированным вирусами, вероятно путем связывания с молекулами МНС класса I [c.277]

Использование ретровирусов в качестве векторных молекул за последние годы обрело статус наиболее перспективного и универсального метода введения и экспрессии клонированных генов в эукариотических клетках. Многие свойства ретровирусов делают их более удобными для таких исследований, чем методы прямого генетического переноса или использование потенциальных вирусных векторных систем. Во-первых, относительно небольшой геном ретровирусов позволяет довольно просто с ним манипулировать и вводить в его состав чужеродные гены таким образом, чтобы любой возникаюш,ий при этом дефект вирусной репликации мог бы комплементироваться по транс-схеме. Во-вторых, вирусы можно легко нарастить в культуре до высокого титра. Эффективность инфицирования пермиссивных клеток чрезвычайно высока, что в сочетании с высоким титром вирусных препаратов позволяет получать в культуре почти 100%-ное заражение клеток-мишеней. После инфицирования единственная копия ретровирусной ДНК оказывается стабильно интегрированной в геном клетки-хозяина строго определенным образом, так что практически все инфицированные клетки способны экспрессировать гены, привнесенные вирусом. Кроме того, ретровирусы содержат мощные транскрипционные знхансеры, которые существенно повышают уровень экспрессии клонированных генов в клетках различных типов. [c.272]

Отметим, что, даже если клетка-мишень экспрессирует подходящие для данного ретровируса поверхностные рецепторы, после заражения эти рецепторы блокируются благодаря клеточной экспрессии белков вирусной оболочки [15]. Следовательно, клетка, продуктивно инфицированная репликационно-компе-тентным ретровирусом, часто оказывается иммунной к суперинфицированию вирусом с тем же тропизмом. [c.278]

Известно, что Т-лимфоциты при стимуляции антигеном начинают интенсивно делиться и превращаться в активные клетки-эффекторы. В зависимости от выделяемых ими на клеточной поверхности антител они могут быть разделены по крайней мере на три группы [267]. Первую группу составляют цитотоксические клетки, которые, реагируя с чужеродными вирусными антигенами, убивают зараженные клетки до начала репликации вируса. Молекулярный механизм, обусловливающий гибель клетки-мишени, пока не выяснен. Тем не менее известно, что для этого необходим непосредственный контакт между цитотокси-ческим Т-лимфоцитом - клеткой-киллером и инфицированной клеткой -клеткой-мишенью [268]. Во вторую группу активированных Т-лимфоцитов входят так называемые Т-хелперы, клетки-помощники, необходимые как В-клеткам, так и Т-клеткам для создания соответственно гуморального и клеточного иммунного ответов, а также активации макрофагов [269, 270]. Наконец, третью группу образуют Т-супрессоры, способные подавлять ответы В-клеток или других Т-клеток на антигены. Замечено, что Т-супрессоры, как и большинство Т- и В-лимфоцитов, функционируют только в том случае, если их непрерывно побуждают к этому Т-хелперы, которые, активируя Т-клетки супрессора, сами ингибируются. Такая обратная связь в сложной сети взаимодействий лимфоцитов обеспечивает саморегуляцию активности клеток обоих типов [271]. [c.68]

Действие D8 Т-клеток на клетки-мишени, зараженные, в частности, вирусом, имеет двойное проявление. После распознавания иммуногенного комплекса на клетке-мишени DS выделяет целый набор эффекторных молекул, совместное действие которых вызывает либо некроз (лизис), либо апоптоз инфицированных клеток. При некрозе основными эффекторными молекулами являются пер-форин и фрагментины. При апоптозе к этим молекулам добавляется ФНО-р (лимфотоксин). Интерферон-у (ИНФ-у) оказывает прямое ингибируюшее действие на размножение вирусов. Кроме того, этот цитокин активирует макрофаги (МФ), вызывая их миграцию в зону проникновения вирусных частиц. Там активированные клетки выполняют по крайней мере две функции — эффекторов, поглощающих и разрушающих вирусные частицы, и антигенпрезентирующих клеток, способствуя вступлению в реакцию дополнительных D8 Т-клеток [c.229]

Для определения антигенспецифичных Т-клеток часто используют тест стимуляции лимфоцитов - пролиферативный ответ Т-клеток на антиген, выявляемый по включению ими Н-тимидина (рис. 29.25). Цитотоксическую активность клеточных популяций обычно определяют по их способности лизировать клетки-мишени (например, инфицированные вирусами, опухолевые или аллогенные клетки). Количественно лизис клеток-мишеней определяют при помоши теста с высвобождением меченого хрома (рис. 29.26). [c.542]

Цитотоксические Т-кпетки. Т-лимфоциты, способные лизировать инфицированные вирусом клетки-мишени, экспрессирующие антигенные пептиды в комплексе с молекулами МНС класса I. Шарнирный участок. Область молекулы тяжелых цепей иммуноглобулинов, расположенная между F - и Fab-фрагментами. Обеспечивает гибкость молекулы и дает возможность независимого функционирования двух антигенсвязывающих центров антитела. Обычно кодируется отдельным экзоном. [c.564]

Клеточный и гуморальный иммунитет. Существуют две разные, но связанные между собой иммунные системы, каждая из которых ассоциирована с лимфоцитами определенного типа (рис. 10.61). Клеточный иммунитет обеспечивается Т-клетками, а гуморальный - как В-, так и Т-лимфоцитами. Клеточный иммунитет опосредуется специфическими Т-клетками цитотоксичными Т-лнмфоцитами. или киллерами (СТЕ), и направлен против клеток, несущих на своей поверхности чужеродные антигены (например, против опухолевых клеток, в которых синтезируются новые белки клеточной поверхности, или вирусных частиц на поверхности инфицированных клеток). Для воздействия киллера на клетку-мишень между ними должен возникнуть контакт, во время которого и осуществляется действие одного или нескольких специфических белков. [c.283]

Вы удивлены и обескуражены таким результатом. Как может трансформация вызываться тирозинкиназной активностью, если она одинакова в случаях мутантного вируса и вируса дикого типа, а они при этом различаются по способности трансформировать клетки Одно из объяснений может состоять в том, что ключевая мишень для фосфорилирования остается нефосфорилированной в случае мутанта по рбО . Исходя из этого, вы анализируете известные мишени фосфорилирования для рбО в инфицированных клетках. Как видно из результатов, суммированных в табл. 13-5, различия между клетками, инфицированными мутантным вирусом, и клетками, содержащими вирус дикого типа, относительно малы. Даже несколько более низкие уровни фосфорилирования рЗб, р81 и лактатдегидрогеназы в клетках, инфицированных мутантным вирусом, по-видимому, не имеют значения, поскольку другие линии К8У, легко трансформирующие клетки, фосфорилируют эти отдельные белки в еще меньшей степени. [c.249]

Вирусы воспроизводятся внутри клеток, где они укрыты от воздействия антител поэтому наиболее эффективный способ предотвратить их распространение на другие клетки состоит в том, чтобы убить инфицированную клетку еще до начала сборки вируса. Это и есть основная функция цитотоксических Т-клеток. Ввиду высокого разрушительного потенциала этих лимфоцитов чрезвычайно важно, чтобы их атака была офаничена только инфицированными клетками. Как показала микрокиносъемка, цитотоксическая Т-клетка в каждый данный момент может сосредоточить свою атаку лишь на одной клетке-мишени, даже если [c.262]

Рис. 18-52. Цитотоксическая Т-клетка убивает клетку, инфицированную вирусом, в том случае, если она узнает фрагменты вирусных белков, связанные с молекулами МНС класса I на поверхности зараженной клетки. В представленном на схеме случае пептидные фрагменты образукггся из нуклеопротеина (НП) вируса гриппа, для простоты показан только этот внутренний вирусный белок. Разрушается лишь очень малая доля вирусных бежов, синтезируемых в клетке-мишени. Как происходит их расщепление и как образующиеся пептидные фрагменты достигают поверхности клетки, неизвестно, неясно также, где эти фр а пугенты первоначально ассоциируюгтся с гликопротеинами МНС.

Нетрудно себе представить, как может происходить расщепление вирусных белков в инфицированных клетках, так как известно, что почти все клеточные белки непрерьюно разрушаюп ся (разд. 8.2.4). Труднее понять, как фрагменты вирусного нуклеопротеина попадают на поверхность клетки, поскольку вирусные белки синтезируются на цитоплазматических рибосомах и в обычных условиях не имеют доступа к полости эндоплазматического ретикулума, где обычно начинакп свой путь белки, предназначенные для клеточной поверхности (разд. 8.1.4). Однако для узнавания Т-клетками требуются, вероятно, очень небольшие количества антигена. Поэтому случайный выход даже небольшой доли фрагментов нуклеопротеина на клеточную поверхность может привести к образованию к летки-мишени, которую мог бы узнать цитоток сический Т-лимфоцит. [c.269]

Существуют по меньшей мере три функционально различных подкласса Т-лимфоцитов 1) цитотоксические Т-клетки, способные непосредственно убивать чузкеродные клетки или клетки, инфицированные вирусами 2) Т-хелпер , которые могут помогать В-клеткам в создании гуморального иммунного ответа (образовании антител), помогать другим Т-клеткам в осуществлении иммунных ответов клеточного типа и активировать макрофаги 3) Т-супрессоры, которые могут ингибировать реакцию В-клеток и других Т-клеток-Т-хелперы и Т-супрессоры-главные регуляторы иммунных ответов. Они взаимодействуют с лимфоцитами-мишенями, узнавая либо чужеродный антиген, либо идиотипы рецепторов на поверхности этих клеток-мишеней. [c.66]

Какие молекулы узнают NK-клетки на убиваемых ими мишенях, неизвестно. Между тем выяснено, что цитотоксические Т-клетки узнают вирусные молекулы, связанные с гликопротеииами МНС иа поверхности клеток, инфицированных вирусами. Однако лишь недавно установлена решающая роль молекул МНС в представлении аитигеиа Т-клеткам. [c.264]

Смотреть страницы где упоминается термин Инфицирование клеток-мишеней: [c.267] [c.14] [c.480] [c.52] [c.61] [c.61] [c.268] [c.269] [c.299] [c.231] [c.249] [c.249] [c.309] [c.411] [c.16] [c.152] [c.213] [c.215] [c.268] [c.65]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология