Градиентное сканирование

Рис. 7.4-14. Градиентное сканирование, основанное на выборе точки отсчета для разных времен задержки (каждое соответствует разному соотношению проба/реагент) [7.4-3]. В каждой точке детектор быстро сканирует диапазон длин волн (а), создавая таким образом дополнительное измерение для матрицы время—концентрация (б). Матрица состоит из ряда последовательных эмиссионных спектров, зарегистрированных на возрастающей и убывающей частях дисперсионной зоны, которая содержит Ка, К и Са, инжектированные в атомно-эмиссионный спектрометр с быстрым сканирующим монохроматором.

КИМ образом, вместо N параметров ищутся всего два параметра 0, СС2- Поиск параметров 0 , 7 , б , 0, 2, обеспечивающих минимум функционала, можно вести различными методами градиентными, случайного поиска, сканированием. [c.189]

Общий недостаток градиентных методов в оптимизации, за исключением, может быть, метода тяжелого шарика , состоит в том, что все они застревают в ближайшем локальном оптимуме, в область притяжения которого попадает выбранная начальная точка спуска. В отличие от этих методов метод сканирования никак не связан с наличием локальных оптимумов целевой функции. Поэтому его можно использовать иногда для предварительного грубого установления границ областей притяжения указанных оптимумов, после чего могут уже применяться градиентные методы спуска для измерения точной глубины каждого локального оптимума. . [c.508]

Далее можно исследовать либо один состав подвижной фазы в интервале от фл до ф2, либо весь диапазон, представляющий практический интерес. Обычно выбирают первое. В этом случае результатом градиентного сканирования является бинарная смесь, определяющая оптимальную элюотропную силу подвижной фазы. Для оптимизации селективности можно исследовать изоэлюотропные смеси иного состава (с использованием иных органических модификаторов) (см. разд. 5.5). [c.247]

Если единственной целью градиентного сканирования является нахождение смесей заданной элюотропной силы, то дальнейшая оптимизация основных параметров не рассматривается и число параметров, вовлеченных в оптимизационный процесс, ухменьшается на единицу. При оптимизации состава тройной подвижной фазы объемная доля одного из них определяется двумя другими, так как сумма всех долей должна быть равна единице. Если мы ограничим себя изоэлюотропными смесями, останется проблема монопараметрической оптимизации. Как было показано в разд. 3.2.2, 60%-ный водный метанол соответствует примерно 48% ацетонитрила в воде или 37% тетрагидрофурана в воде. Процесс оптимизации можно продолжить, приняв эти смеси за чистые растворители (т. е. растворитель А — смесь метанол — вода, 60 40) и обозначив их как псевдорастворители [37], или как псевдокомпоненты подвижной фазы [38]. [c.248]

Метод случайного поиска (сканирования). Наиболее простой алгоритм реализации этого. метода, на.чывае.мый еще поиском на сетке переменных, заключается в том, что по каждой независимой переменной даются приращения в порядке, обеспечивающем заполненне всей области изменения этих переменных равномерной и достаточно густой сеткой. Для произвольного числа независимых переменных шаг по каждой следующей производится после того, как полностью завершен цикл по предыдущей. При достаточно густом расположении исследуемых точек гарантируется отыскание глобального оптимума, так как анализируется вся область изменения независимых переменных Другое достоинство — независимость поиска от вида оптимизируемой функции. В отличие от градиентных метод сканирования не связан с наличием локальных оптиму.мов целевой функции. [c.109]

Ограничения метода градиентного сканирования. Основной недостаток описанного выше метода градиентного сканирования состоит в необходимости использования селективных детекторов. Универсальные детекторы, т. е. регистрирующие любой компонент, обязательно будут давать гигантский сигнал при смене состава подвижной фазы. Из-за этого фона обнаружение компонентов образца окажется невозможным. Поэтому необходимо применять детектор, не реагирующий на смеиу состава подвижной фазы. Наиболее обычным в ВЭЖХ является детектор, регистрирующий изменение поглощения в УФ-области. Естественно, что он может быть применен в условиях градиентного элюирования, если выбранные растворители не поглощают при рабочей длине волны детектора. Обнаружение по поглощению в УФ-области может, однако, быть практически универсальным, если мы выберем более короткие длины волн (например, 210 нм). В таком случае мы можем говорить о почти универсальном обнаружении [34]. Возможность применения коротких длин волн зависит от природы и чистоты растворителя. В связи с этим в ОФЖХ ацетонитрил следует предпочесть метанолу. Однако, как указывалось выше, водно-метанольные градиенты позволяют оценить поведение компонентов в изократических условиях на основании единичного опыта, так как в данном случае соблюдается уравнение (3.46). Применительно к смесям тетрагидрофурана и воды уравнение (3.46) выполняется лишь приблизительно, а для смесей ацетонитрила и воды вообще становится неверным (см. табл. 3.1). [c.248]

Толщина слоя сорбента 0,05—2 ммЗ 10%. В камерах t= (35-н 225) — 2 °С. Объем проб 0,1—100 мкл. Скорость подачи проб автоматическим дозатором 4, 8, 12, 32, 36, 72 мкл/ч, элюента при градиентной хроматографии 0,23 0,56 2,3 и 5,2 мл/мин. ПЧ при определении активности, не более по =>н 10 Ки, по i 10 Ки. Величина строки при сканировании 5 мм, скорость развертки 0,1 0,4 1,0 3,0 см/мин. Возможно нанесение ядовитых и радиоактивных проб в инертной атмосфере, проведение обычной и микрохроматографии, а также препаративной хроматографии восходящим, нисходящим, горизонтальным, проточным и градиентным методами. Проявление в УФ-свете при 254 и 365 нм. Фоторегистрация хроматограмм репродукционным методом, а также методами адсорбционной и люминесцентной контактной печати [c.261]

Фотометрические детекторы для жидкостной хроматографии являются, как правило, двухдучевыми. С их помощью определяют разность поглощения света в измерительной и сравнительной кюветах, через которые, соответственно, пропускают элюат с колонки и растворитель. Может быть использован и принцип двухволновой фотометрии, когда детектор имеет только одну кювету, через которую движется элюат с колонки. Фотометрирование проводят на двух длинах волн. При этом на одной длине водны поглощает как хроматографируемое вещество, так и растворитель, а на другой — только хроматографируемое вещество. Таким образом, можно выделить поглощение света анализируемым веществом. Однако для этого необходимо знать соотношение мольных акстинкций растворителя на обеих длинах волн. Преимуществом метода двухволновой фотометрии является возможность более точного учета изменения оптической плотности растворителя при градиентной элюции и фотометрии оптически неоднородных объектов, например при сканировании хроматографических капиллярных колонок или сканировании пластинок в количественной тонкослойной хроматографии, где необходимо определить оптическую плотность фона и поглощения хроматографического вещества в одной точке пространства. [c.95]

Преимуществом УФ-детекторов является высокий отклик на большинство представляющих интерес материалов. Многие органические соединения, представляющие практический интерес в биологии, медицине и в промышленном органическом синтезе, содержат ароматические группировки, поглошаюшие в УФ-области. Хотя УФ-детекторы не являются универсальными по отклику, они очень селективны по отношению ко многим важным веществам. Кроме того, поскольку многие элюенты не поглощают в УФ-области (по крайней мере, в значительно широком диапазоне), УФ-детекторы отличаются высокой чувствительностью в хроматографии с градиентным элюированием например, могут быть эффективно использованы градиенты с пентаном, метиленхлоридом и ааетонитрилом. УФ-спектры практически не зависят от температуры, образцы в детекторе не разрушаются, а при сканировании по всему диапазону длин волн часто становится возможной идентификация элюируемых пиков по спектру. Таким образом, УФ-цетектор имеет существенные преимущества перец рефрактометром и детектором по теплоте адсорбции. Кроме того, сконструированы и эффективно используются /21/ детекторы с малым мертвым объемом ячеек ( < 10 мкл) и короткими коммуникациями, соединяющими детектор с колонкой. [c.220]

Миро и др. [876] применяли гели с экспоненциальным градиентом концентрации полиакриламида, приготовленные в кварцевых трубках. Это дало возможность проводить прямое денситометрическое сканирование гелей. Чтобы обеспечить стабильность градиента концентрации акриламида во время полимеризации, создавали параллельный градиент концентрации глицерина. ТЕМЭД и персульфат добавляли в концентрациях обратно пропорциональных концентрации акриламида. Гели готовили на буфере, содержащем триэтаноламин, ацетат натрия и ЭДТА (pH 7,4). Электродные резервуары наполняли тем же буфером с добавлением глицерина, ДСН и дезоксихолата. Ядрышковые РНК из клеток НеЬа наносили на гель в объеме 50 и 800 мкл. Если электрофорез продолжался в течение 9 ч, то разделение было лучше в пробе с объемом 50 мкл, однако через 18 ч в обоих случаях были получены одинаково хорошие результаты (рис. 121). Изучение кинетики электрофоретической миграции показало, что в градиентном геле разные виды РНК движутся с той же относительной скоростью, что и в однородном геле. При использовании экспоненциального градиента концентрации от 1,8 до 15% можно в один прием разделить все клеточные РНК и определить их молекулярные массы. [c.379]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология