Градиентное выбор условий

Выбор оптимальных условий,фракционирования в каждом данном случае делается на основании предварительных опытов хроматографии. Однако, как правило, для фракционирования природных полимеров с катионными свойствами, таких, как полипептиды и белки, удобнее градиентное элюирование с увеличением молярности элюента при постоянном pH. [c.213]

Как ясно из предыдущего изложения, чисто расчетный выбор оптимальных условий градиентного элюирования требует знания параметров и т уравнения (4.46). Разумеется, эти величины можно определить, проведя необходимые предварительные измерения в изократическом режиме. Однако не всегда компоненты смеси доступны в индивидуальном виде, в связи с чем чаще условия градиентного элюирования, близкие к оптимальным, выбирают опытным путем на основании следующих правил. [c.120]

Градиентный метод, или метод производных моментов, основан на решении системы алгебраических уравнений, составленных исходя из классической схемы радикальной полимеризации, при определенном выборе условий эксперимента (например, отсутствие передачи цепи на полимер). [c.114]

Рефрактометр представляет собой недеструктивный концентрационный детектор средней чувствительности. Последняя определяется разностью показателей преломления элюента и анализируемых веществ и часто может быть повышена за счет правильного выбора подвижной фазы. В оптимальных условиях предел обнаружения для рефрактометра достигает 5 10" г/мл. Основные недостатки рефрактометрических детекторов— практическая невозможность использования при градиентном элюировании и необходимость тщательной стабилизации температуры. Для работы на максимальной чувствительности нужно поддерживать температуру элюента и обеих ячеек кюветы, с точностью до 10 -10 °С, что затруднительно даже при помещении кюветы в металлический блок с большой теплоемкостью и использовании эффективных теплообменников. Последние, в свою очередь, увеличивают мертвый объем между колонкой и кюветой детектора, что приводит к дополнительному размыванию хроматографических зон и снижению эффективности разделения. [c.153]

Другой возможностью выбора состава подвижной фазы для изократического элюирования является проведение пробного разделения в градиентном режиме. Исходя из того, при каких концентрациях элюируются компоненты разделяемой смеси, можно рассчитать состав подвижной фазы, которая обеспечит приемлемое удерживание в изократических условиях [226, с. 173]. Наконец, для решения этой задачи могут использо- [c.274]

Наряду с этим направлением многого можно ожидать от более широкого использования динамического модифицирования обычных сорбентов — силикагеля или его химических производных. Выбор динамических модификаторов среди известных веществ довольно широк и по мере развития исследований в этой области может обогатиться за счет целенаправленного синтеза. Хроматографист ири минимальном наборе готовых сорбентов с помощью динамического модифицирования сможет получить широкий спектр неподвижных фаз разной селективности. Принципиальное отличие этого режима хроматографии от традиционных в том, что состав неподвижной фазы очень сильно зависит от состава подвижной. Следовательно, появляется возможность в условиях градиентного элюирования не только из- [c.352]

Симплекс-оптимизация. Как и в ГХ с программированием температуры, применение симплекс-оптимизации в жидкостной хроматографии с программированием элюента является довольно простой процедурой. И для изократического, и для градиентного элюирования применима одна и та же методика оптимизации при условии правильного выбора критериев. [c.340]

В некоторых случаях два или более пиков образца будут разрешены не полностью даже после оптимизации активности растворителя. Для многокомпонентных смесей это может быть связано с основной проблемой элюирования , обсуждающейся в разд. 3 данной главы. Проблема эта состоит в том, что различным компонентам образца соответствуют самые разные значения к, так что с одним растворителем к не будет оптимальным для всех компонентов. Общая проблема элюирования требует изменения хроматографической активности растворителя в процессе разделения (т. е. градиентной подачи растворителя) или некоторых эквивалентных изменений в условиях разделения. Это усложняет выбор системы растворителя, но принципы отбора подобны тем, которыми руководствуются при выборе одного растворителя нужной активности. [c.98]

Программа градиентного элюирования. Эта методика чрезвычайно важна, так как благодаря своим большим потенциальным возможностям она одна может способствовать выбору правильных условий разделения данной смеси. [c.304]

Выбор методики анализа фракций определяется природой анализируемого материала причем выбрать методику анализа, а в некоторых случаях и испытать необходимо перед началом хроматографирования. Применяют физические, химические и биологические методики. Чаще всего измеряют показатель преломления. Пользуются также различными колориметрическими методами, а также тонкослойной или бумажной хроматографией и электрофорезом. Идеальным способом является детектирование радиоактивных изотопов. Измеряя pH и электропроводность отбираемых фракций, можно контролировать условия элюирования. Именно такой контроль позволяет воспроизводить условия градиентного элюирования. В ряде случаев очень полезно комбинировать несколько методов детектирования. Полезны также непрерывное автоматическое детектирование (с достаточно высокой чувствительностью) разделенных соединений и регистрация хроматограмм (см. разд. 8.6, 8.7). Результаты измерений записывают в виде кривой зависимости измеряемой величины от объема элюата или номера фракции. Исходя из распределения пиков на хроматограмме некоторые фракции можно объединить. При этом необходимо следить, чтобы объединялись совершенно чистые фракции, не содержащие примесей других компонентов, иначе потребуется повторное хроматографирование. Фракции, предназначенные для количественных анализов, хранят в темноте и на холоду с тем, чтобы не допустить нежелательных реакций. Фракции соединений, окисляющихся на воздухе или поглощающих диоксид углерода, следует хранить в герметически закрытых сосудах. [c.281]

Каким образом ядра на этой ранней стадии получают сигнал о включении набора генов, необходимых для выбора пути развития Считается, что для яиц характерно асимметричное, возможно градиентное, распределение молекул, которые и запускают экспрессию генов. Поэтому условия [c.80]

Соответствуюпще итерационные формулы строятся с помощью тех же приемов, которые рассматривались выше при учете условия гладкости первого порядка — вначале формулируют последовательность Приближений соответствующего градиентного метода для второй производной и т) у затем, используя операцию интегрирования, получают последовательность и условие для выбора числовых параметров алгоритма в терминах исходной задачи. В данном случае возможен учет априорной информации не только о значении функции в некоторой точке отрезка [а, Ь], но и о значении первой производной в этой или любой другой точке В частности, для введенной функции г(лг) и полученных формул градиента, возможен простой учет сведений о значениях и(а) и и (а), который заключается в том, что на вариацию искомой [c.196]

Осложнения возникают, если один или несколько параметров уравнения (10) или (12) систематически изменяются в процессе хроматографического разделения. Часто причиной является перегрузка колонки веществом или изменение набивки и степени смачивания по длине колонки, изменения температуры, расслоение комбинированной жидкой фазы, изменения скорости протекания, неравномерность распределения вещества по сечению и зависимость поглотительной способности неподвижной фазы от концентрации. При тщательном проведении зксперимента и соответствующем выборе условий опыта можно исключить все упомянутые источники ошибок, кроме последнего. Постоянство же козффициентов распределения и адсорбции К ) является идеальным случаем, который часто имеет место (особенно при адсорбции) лишь в области малых и очень малых концентраций. Для большинства веществ сродство к твердой неподвижной фазе уменьшается с ростом концентрации уже задолго до достижения состояния насыщения изотермы адсорбции при этом обычно изогнуты в сторону оси концентрации. В случае распределительных изотерм возможно искривление в сторону как одной, так и другой оси. Это явление объясняется, как правило, процессами ассоциации. Так как константа распределения вещества в хроматографической колонке охватывает все значения между О и некоторым максимумом, искривление изотермы неизбежно. Если, например, ПК уменьшается с ростом концентрацйн, то максимум зоны имеет тенденцию перегонять фронт зоны, в результате чего образуется асимметричное распределение с резким фронтом и более или менее вытянутым хвостом. Последний возникает из-за того, что скорость перемещения в заднем конце зоны уменьшается с уменьшением концентрации в той же мере, что и К. Хвост кончается в том месте, где К становится постоянным. Это, часто обременительное, явление имеет место в принципе только при изменении условий хроматографического разделения. Соответствующий градиент концентрации в подвижной фазе может, например, это все возрастающее влияние усилить до такой степени, что зтот эффект будет в точности компенсировать уменьшение кривизны изотермы. Такая специальная методика носит название градиентного злюирования [32]. [c.101]

Метод ионообменной хроматографии в настоящее время широко используется для получения чистых препаратов редкоземельных элементов (РЗЭ) [1—4]. Известно большое число различных методик хроматографического разделения смесей РЗЭ, но многие из них носят эмпирический характер. Наряду с этим в литературе имеется ряд сообщений, посвященных выбору условий хроматографического разделения смесей. Мейер и Тонкине [5] использовали теорию тарелок для описания процесса элюирования РЗЭ раствором лимонной кислоты теоретические кривые вымывания совпали с опытными. Метод расчета применим также для определения чистоты РЗЭ, разделяемых при помощи процесса элюирования. Корниш [6], используя выражение, данное Глюкауфом для высоты, эквивалентной теоретической тарелке (ВЭТТ), применил теорию тарелок для предсказания условий разделения смесей ряда элементов. В работах Масловой, Назарова и Чмутова [7,8] была рассчитана величина ВЭТТ для процесса вымывания церия раствором молочной кислоты, что дало возможность произвести расчет кривой элюирования и установить условия получения элемента с заданной степенью чистоты. В работе тех же авторов [8] на примере разделения церия и прометия молочной и пирофосфорной кислотами был проведен расчет процесса градиентного элюирования РЗЭ, с использованием теории Фрейлинга. Расчет удовлетворительно совпадает с экспериментальными данными. В работах Еловича и сотр. [9—12] получено выражение для расчета процесса разделения близких по свойствам элементов. На примере разделения трансурановых элементов при помощи ЭДТА показано решающее значение комплексообразования по сравнению с обычным ионным обменом. В работах Материной, Сафоновой и Чмутова[13] рассмотрена возможность применения фронтального анализа в ионообменной комплексообразовательной хроматографии. Авторы изучали процесс комплексообразования в зависимости от pH среды. Маторина [14] изучила зависимость равновесного коэффициента разделения от pH [c.170]

Иллюстрацией могут служить разработанные эмиссионные методы анализа сухих остатков [1—3]. В предложенных методах анализируемый раствор наносят на графитовые диски с использованием химически активных добавок и применением искусственной атмосферы и магнитного поля. Проведена также оптимизация чувствительности спектрального анализа для выбора единых условий одновременного определения >20 микропримесей на основании изучения взаимной корреляции чувствительности определяемых элементов предложен обобщенный параметр оптимизации. Нахождение оптимальных условий для предложенного метода проведено статистическим градиентным методом крутого восхождения по Боксу и Уилсону с применением многофакторного планирования экспериментов ДФЭ2 , ДФЭ2 Изучено влияние следующих факторов сила тока дугового разряда, компоненты химически активных добавок, расстояние между электродами, регистрируемый участок плазмы, глубина кратера, форма электродов и наличие магнитного поля. Достигнут предел обнаружения для всех 24 элементов от га-10 до п-10 °% и с воспроизводимостью, превышающей в 1,5—2 раза известные методы, в том числе метод сухих остатков на импрегнированных графитовых электродах. [c.228]

Основным вопросом, решаемым в методах градиента, наряду с определением направления градиентного вектора является выбор шага движения по градиенту. Выбор величины шага в направлении grad F в значительной степени зависит от вида поверхности. Если шаг слишком мал, это потребует продолжительных расчетов. Если наоборот размеры шага слишком велики, можно проскочить оптимум. Размер шага Ал ,-должен удовлетворять условию, чтобы все шаги от базисной точки лежали в том же самом направлении, как и направление градиента в базисной точке. Размеры шага но каждой переменной Xi вычисляются из значений частных производных в базовой (начальной) точке [c.154]

Это означает, в частности, что фракционирование макромолекул путем изократической элюции в большинстве случаев имеет мало шансов на успех. Подавляющее большинство макромолекул ири данном выборе элюента либо уже будет находиться в подвижной фазе, либо окажется слишком прочно связанным с неподвижной фазой. Непрерывная линейная градиентная элюция здесь удобнее, так как она для одиого белка за другим создает ситуацию, отвечающую быстрой десорбции. Отметим нонутно, что можно исходно уменьшить среднее число точек сорбции и тем самым улучшить условия разрешения, если уже при внесении вещества на колонку уравновесить ее жидкой средой, которая препятствует многоиози-циопной сорбции вещества в колонке, напрпмер солевым раствором умеренной концентрации. Одиако подобрать такую концентрацию, которая была бы оитимальпои для всех компонентов смеси макромолекул, удастся редко. [c.46]

Выбор величины шага из условия (18) гарантирует выполнение словия монотонности 6 . Фактически при таком подходе для определения BejurtHHM шага градиентного метода приходится решать еще одну вспомогательную задачу (18) одномерной минимизации. Заметим, что в прикладных задачах поиск минимума функции (а) на всей полуоси становится обременительным и [c.20]

Выбор оптимальных температурно-временных режимов формирования адгезионного контакта, отверждения связующего и отжига адгезионных соединений является сложной и трудоемкой задачей, так как температурные и В1ременные интервалы достаточно широки. Этот процесс можно существенно упростить, если получение образцов производить в термическом поле, имеющем градиент температур [45]. Для выбора оптимальной температуры создания адгезионного контакта полимерных покрытий на металлах покрытие формируют на металлической подложке, имеющей поверхностный градиент температуры (пащример, на пластине, имеющей на одном конце нагреватель, а на противополажном — охладитель). Покрытие можно формировать либо непосредственно на градиентной пластине, либо на фольге, помещенной на ее поверхность. Последний вариант предпочтительнее. При градиентном способе формирования покрытий каждый элементарный участок покрытия, расположенный в направлении градиента температуры, формируется при температуре, отличающейся от температуры соседнего участка. После формирования покрытие с подложкой снимают с градиентной пластины и охлаждают. Если полученное в таких условиях покрытие отслаивать ют подложки (или подложку от покрытия) в направлении градиента температуры, существовавшего на стадии формирования адгезионного контакта, непрерывно регистрируя сопротивление разрушению адгезионного соединеиия, то полученная адгезиограмма представляет собой за- [c.41]

Основным вопросом, решаемым в методах градиента наряду с определением направления градиентного вектора, является выбор шага движения по градиенту. Выбор величины шага в направлении grad F в значительной степени зависит от вида поверхности. Если шаг слишком мал, это потребует продолжительных расчетов. Если наоборот размеры шага слишком велики, можно проскочить оптимум. Размер шага Дд ,- должен удовлетворять условию, чтобы все шаги от базисной точки лежали в том же самом [c.219]

Из второй группы методов применительно к определенным задачам используются градиентный, наискорейшего спуска, покоординатного спуска, релаксационный, динамического программирования, метод ветвей и границ. Рассмотрим кратко применение градиентного метода для оптимального распределения элек--трической нагрузки. При использовании других методов алгоритм изменяется главным образом в отношении условий и способов выбора направления, а также величин шага итерации. [c.156]

Быстрому выбору подходящей разделительной системы может помочь градиентное элюирование. Таким способом можно быстро установить число компонентов пробы. Зная время элюирования и соответствующий состав элюента, можно сделать заключение о полярности составных частей пробы. Все это облегчает выбор элюента для элюирования при изократных условиях. Поскольку всегда существует возможность образования ложных пиков, которые возникают вследствие концентрирования примесей элюента на неподвижной фазе, то при интерпретахщи пиков следует быть осторожным. Всегда желательны дополнительные изократные разделения. При использовании полярных неподвижных фаз градиентное элюирование начинают с относительно неполярных элюентов, напримф гептана, переходят к более полярному элюенту, напримф хлористому метилену, и затем к элюенту, к которому в качестве вытеснителя добавлен компонент с большой элюирующей силой, например 10 — 50% [c.219]

Первую группу образуют градиентные методы. Хотя главным условием является нахождение точки, в которой первые производные по конформационным переменным равны нулю, а вторые производные больше нуля, некоторые методы ие требуют ЯВ1ЮГ0 вычисления производных. Эти методы можно рассматривать как семейство процедур, отличающихся спосо бом преобразования /+1 — Е( (здесь I и 1+1 отвечают соседним точкам конформациоиного пространства) для вычислении производных в точке I и выбора конформации Х+ь Метод наискорейшего спуска является одним из самых простых, но пользуется большой популярностью в конформационных расчетах в связи с хорошей сходимостью результатов. Недостатком метода считается его невысокая скорость. Метод Ньютона — Рафсона отличается большей сложностью и требует вычисления вторых производных, тем ие менее в настоящее время подобные методы используются достаточно часто. Метод Флетчера — Ривса позволяет обходиться без вычисления вторых производных, а информацию о кривизне энергетической поверхности получают с помощью использования квадратичных форм приближения. Методы Давидона [9] и Флетчера — Пауэлла [11] используют преимущества как процедуры Ньютона — Рафсона, так и процедуры Флетчера — Ривса. Перечисленные методы достаточно эффективны, но имеют недостаток поиск прекращается в любом из локальных минимумов. Действительно, выход из минимума невозможен ввиду принципиальных особенностей алгоритмов указанного типа. [c.579]

Несмотря на общность приведенных выше схем очистки многих рестриктаз, она является в большей степени кажущейся, чем действительной. Это связано с тем, что в каждом конкретном случае необходим индивидуальный подход, выражающийся в подборе условий проведения той или иной стадии и выборе последовательности их применения. Вместе с тем по ходу развития работ по очистке рестриктаз выявилась тенденция создания именно унифицированных (универсальных) схем, пригодных для выделения многих рестриктаз без предварительного подбора условий проведения отдельных стадий и их последовательности. Иначе говоря, по тем или иным соображениям выбирается схема и проверяется ее пригодность для очистки ряда рестриктаз. Первыми этот подход реализовали Бикл с соавт. [43]. Их схема включала обработку бесклеточного экстракта ПЭИ в присутствии 0,1 М Na l, последующее высаливание белков 70% насыщением раствора сернокислым аммонием, диализ и хроматографическое фракционирование на ГС (градиентная элюция 0,0—1 М Na l). Применение такой процедуры, согласно утверждению авторов, позволило получить препараты большинства из 16-ти исследованных рестриктаз, по уровню функциональной чистоты пригодные для опытов по физическому картированию, а в некоторых случаях и для секвени-рования ДНК. [c.159]