Аспарагиновая кислота, лабильность

Гидролиз пептидных связей, протеолиз и автолиз. Некаталитическое расщепление пептидных связей проходит в очень-жестких условиях- Так, полного расщепления полипептидной цепи на отдельные составляющие аминокислоты добиваются лишь путем длительного (многочасового) кипячения раствора белка в концентрированной соляной кислоте- В несколько более мягких условиях, при нагревании белковых растворов при нейтральных или слабощелочных pH и температуре 80-100°С, гидролиз пептидных связей либо проходит лишь незначительно, либо его вообще не наблюдается. Из всех пептидных связей наиболее лабильными к высокотемпературному гидролизу, как правило, оказываются те, которые образованы остатками аспарагиновой кислоты. [c.121]

Анализ белков.— Белки обычно гидролизуют кипячением с 20%-ной соляной кислотой или 35%-иой серной кислотой. Щелочной гидролиз сопровождается глубокой рацемизацией и применяется только при определении триптофана и тирозина, чувствительных к минеральным кислотам. Ферментативный гидролиз протекает медленно и, вероятно, не полностью, однако он не осложняется деструкцией лабильных продуктов, образующихся при гидролизе. Если аспарагиновая и глутаминовая кислоты присутствуют в белке в виде амидов, то кислотный гидролиз превращает амидный азот в соответствующие аммонийные соли. Методом Кьельдаля определяют количество общего азота содержание амидного азота устанавливают подщелачиванием аликвотной порции и отгонкой аммиака в отмеренный объем титрованной кислоты. В этом случае количество аммиака соответствует количеству присутствующих в белке амидов дикарбоновых аминокислот. [c.640]

Пептидные связи по обеим сторонам остатка аспарагиновой кислоты в молекуле белка особенно легко гидролизуются разбавленными кислотами [233], приче степень гидролиза зависит от pH раствора, а не от концентрации используемой кислоты [32, 189]. Так, из альбумина сыворотки крови быка за 18 час при 100° и pH 2,14 выделяется 44% остатков аспарагиновой кислоты в виде аминокислоты, в то время как при pH 3,15 освобождается всего 26% остатков кислоты [189]. При экстракции эластина 0,25 М щавелевой кислотой при 100° был получен растворимый белок единственной выделенной свободной аминокислотой оказалась аспарагиновая кислота [235]. Однако присутствие в продукте реакции пептидов с короткой цепью и результаты определения концевых груМп [24, 234] указывают на значительную степень гидролиза и других пептидных связей. Исследования, проведенные на модельных соединениях [73], позволили сделать вывод о лабильности связей остатков серина и треонина. Применение описанного выше метода гидролиза для исследования цепи А окисленного [c.226]

Для связывания белков наиболее часто используют такие группы молекулы белка, как N-концевая а-аминогруппа и s-ами-ногруппа лизина, а также С-концевая карбоксильная группа и карбоксильные группы глутаминовой и аспарагиновой кислот. Фенольные гидроксильные группы тирозина или SH-группы остатков цистеина могут также принимать участие в связывании. В углеводах и их производных чаще всего в связывании принимают участие гидроксильные и аминогруппы, в нуклеиновых кислотах — фосфатные группы, гидроксильные группы сахара и амино- или енольные группы оснований. Высокомолекулярные соединения, которые обладают большим числом групп, способных связываться, присоединяются несколькими участками. Вследствие этого значительно уменьшается риск отщепления связанной молекулы, однако многоточечное связывание может приводить к деформации нативной структуры иммобилизованной молекулы и таким образом изменять ее свойства. Иногда применяют методы более лабильного связывания, например через тиолсложноэфир- [c.231]

Синтез пептидов с С-концевым остатком аспарагиновой кислоты не представляет затруднений [820, 1369, 1425, 1558, 1810, 2283, 2583]. Исходными соединениями служили диметиловый [849], диэтиловый [820, 1369, 2583], ди-трег-бутиловый [2283] и дибензиловый [1425, 1558] эфиры L-аспарагиновой кислоты. Пептидный синтез осуществляли методом смешанных ангидридов [1425, 1558, 2283], азидным [2583] и фосфоразо-методами [820]. Если в плане синтеза предусматривается продолжение построения пептидной цепи по N-концу, то следует учитывать лабильность сложноэфирных группировок при обработке 30%-ным раствором бромистого водорода в ледяной уксусной кислоте [125]. Как и в случае аналогичных производных глутаминовой кислоты, в этих условиях из дибензилового эфира аспарагиновой кислоты образуется 18% а-моноэфира и 6% аминокислоты, из р-бензилового эфира—16% свободной аминокислоты, а из а-бензилового эфира — 10% аминокислоты. р-Этиловый эфир более устойчив он гидролизуется всего лищь на 4%. Однако в литературе можно найти много данных о декарбобензоксилировании эфиров пептидов, содержащих остатки аспарагиновой кислоты, без указания на наличие побочных реакций 149, 2163, 2217]. Если планируется удлинение пептидной цепи по С-концу, то в пептидный синтез можно вводить соли моноэфиров аспарагиновой кислоты [1249, 2350а]. Применение с этой целью а-трет-бутилового р-бензилового [1862, 2265] и а-бензилового -трет-бутилового [1974] диэфиров L-аспарагиновой кислоты кажется более перспективным. [c.270]

Пептидные связи, образуемые серином и треонином, очень лабильны в кислой среде механизм специфического гидролиза этих связей обсуждается на стр. 128. Триптофан разрушается под действием кислот. Партридж и Дэвис 10], Блэкборн и Ли [И ], а также Грэннис [12] изучали другой пример специфического гидролиза, а именно преимущественное отщепление свободной аспарагиновой кислоты при кипячении белка с уксусной или щавелевой кислотой. В этих условиях отщепляется также свободная глутаминовая кислота, но значительно медленнее. Предполагают, что в достаточно разведенной кислоте кислотные группы этих аминокислот еще сохраняют отрицательный заряд и, притягивая водородные ионы, лабилизуют соседние пептидные связи. Путем повторной экстракции 0,25 М щавелевой кислотой при 100° в течение 1 час Партриджу и др. [13] удалось полностью перевести в раствор нерастворимый белок эластин в виде двух производных этого белка. Такой резуль- [c.118]

В разбавленных кислотах. Гидролиз щавелевой кислотой при 100° приводит (по крайней мере в случае некоторых белков) к наиболее интересному результату . Вначале выделяется одна только аспарагиновая кислота и только значительно позднее наряду с аспарагиновой кислотой выделяются глутаминовая и другие аминокислоты [447]. Партридж предполагает, что такая специфичность обусловлена -карбоксильной группой аспараги-иовой кислоты, которая в слабокислой среде может выступать в роли донора протонов. Можно, конечно, представить себе и иные толкования, но необходимо учитывать, что находящаяся в -положении карбоксильная группа, как это недавно было продемонстрировано на модельных соединениях, оказывает особенно эффективное влияние на лабильность амидных связей (448Ц. Этот интересный способ уже применялся при исследовании частичного гидролиза эластина [449J. [c.179]

Анализ белков. — Белки обычно гидролизуют кипячением с 20,%-ной соляной кислотой или 35%-ной серной кислотой. Щелочной гидролиз сопровождается глубокой рацемизацией и применяется толыко лри определении триптофана и тирозина, чувствительных к минеральным кислотам. Ферментативный гидролиз протекает медленно и, вероятно, не полностью, однако он не осложняется деструкцией лабильных продуктов, образующихся ири гидролизе. Если аспарагиновая и глутаминовая кислоты присутствуют в белке в виде амидов,, то кислотный гидролиз превра1цает амидный азот в соответствующие аммонийные соли. Методом Кьельдаля определяют количество общего- [c.654]

Тип связи между дисахаридными остатками и полипептидной цепью, по-видимому, различен в препаратах гликопротеина подчелюстных желез овец из Канберры (Австралия) и овец из континентальной Европы. В Канберре при забое в основном (на 80%) используют ягнят в возрасте четырех месяцев. В Европе же забивают только трехлетних овец (и старше). На основании данных, полученных с помощью различных методов (см. том 1, гл. 10), было показано, что в ПЖО (из ягнят) часть дисахаридных остатков присоединена к пептидной цепи через гликозиднр-эфирные связи с участием ано-мерного углеродного атома N-ацетилгалактозамина и свободных карбоксильных групп остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот. Однако наличие такого типа связи строго не доказано. В настоящее время нет достаточно специфического метода, с помощью которого можно было бы доказать присутствие эфирной связи, и, кроме того, из-за лабильности эфирной связи, образованной остатками аспарагиновой и глутаминовой кислот, трудно получить двухкомпонентный гликопептид, удобный для изучения типа связи углеводного и аминокислотного остатков. [c.142]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология