Молекулярные веса по константам седиментации

С е д и м е н т а ц и о н н ы й м е т о д определения молекулярного веса полимера основан на установлении седимента ционного равновесия в растворах полимера. Раствор полимера фракционируют в ультрацентрифуге и одновременно определяют молекулярный вес каждой фракции полимера, т. е. из каждого слоя раствора после его расслаивания. Для этого определяют скорость седиментации каждой фракции исследуемого полимера (в растворах с известными концентрациями). Измерение скорости седиментации основано на наблюдении за передвижением границы раздела между раствором и растворителем в ячейке центрифуги. По данным наблюдений строят график изменения скорости седиментации при различной концентрации и определяют по этому графику константу седиментации 5 данного полимера при бес конечном разбавлении его раствора. Одновременно определяют константу диффузии полимера при бесконечном разбавлении. Молекулярный вес каждой фракции вычисляют по следующему уравнению [c.80]

Нуклеиновые кислоты в свободном состоянии и в виде соединени с белками так называемых нуклеопротеидов содержатся в клеточных ядрах и цитоплазме. К нуклеопротеидам относятся также многие виды вирусов. Их молекулярные веса, определенные по константам седиментации, очень велики у вирусов растительного происхождения они колеблются между 3 и 40 миллионами. [c.1044]

Рассчитать молекулярный вес полиамида в метаноле, пользуясь экспериментальными данными метода ультрацентрифугирования константа седиментации при бесконечном разбавлении раствора Зд = 1,95, константы К = l,86 10- , 6 = 0,47. [c.79]

Определить величину молекулярного веса полиамида в и-крезоле, используя экспериментальные данные метода ультрацентрифугирования константа седиментации при бесконечном разбавлении раствора 5о = 0,77, константа К =8,7-10-3, 6 = 0,45. [c.79]

Центробежная сила, которая прямо пропорциональна молекулярному весу, уравновешивается силой трения, и определение молекулярного веса сводится к нахождению коэффициента диффузии и константы седиментации в данном растворителе. [c.152]

Различают аналитические и препаративные ультрацентрифуги. Аналитические ультрацентрифуги имеют оптическую систему, которая позволяет регистрировать на фотопленках результаты ультрацентрифугирования. В аналитических ультрацентрифугах производится также определение констант седиментации частиц, что позволяет затем рассчитывать их молекулярные веса. [c.125]

В ряде случаев константа седиментации зависит от концентрации полимера. При этом установлена линейная зависимость между и с. Поэтому перед определением молекулярного веса вещества с помощью ультрацентрифуги находят несколько значений константы седиментации для различных концентраций, строят график в координатах [c.73]

При низких ионных силах РНК-полимераза является димерным ферментом с молекулярным весом, несколько меньшим 10 и константой седиментации 23 5. При ионных силах, больших 0,1 М, фермент обратимо распадается на два мономера 215 2-13 5. Показано, что мономер 13 5 является ферментативно активной формой [35], но относительно димера 21 5 мнения расходятся (см. [14]). [c.565]

РАСЧЕТ КОНСТАНТЫ СЕДИМЕНТАЦИИ И МОЛЕКУЛЯРНОГО ВЕСА [c.141]

Для всех трех случаев разработаны методы расчета констант седиментации, диффузии и молекулярного веса. [c.141]

Сведберг [2] дал формулу, связывающую константу седиментации, коэффициент диффузии и молекулярный вес пр,и постоянной скорости движения границы [c.142]

Такое простое преобразование экспериментальных кривых в кривые распределения по константам седиментации возможно только тогда, когда уширение границы за счет диффузии действительно исчезающе мало, по сравнению с уширением за счет полидисперсности, например для высокомолекулярного полимера с широким распределением. Описанным методом были найдены кривые распределения по константам седиментации и по молекулярным весам для полистирола [12] й для нитроцеллюлозы [13—15]. [c.150]

Он показал, что, если распределение по молекулярным весам внутри фракций гауссово, то распределение по константам седиментации и коэффициентам диффузии в первом и достаточном приближении тоже гауссово. При этом различные средние молекулярные веса этой фракции практически совпадают (с отклонением не больше 10%) между собой и с наиболее вероятным молекулярным весом М Мп М W—M. То же относится и к константам седиментации и коэффициентам диффузии. [c.151]

Для перехода от кривых распределения по константам седиментации к кривым распределения по молекулярным весам нужно экспериментально установить зависимость между 5 и Л1. В описанном выше методе это делается автоматически, так как для каждой фракции в тех же экспериментах находятся 5, В, а следовательно, и М. [c.152]

Мы описали несколько методов нахождения кривых распределения по константам седиментации. Переход к кривым распределения по молекулярным весам f M) требует установления зависимости между константами седиментации и молекулярными весами полимера. Для этого перехода существуют следующие уравнения [c.153]

Манделькерн и Флори [22] показали, что молярный коэффициент трения можно выразить через характеристическую вязкость. Тогда для расчета молекулярного веса достаточно измерить константу седиментации и характеристическую вязкость [c.154]

Так как обычно измеряемые значения констант седиментации и коэффициентов диффузии являются средневесовыми, то среднее значение молекулярного веса, найденное по формуле Сведберга является так называемым двойным средневесовым и обозначается как [c.154]

На основании сказанного можно сделать вывод [28], что при расчете молекулярновесового распределения из распределения по константам седиментации влияние концентрации учитывается автоматически если зависимость константы седиментации от молекулярного веса S = AM - найдена при той же концентрации, при которой получено распределение q(s). [c.156]

Как увидим дальше, для перехода от константы седиментации 5 к молекулярному весу М существуют два метода. Самый простой и безупречный метод заключается в измерении коэффициента диффузии макромолекул в том же растворителе. Согласно одному из общих законов статистической механики — закону Эйнштейна, [c.126]

Рис. 39. Зависимости констант седиментации и диффузии от молекулярного веса (для узких фракций

Флори—Манделькерна [19], позволяющая найти молекулярный вес полимера из константы седиментации и характеристической вязкости полимера. Использование этой формулы облегчает задачу измерения молекулярного веса линейных полимеров, так как избавляет от необходимости измерять диффузию. Точность формулы Флори—Манделькерна достаточно высока. Даже в сравнительно хороших растворителях, когда а=1.5, константа р в уравнении Флори—Манделькерна изменяется всего на 4% по сравнению с 0-растворителем. Поэтому формулой (III-77) широко пользуются для вычисления молекулярных весов полимеров по данным о скоростях [c.156]

В. Константа седиментации, молекулярный вес и конфигурация молекулы [c.51]

В зависимости от способа усреднения 3 и О можно получить много различных средних молекулярных весов для полидисперсных систем [85, 192]. Пока мы рассмотрим только те соотношения, которые связывают константу седиментации с молекулярными параметрами цепных молекул одинакового молекулярного веса [48]. [c.51]

Зависимость константы седиментации от молекулярного веса. В общем случае константа седиментации зависит от молекулярного веса в степени, равной или меньшей /2 [130]. Например, если характеристическая вязкость пропорциональна то константа седиментации при бесконечном разбавлении должна быть пропорциональна Это означает, что константа седиментации даже при бесконечном разбавлении не очень чувствительна к изменению молекулярного веса. До некоторой степени это компенсируется тем, что в полидисперсных системах концентрационная зависимость различных констант седиментации изменяется несколько медленнее, чем общая характеристическая вязкость [190]. Все же было показано, что смесь двух высокомолекулярных фракций полистирола в хороших растворителях разделяется очень слабо [190]. Лучше всего проводить опыты по расширению границы раздела в тета-растворителях [63]. В этом случае 5 должно зависеть от [120] и, кроме того, характеристическая вязкость и концентрационная зависимость 5 минимальны. [c.53]

В свое время многие исследователи для преобразования распределения констант седиментации в распределение по молекулярным весам считали необходимым калибровать 5 по молекулярному весу для ряда фракций. Без этого, по крайней мере в тета-растворителях, можно обойтись, так как при с = О [c.55]

ЭПР-спектр оскопические исследования подтверждают это предположение, демонстрируя, что в присутствии протектора уменьшается или исчезает узкий синглет в сложном ЭПР-спектре облученных белков, — рис. 80 (Свердлов и др., 1971в). Судя по результатам измерений молекулярного веса (константы седиментации) глутаматдегидрогеназы, по характеру элюции этого фермента в смеси с мексамином в процессе хроматографии на колонке и т. д., можно заключить, что протектор обладает способностью связываться с защищаемым белком. Таким образом, кажется возможным [c.182]

Ряд мелких вирусов растений, животных и бактерий содержит одноценочечную РНК с молекулярным весом около 10 РНК другой группы мелких вирусов (пикорнавирусы) имеет молекулярный вес около 2-10 . Несмотря на относительную гомогенность по молекулярному весу, константа седиментации РНК вирусов первой группы варьирует в пределах от 17 до 30S, а у второй группы — от 30 до 36S. Более высокие величины объясняются, по-видимому, более компактной конформацией с относительно малым радиусом инерции (около 20 нм) в 0,1 М солевом растворе. [c.108]

Распределение констант седиментадип для различных фракций полимера можно связать с распределением по молекулярным весам в образце, так как скорость седиментации пропорциональна молекулярному несу полимера. Однако, как и в случае определения осмотического давления, установление скорости седиментации полимеров с длинными гибкими цепями вызывает некоторые. атрудпения. [c.81]

Рассчитать молекулярный вес поликапронамида в гексафторизопропаноле, пользуясь экспериментальными данными метода ультрацентрифугирования константа седиментации при бесконечном разбавлении раствора 5о =0,91, константа К =8,7-10-3, Ь =0,45. [c.79]

Чаще всего молекулярный вес биополимеров определяют по нх константе седиментации s (разд.3.1.д). Значение s зависит не только от молекулярного веса, но и от плотности и формы молекулы. Однако в рамках предположения, что молекулы белка являются сферами, s примерно пропорционально мол. весу в степени 2/3. Графически зависимость logs от log (мол. вес) должна представляться прямой. На рис. 2-38 приведен график такого рода, построенный по данным для целого р да белков. Заметим, что точки, полученные для нуклеиновых кислот (во многих случаях эти молекулы имеют форму палочек, а не сфер), ложатся на другую прямую. Кроме того, константа седимента- [c.181]

В настоящее время имеется ряд новых методов определения молекулярного веса, которые могут соперничать с ультрацентрифугированием. Один из них — это простая гель-фильтрация. Колонку тщательно заполняют гелем (например, сефадексом) и калибруют, пропуская ряд белковых растворов. Измеряют Уе — объем элюата, собранного с момента нанесения вещества на колонку до момента его выхода из колонки, и делят этот объем на Уо — объем элюата для очень крупных частиц, совершенно не проникающих внутрь частиц геля. Далее строят зависимость Уе/Уо ОТ логарифма мол. веса для ряда белков с известным молекулярным весом. Как и при оценке молекулярных весов по константам седиментации, здесь предполагается, что молекулы всех белков имеют примерно сферическую форму для неизвестного белка значение молекулярного веса определяют по местоположению отвечающей ему точки на описанном выше графике [153, 154]. Модификацией этого метода служит хроматография при высоких концентрациях гуанидинхло-рида — соли, вызывающей денатурацию белков. Предполагается, что в таком растворителе белковая молекула представляет собой статистический клубок [154]. [c.182]

Константа седиментации (сведберги) Характеристическая вязкость [т]], см /г Коэффициент поступательной диффузии Парциальный удельный объем, см /г Молекулярный вес Размеры в высушенном состоинии, А Объем, [c.578]

Для того чтобы рассчитать молекулярный вес по формуле (7), кроме константы седиментации, надо знать коэффициент диффузии. Чаще-всего его находят независимым методом, как это было описано в гл. IV. Однако коэффициент диффузии можно найти и из опыта по седиментации [8]. Действительно, оторвавшаяся в ходе седиментации от мениска граница между раствором и растворителем с течением времени размывается за счет диффузии (если растворенное вещество моподисперс-но). Расчет из градиентной кривой одновременно константы седиментации и коэффициента диффузии связан с решением чрезвычайно сложного уравнения, описывающего зависи.мость градиента концентрации вдоль кюветы от диффузии и седиментации исследуемого (монодисперсного) вещества (2]. При известных допущениях, а именно — если растворенные молекулы не очгнь малы, а продолжительность эксперимента не очень велика,— уравнение упрощается и принимает следующий вид, [7] [c.143]

Как показывают эти наблюдения, само уменьшение вязкости еще не является доказательством, что разрывы цепочки полимера являются основной реакцией эту точку зрения мы настойчиво подчеркивали выше. Однако имеются и другие доказательства, подтверждающие, что действие Ионизирующего излучения на нуклеиновые кислоты вызывает их деградацию. Спарроу и Розенфельд [127] показали, что рентгеновские лучи снижают двойное лучепреломление в потоке дезоксирибонуклеогистоиа зобной железы и свободной дезоксирибонуклеиновой кислоты. Измерения констант седиментации и диффузии облученных нуклеиновых кислот [124, 129, 139] также показали, что происходит деградация, при которой образуются недиализуемые с )раг-менты [144], молекулярный вес которых колеблется в широки.х пределах. [c.257]

Единственный способ найти эту связь — приготовить узкие фракции полимера, установить для них константы седиментации и молекулярные веса, для чего, кроме седиментации, необходимо измерить для каждой фракции диффузию или характеристическую вязкость либо применить осмотический или нефелометриче-ский метод определения молекулярного веса. Только после того как будет проделана такая большая предварительная работа для данной комбинации полимер—растворитель, можно будет перестроить распределение ф (я) в искомое распределение (М). После проделанной работы с помош ью ультрацентрифуги можно получить дифференциальное молекулярновесовое распределение любого образца полимера путем одного опыта — центрифугирования нефракционированного полимера. Искомая функция распределения по молекулярным весам [c.135]

Молекулярные веса всех синтетических полимеров составляют непрерывный набор, распределяющийся вокруг некоторого наиболее вероятного значения. Следовательно, нефракционироваиный образец полимера будет иметь непрерывное распределение констант седиментации низкомолекулярная часть вещества не будет двигаться с той же скоростью, что и высокомолекулярная. В принципе это обстоятельство можно использовать и по расширению границы раздела между растворителем и раствором во времени [c.52]

Сигнер и Эгли [191 ] измерили константы седиментации в умеренно концентрированных растворах полистирола в хлороформе и метилцеллюлозы в воде. Эти авторы нашли, что при концентрации полимера не меньше 1 г на 100 мл скорость седиментации уже не зависит от молекулярного веса. Такое поведение концентрированных растворов они объяснили образованием сплошной сетки из переплетенных между собой цепных молекул. В этом случае седиментацию можно представить себе как движение растворителя через отверстия сетки по мере ее опускания к дну ячейки. Движение жидкости через пористую среду можно описать с помощью константы проницаемости X ( константа Дарси ), вводимой уравнением [c.56]

Эмерслебен [56] рассмотрел некоторые аспекты течения жидкостей, связанные со скоростью седиментации в концентрированных растворах полимеров. Кленин, Бенуа и Дон [118] показали, что константа седиментации в концентрированных растворах полимеров может зависеть от угловой скорости, даже если предполагается, что поправка на давление уже сделана. Для полимеров с очень высоким молекулярным весом такая зависимость [c.56]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология