Окрашивание бактерий

Ганс Грам, датский врач, разработал (1884) метод окрашивания бактерий основным трифенилметановым красителем — генциановым фиолетовым и иодом. Клетки, остающиеся окра шенными после промывания спиртом или ацетоном, считаются грамположительными, а обесцвечивающиеся — грамотрицательными. [c.609]

Опыт 12.2. Окрашивание бактерий для изучения их с помощью светового микроскопа [c.59]

Окрашивание бактерий. При окрашивании очень легко запачкать поверхность стола, поэтому процедуру лучше проводить на штативе, размещенном над кюветой или кристаллизатором. Штатив можно сделать из двух стеклянных или металлических палочек, положив их строго горизонтально на края кюветы или кристаллизатора на расстоянии 5 см друг от друга. Закрепите палочки пластилином. Залейте стекло раствором кристаллического фиолетового и оставьте на 30 с. Все бактерии окрасятся в фиолетовый цвет. [c.60]

Поразительным фактом оказывается то, что в концентрированных золях кремнезема часто вырастают микроорганизмы. Они могут появляться в виде плавающих вязких масс, взвешенных в суспензии частиц зеленого, желтого, красного или коричневого цвета или в виде беловатых волокнистых агрегатов. Присутствие бактерий часто обнаруживается по запаху сероводорода и темному окрашиванию вследствие осаждения следов тяжелых металлов. Могут появляться и морские водоросли в виде зеленых волокнистых масс или коричневатых хлопьев. [c.466]

Тест на наличие нитритов. К суточной исследуемой культуре бактерий на среде № 7 приливают 0,2—0,3 мл реактива Грисса. погружая пипетку до дна пробирки. Появление красного окрашивания свидетельствует о наличии нитритов. [c.199]

В объеме этой главы невозможно описать все пути использования метиленового голубого для биологических и физиологических целей. Он несомненно является одним из самых важных биологических красителей. Его основной характер, а также легкость, с которой его можно применять, не боясь, что он окрасит все подряд, делает его ценным красителем для дифференциации клеточных ядер. Особенно эффективен он для окрашивания клеток дифтерийных бактерий. Он применяется для витального окрашивания нервной ткани, для которого был предложен новый способ, состоящий в продолжительной внутривенной перфузии его [418]. Он используется как индикатор окисления—восстановления в анализе молока [419], [c.584]

В клетках можно заметить овальные тельца, сильнее преломляющие свет. Это споры. В тех местах клетки, где содержится гранулеза, возникает синее окрашивание. Зарисовывают только окрашенные клетки, явно относящиеся к группе маслянокислых бактерий. Особенно хороший материал для микроскопических наблюдений получается при постановке опыта на картофеле. [c.99]

Прямой метод подсчета бактерий в почве стал возможным после того, как Конн предложил применять для окрашивания почвенной суспензии кислые красители, хорошо прокрашивающие клетки микроорганизмов и слабо — почвенные частицы. [c.160]

Описаны метанобразующие архебактерии с очень толстой (до 500 нм) аморфной клеточной стенкой, дающей положительную реакцию по Граму, построенной исключительно из кислого гетерополисахарида, в составе которого обнаружены галактозамин, нейтральные сахара и уроновые кислоты. Наличие у этих бактерий положительного окрашивания по Граму может служить указанием на то, что оно определяется не химическим составом клеточной стенки, а ее строением. [c.410]

То же должны отсутствовать вещества, вызывающие брожение в диффузорах количестве солей — минимальное То же отсутствие гипса, препятствующего брожению солода Тоже не должна содержать хлоридов кальция и магния, ухудшающих брожение дрожжей То же не должна содержать органических веществ, сообщающих бурую окраску продукту при сушке недопустимо также наличие грибков и железа, обусловливающего желтое окрашивание крахмала То же небольшие количества хлоридов и органических веществ, отсутствие железа, марганца, кремнезема То же окисляемость ие выше 2 мг/л, жесткость не более 0,2—0,7 мг экв/л, содержание железа и марганца пе выше 0,03 мг/л То же должна быть мягкой, не содержать даже следов железа и окрашенных веществ Вода должна быть мягкой, не содержащей гнилостных бактерий и грибков, уменьшающих прочность кожи [c.203]

Форма клеток (круглая, короткая или длинная, прямая или изогнутая палочка, короткие или длинные нити, вибрион, спириллы, спирохета) 2) характер взаимного расположения клеток (одиночные клетки, соединенные попарно, цепочки, тетрады, сарцины) размеры клеток (диаметр у кокков, длина и толщина у других форм — в микронах) форма конца клеток (закругленная, срезанная под прямым углом, вогнутая, заостренная капсула (имеется, размер, отсутствует) движение бактерий и расположение жгутиков (полярное, биполярное, по всей поверхности. Полярные жгутики одинарные или в виде пучков) образование зооглеи инволюционные формы (наличие и их форма веретенообразные, клинообразные, нитевидные, ветвистые или другие) наличие спор, их форма (круглая, эллипсовидная, веретенообразная, продолговатая), размеры (средняя величина, диаметр равен диаметру клетки или больще), расположение (центральное, полярное) тип прорастания (экваториальное, косое, полярное), оболочка (толстая, тонкая) окрашивание по Граму (положительное, отрицательное). [c.66]

При окрашивании жгутиков большое внимание необходимо обращать на чистоту стекла и способ нанесения препарата. Стекло рекомендуется промывать хромовой смесью, а потом дистиллированной водой. Перед приготовлением мазка сухое стекло следует погрузить в спирт, а затем провести через пламя горелки той стороной, на которую будет нанесен мазок. Наносить мазок следует на охлажденное стекло. Материал лучше брать с агаровой культуры возрастом 15—18 ч. Разведение исследуемого материала производят в небольших пробирках. Осторожно захватывая петлей (не обжигая ее), берут небольшое количество бактерий и опускают в пробирку с 5—6 мл стерильной водопроводной воды той же температуры, при которой выращивался микроб. Взбалтывать не следует, бактерии сами переходят в воду. [c.73]

Сравнительная оценка модификации с применением фазово-контрастной микроскопии и метода А. С. Разумова при определении общего числа микроорганизмов в одних и тех же пробах воды Горьковского водохранилища показала довольно близкие результаты. Однако общее число бактерий, определяемое методом фазовоконтрастной микроскопии, выше (в среднем на 15%), чем полученное прямым счетом с окрашиванием. [c.85]

Модификация Е. Ю. Зуйковой (1959). Методика комбинированной окраски первым способом заключается в окрашивании бактерий на фильтре 3% карболовым эритрозином в течение 1 ч (при необходимости быстрого ответа — 5 мин), отмывании, подсушивании фильтра и докрашивании одним из следующих способов а) свежеприготовленным профильтрованным фуксином Пфейфера, наносимым на 20 с на поверхность фильтра, с последующим смыванием путем погружения в воду (при этом палочковидные формы окрашиваются интенсивнее кокковых) б) 1% спиртовым раствором бриллиантового зеленого, который перед употреблением разводят 1 1 дистиллированной водой, путем помещения фильтра на П/г мин на смоченную красителем фильтровальную бумагу с последующим перекладыванием на влажной фильтровальной бумаге для отмывания. Этим способом сильнее прокрашиваются клетки стафилококка. [c.83]

Модификация Эрлиха (Ehrli h, 1956). С целью повышения контрастности между бактериями и фильтром последний окрашивают перед фильтряпирй, погружая на 5—10 с в раствор фуксина (0,3 мл насыщенного раствора в 10 мл дистиллированной воды). После фиксации в 95% спирте фильтр отмывают в дистиллированной воде в течение 10—15 мин. Окрашивание бактерий производят 0,01 % раствором предварительно профильтрованного метиленового синего (pH 10), накапывая краску на фильтр на 2—5 мин непосредственно на столике фильтровального аппарата. Краску фильтруют, мембранный фильтр подсушивают 10 мин при 60—70°С. [c.84]

Применение. В микроскопии для цитологических, энтомологических и гистологических исследований и в качестве витального красителя. Как составная часть реактива Нейссера для окрашивания бактерий. В флуоресцентной микроскопии как дополнительный краситель, В аналитической химии в качестве кис-< лотно-основного индикатора. [c.435]

Рис. 2.8. Строение клеточной стенки грамположительных (слева) и грамотрицательных (справа) бактерий. При окрашивании бактерий по Грому на этапе обесцвечивания у грамотрицательных бактерий краситель легко вымы -вается из тонкого слоя муреина.

Одним из методов окрашивания, который важен для идентификации бактерий, является окрашивание по Граму. До окрашивания бактерии бесцветны. После окрашивания грамположительные бакгерии становятся фиолетовыми, а грамотрицательные — красными. Различие между двумя типами бактерий описано в разд. 2.3.1 (клеточная стенка). [c.59]

Заметим, что во многих случаях микроскопическое исследование сделанных прозрачными мембран будет эффективным, если только частицы для увеличения контрастности были окрашены. Для каждого сорта исследуемых частиц окрашивание проводится по-разному. В разд. 8.4 мы рассмотрим, как производится окрашивание бактерий. Использование здесь фазовой микроскопии неокрашенных частиц оказывается неэффективным даже если мембрана сделана прозрачной, ее матрица все же различима и существенно ухудшает изображение [19]. Для того чтобы можно было исследовать частицы с помощью фазово-контрастной микроскопии, мембрану необходимо растворить. Для этого было рекомендовано несколько растворителей, которые использовали Снеллен и др. [200] для изучения В(1е11оь1Ьгю, очень маленькой бактерии. Эти растворители предназначены для мембран из смешанных эфиров целлюлозы, производимых фирмой Миллипор , и также, надо полагать, для любых мембран из ацетил- или нитроцеллюлозы. Один такой растворитель представляет собой неполярную смесь, со стоящую из равных объемов диоксана, 1,2-дихлорэтана и ге-ксана с добавкой примерно 1 мл воды на 100 мл смеси. Растворение в этой смеси проводят при комнатной температуре, причем мембрана должна быть предварительно высушена. Другим эффективным растворителем является полярная смесь, состоящая из равных объемов полиэтиленгликоля-400 и изопро-панола. Перед употреблением этот растворитель должен быть [c.207]

Иногда в нефтяных водах наблюдается более или менее определенно выраженное окрашивание. Так, на промысле им. Орджоникидзе в Баку буровые воды надкирмакинской свиты на западном крыле складки окрашены в специфически розовый цвет. По В. Т. Малышеку, такая окраска обусловлер а присутствием аэробных пурпурных бактерий. [c.110]

При исследовании неизвестных бактерий используется дифференциальный метод окраски по Граму, заключающийся в окраске микроорганизмов метиловым фиолетовым с последующей обработкой иодом. Окрашенные таким образом бактерии, необесцвечивающиеся спиртом, называют грамположительными, а бактерии, обесцвечивающиеся под действием спирта, называют грамотрицательными. Способность окрашивания по Граму зависит от свойств клеточной оболочки и цитоплазматической мембраны. Краситель и иод проникают во внутрь всех клеток, но у грамположительных образуется более устойчивое окрашенное соединение, чем у грамотрицательных. Установлен ряд существенных различий между свойствами этих микроорганизмов. (Например, отношение РНК/ДНК у грамположительных 8 1, а у отрицательных 1 1 содержание жиров у первых низкое, а у вторых — высокое.) Кроме окраски изучают морфологические, биохимические и другие свойства иеиэвестных микроорганизмов, [c.287]

Тест на наличие цитохромоксидазы. Полоску фильтровальной бумаги смачивают реактивом и наносят платиновой петлей или стеклянной палочкой суточную чистую культуру исследуемых бактерий со скошенной среды № 1. Синее окрашивание, появляющееся через 2—5 мин, свидетельствует о положительной окси-дазной реакции. [c.199]

Диамино-3,7-диметилакридин продается обычно в виде формиата, так как солянокислая соль плохо растворима.. Он больше известен под названием акридиновый желтый и применяется как краситель основного характера и техническое дезинфицирующее средство против бактерий, вызывающих коррозию железа. Разбавленные растворы имеют интенсивную зеленую флуоресценцию и с азотистой кислотой дают пурпурное окрашивание. [c.399]

Этот способ был впервые предложен в 1884 г. датским ученым X. Грамом ( h. Gram), занимавшимся окрашиванием тканей. Позднее он был использован для бактерий. [c.28]

В девятом издании Определителя бактерий Берги все обнаруженные организмы, отнесенные в царство Prokaryotae, разделены на 33 группы. Признаки, по которым осуществляется разделение на группы, как правило, относятся к категории легко определяемых и вынесены в названия групп, например грамотрицательные аэробные палочки и кокки (группа 4), анаэробные грамотрицательные кокки (группа 8), грамположительные палочки и кокки, образующие эндоспоры (группа 13), скользящие бактерии, образующие плодовые тела (группа 24). Основная идея классификации по Берги — легкость идентификации бактерий. Для осуществления этого используют совокупность признаков морфологических (форма тела наличие или отсутствие жгутиков капсулы способность к спорообразованию особенности внутриклеточного строения окрашивание по Граму), культуральных (признаки, выявляемые при культивировании в лаборатории чистой культуры), физиолого-биохимических (способы получения энергии потребности в питательных веществах отношение к факторам внешней среды нуклеотидный состав и последовательность нуклеотидов в молекуле ДНК наличие и характер минорных оснований в ДНК нуклеотидный состав рибосомальной РНК последовательность аминокислот в ферментных белках с аналогичными функциями). [c.158]

Окрашивание по Граму в модификации Аткинса К. N. Atkins, 1920). Обычно используют для улучшения окраски грамположительных бактерий, состав красителей несколько отличается. [c.18]

Дифференциально-диагиистические среды позволяют различать бактерии по их росту, биохимической активности и другим признакам. В состав этих сред, кроме питательных веществ, обычно включают субстрат, по отношению к которому дифференцируются бактерии, и индикатор. В результате культивирования микробы, ферментирующие субстрат, способствуют накоплению продуктов расщепления, сдвигу pH, редокс-потенциала среды, что сопровождается окрашиванием среды и собственных колоний в цвет индикатора (см. цв. вклейку, рис. 7). [c.28]

Среды разливают тонким слоем в простерилизованные заранее сухим жаром колбы. Как нефть, так и ее продукты должны быть заранее простерили-зованы. Нефть вводится в таком количестве, чтобы она образовывала тонкий, равномерный слой (не более 1 мм толщины) на поверхности минерального раствора. Посевы выдерживают в термостате при 20—25° С. Развитие бактерий может быть отмечено уже через несколько дней. Сперва наблюдается помутнение жидкости и слабое желтоватое окрашивание, затем на границе раздела минерального раствора и нефти появляется бактериальная пленка. Процесс полного окисления нефти может продолжаться до 2 месяцев. [c.91]

Метод Разумова. Принципиально новый подход, предложенный А. С. Разумовым (1932),— концентрирование, окрашивание и подсчет микроорганизмов непосредственно на мембранном фильтре — исключил все названные недостатки ранее предложенных методов. Метод А. С. Разумова нашел признание как в иашей стране, так п за рубежом и до настоящего времени широко используется для определения общего числа микроорганизмов в воде водоемов. Метод называют также прямым , или методом прямого микроскопического счета бактерий . [c.79]

Модификация метода прямого подсчета с применением фазово-контрастной микроскопии. А. Г. Кокина (1956), А. С. Разумов, Л. Е, Корш (I962), Ri hards, КгаЬек (1954) использовали фазово-контрастную микроскопию для подсчета общего числа бактерий, предварительно сконцентрированных на мембранном фильтре. После высушивания мембранного фильтра (без окрашивания) готовят препарат и просчитывают бактерии под микроскопом с помощью фазово-контрастного устройства. При подсчете бактерий используют зеленый светофильтр, благодаря которому получается поле зрения спокойного зеленого цвета. Бактерии на зеленом поле выглядят довольно контрастно, как черные точки или палочки различных размеров. [c.85]

После окрашивания мазок промывают в дистиллированной воде pH 7,2 и подсушивают на воздухе в течение 5—10 мин с последующим дополнительным окрашиванием 0,25% водным раствором светлого зеленого, подкисленным ледяной уксусной кислотой (на 100 мл светлого зеленого 1 мл ледяной уксусной кислоты). Две капли подкисленного раствора светлого зеленого капельницей наносят на мазки, одновременно добавляя по капле 70% уксусной кислоты. Окраска длится от 20 с до 1 мии, пос-.ттр оргп ПСТЯТК1 краски осторожио удаляют фильтровальной бумагой. Слегка подсушив на воздухе, мазок микро-скопируют. Живые клетки бактерий окрашиваются в си-не-фиолетовый цвет, а мертвые клетки, не имеющие ядерного вещества, приобретают ярко-зеленую окраску. [c.112]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология