Измерение роста бактерий

Измерение роста бактерий и грибов в культуре [c.53]

Уайт [54] разработал прибор для измерения угловой зависимости сигнала светорассеяния при температурах от 30 до 150°С. В этом интервале различные организмы, различные воздействия на культуру, а также культуры в различных стадиях развития характеризуются своими особенностями. Этот метод можно использовать для диагностики и для изучения действия лекарственных препаратов. Как уже упоминалось выше, светорассеяние при больших углах малопригодно для измерения роста бактерий, поскольку оно чувствительно к деталям структур клеток. [c.490]

Скорость роста бактерий. Показателем окисления углеводорода или битума микроорганизмами является рост культуры бактерий на материале, который служит единственным источником углерода. Это обоснованный показатель, так как рост может происходить только тогда, когда микроорганизм окисляет подложку. С ростом микроорганизмов их количество возрастает и среда мутнеет. Можно легко наблюдать за ростом организмов путем их подсчета через различные промежутки времени или путем. измерения помутнения (рис. 5.1 и 5.2). Подсчет или измерение помутнения не дает достаточной информации о том, какие биохимические процессы протекают в данной среде. Следует также учесть неизбежные ошибки при подсчете бактерий. Организмы могут быть извлечены из среды после завершения роста или на различных его стадиях, а среду подвергают анализу для определения промежуточных и конечных продуктов процесса микробиологического распада. [c.180]

Сравнение вычисленных и измеренных величин А для анаэробного гетеротрофного роста бактерий [c.104]

В биохимической практике для анализа витаминов широко используются биологические методы анализа, основанные на определении того минимального количества витамина, которое при добавлении к искусственной диете, лишенной только исследуемого витамина, предохраняет животное от развития гиповитаминоза. Данное минимальное количество витамина принимается за единицу. Кроме того, широкое распространение получили также микробиологические методы анализа, основанные на измерении скорости роста бактерий, которая пропорциональна концентрации витамина в исследуемом материале. [c.170]

В 1 °С не столь уж редки. Для точного температурного контроля пользуются перемешиванием воды в банях в этом случае температурные колебания составляют сотые доли градуса. Для точного измерения влияния температуры на скорость роста бактерий необходима инкубация в таких банях. [c.177]

Культивирование бактерий представляет собой процесс увеличения концентрации некоторых или всех компонентов популяции. Обычно характеристики этого процесса устанавливаются путем измерений тех или иных его показателей. Чаще всего измеряют увеличение числа клеток или клеточной массы (биомассы). Реже рост оценивают по синтезу макромолекул, когда увеличение количества белка, рибонуклеиновых кислот, липидов или других макромолекул отражает увеличение биомассы и числа клеток (сбалансированный рост). Однако один или несколько из этих показателей могут не зависеть от других (несбалансированный рост). Например, на ранней и поздней стадиях роста периодической культуры увеличение биомассы непропорционально числу клеток. В гл. И обсуждаются основные аспекты роста бактерий, методы его измерения и допущения, необходимые при использовании каждого метода. [c.374]

Существуют четыре вида источников ошибок. Первый и наиболее опасный из них заключается в том, что бактерии, которые обычно делятся регулярно, в условиях слабой токсичности способны расти с образованием скоплений и нитей. Второй опасный момент связан с различной степенью жизнеспособности поврежденных бактерий при различных условиях культивирования. Восстановлению жизнеспособности бактерий способствуют процессы репарации, но они протекают лишь в определенных условиях [8]. Третий источник ошибок связан с возможным образованием резистентных форм. Учет бактерий, способных к образованию спор, не составляет проблемы, поскольку известны методы контроля и измерения, позволяющие вносить соответствующие поправки. В том случае, когда споры в растущих спорообразующих культурах не появляются, возможны ошибки при измерении роста. Четвертый источник ошибок имеет отношение к процедурам, с помощью которых [c.446]

К сожалению, недостаточная очистка электродов и их хранение в воде приводят к загрязнению стеклянной поверхности. Липиды и белки, прилипшие к стеклу, обусловливают нелинейные показания электрода и замедленную ответную реакцию прибора. Кроме того, на электроде может происходить рост бактерий, что также вызывает загрязнение стеклянной поверхности электрода и закупорку асбестовых волокон, служащих солевым мостиком между стандартным электродом и измеряемым раствором. В каломельном электроде следует поддерживать достаточно высокий уровень раствора КС1 во время измерений пробку необходимо убирать, для того чтобы раствор КС1, вытекающий через асбестовое волокно, предотвращал его загрязнение примесями. [c.184]

Пример 9.1. Анаэробный контактный реактор со взвешенным илом должен обрабатывать стоки сахарной фабрики. Измерения показали, что скорость роста метаногенных бактерий при 30° С с учетом распада равна 0,05 сут . Каким должен быть возраст ила [c.354]

Микробиологические методы (для определения аминокислот, ферментов, витаминов).,Для жизнедеятельности, роста и размножения микроорганизмов необходима среда определенного химического состава. Если исключить из питательной среды хотя бы один компонент или, напротив, ввести дополнительно некоторое вещество, то микроорганизмы через некоторое время подают соответствующий сигнал. Между интенсивностью ответного сигнала и количеством введенного или исключенного вещества наблюдается определенная зависимость. Микробиологический метод основан на измерении интенсивности развития микроорганизмов в зависимости от количества определяемой аминокислоты (фермента, витамина). Все остальные вещества, необходимые для развития (роста) микроорганизмов, вводят в достаточном количестве в состав синтетической питательной среды. Последняя содержит также углевод (например, глюкозу), из которого молочнокислые бактерии образуют молочную кислоту [259—261]. [c.104]

Зависимость роста и размножения микроорганизмов от температуры определяют путем измерения прироста биомассы в культуре за определенный промежуток времени. В отдельных случаях отмечают продолжительность времени, необходимого для достижения той или иной стадии или фазы развития (спорообразование, время прорастания спор, продолжительность генерации у бактерий и т. п.). [c.26]

Из уравнения (П.4) следует, что если построить график зависимости Ig// от t, то получится прямая с наклоном 0,301/7, пересечение которой с осью ординат при t — Q даст Ig/v o. На фиг. 26 приведены два таких графика, описывающих рост двух культур Е. соН. Одна из этих культур растет в солевой среде с глюкозой, состав которой приведен в табл. 1, а другая — в среде, содержащей питательный бульон. Измерение наклонов прямолинейных участков этих двух кривых показывает, что в солевой среде с глюкозой Г = 50 мин, тогда как в питательном бульоне Т = = 20 мин. Следовательно, в мясном бульоне бактерии растут в два с лишним раза быстрее, чем в синтетической среде. При такой скорости роста экспериментатор легко может получить 6 генераций за два часа, тогда как для получения стольких же поколений у человека требуется 120 лет. [c.55]

Ростом обычно называют постепенное увеличение всех биохимических компонентов индивидуума. Для бактерий наиболее характерным результатом роста является увеличение числа клеток, т. е. их размножение. В гл. 11 описаны различные методы измерения количества клеток и математические приемы, используемые при учете и статистической обработке результатов. [c.164]

В настоящее время удельную скорость роста можно измерить в пределах одного эксперимента с точностью, превышающей точность ее измерений в различных экспериментах или в различные дни. Пока неизвестны источники, вызывающие вариации удельной скорости роста, и они представляют собой важное поле исследований в будущем. Эти изменения удельной скорости от эксперимента к эксперименту следует иметь в виду для практических целей при измерении скорости роста и использовании ее для изучения биологии бактерий. [c.507]

При турбидиметрических измерениях роста бактерий пробирки с культурой инкубируют в течение 20 ч при 37°С. За ростом клеток следя фотометрически при длине волны >600 нм, где снижена до минимума интерференция, вызываемая окраской среды (можно использовать, например, колориметр Baus h and Lomb, модель 20). При использовании образцов объемом 2 мл время инкубации удлиняется до 72 ч, а рост культуры измеряют с помощью титрования образуемой кислоты 0,2 н. NaOH. [c.267]

Биологические методы основаны на определении того минимального количества витамина, которое при добавлении к искусственной диете, лишенной только данного изучаемого витамина, предохраняет животное от развития авитаминоза или излечивает его от уже развившейся болезни. Это колггаество витамина условно принимают за единицу (в литературе известны голубиные , крысиные единицы). Большое место в количественном определении ряда витаминов фолиевой, парааминобензойной кислот и др.-в биологических жвдкостях, в частности в крови, занимают микробиологические методы, основанные на измерении скорости роста бактерий последняя пропорциональна концентрации витамина в исследуемом объекте. Количество витаминов принято выражать, кроме того, в миллиграммах, микрограммах, международных единицах (МБ, или Ш). [c.208]

Сравнение вычисленных величин А и измеренных для аэробного гетеротррфного роста бактерий (28] [c.103]

Микробиологические методы. Для определения витаминов Ве, В12, фолацина, пантотеновой кислоты и биотина в пищевых продуктах используют в основном микробиологические методы анализа, основанные на измерении роста чувствительного к исследуемому витамину микроорганизма при выращивании его на полноценной во всех отнощениях питательной среде, за исключением определяемого витамина. Интенсивность роста микроорганизма в этих условиях зависит в известных пределах от количества добавленного в среду витамина в виде его стандартного раствора или содержащегося в испытуемом гидролизате. Содержание определяемого витамина в исходном материале находят путем сопоставления результатов ответной ростовой реакции тест-организма в стандартной и опытной серии проб. В качестве тест-организмов могут быть использованы бактерии, дрожжи, плесневые грибы и реже простейшие, культивируемые в условиях, близких к оптимальным. [c.205]

Для роста некоторых штаммов бактерий существенно присутствие определенных аминокислот. Один из предложенных методов определения оптической чистоты [619, 2049] основан на количественном измерении роста штаммов La toba illus [2052]. [c.402]

Измерение роста. Метод, применяемый для определения роста, зависит от выбора микроорганизма. Для молочнокислых бактерий обычно применяют два метода. Один основан на сравнении числа имеющихся клеток прп помощи количественного определения мутности соответствующим прибором, например фотоэлектрическим колориметром. При применении этого метода надо удостовериться в том, что микроорганизмы равномерно суспендированы перед измерением и что нет пузырьков воздуха. Измерения должны производиться при длине волны, которая позволяла бы устранить помехи от других окрашенных веществ, внесенных с образцом. Применяемые образцы должны быть оптически прозрачными и в течение инкубации не должна развиваться мутность, не обусловленная клетками. Некоторые организмы (например, L. delbrue kii) образуют при росте комки, и их трудно равномерно суспендировать для измерения мутности. Второй метод, применяемый для определения роста, состоит в титровании кислоты, получающейся в качестве побочного продукта при росте. Скорости роста и образования кислоты не имеют точно параллельного хода. Вообще, рост (измеренный по мутности) будет дос гнгать максимума значительно раньше. [c.182]

Микоплазмы, вероятно, представляют собой самые маленькие бактерии, которые можно наблюдать в световой микроскоп и которые с трудом поддаются индивидуальному распознаванию из-за сильно выраженного плеоморфизма. Характерные колонии микоплазм, имеющие вид яичницы-глазуньи, наблюдают при прямой микроскопии чашек с агаром. Для анализа колоний полезен подход, разработанный Динесом и заключающийся в том, что препараты смотрят после того, как на место роста бактерий наносят каплю метиленового синего и накрывают ее покровным стеклом. В случае объектов, близких по размерам к пределам разрешения, оптические измерения при фазово-контрастной микроскопии затруднены по двум причинам. Первая — это ореольные артефакты и вторая — присущие фазовому контрасту особенности формирования изображения, благодаря которым круглые объекты выглядят меньше, чем они есть на самом деле. В морфологических исследованиях и при изучении подвижности микоплазм применяются влажные препараты. Что же касается типа микроскопирования, то рекомендуются методы фазового контраста и темнопольного освещения. Если нужны окрашенные препараты микоплазм, то предпочтительнее использовать несколько модифицированную методику окраски по Гь м-зе (см. ниже), которую следует применять к предварительно фиксированным организмам. Фиксировать микоплазмы лучше раствором Боуэна (разд. 2.2.1) непосредственно в слое агара, лежащем на покровном стекле. [c.84]

Измерение роста микроорганизмов в естественных условиях связано с большими трудностями [9]. Как правило, в природных условиях встречаются смешанные культуры, в которых бактерии прикрепляются друг к другу, к частичкам почвы и листьям. В этих случаях рост измеряют четырьмя основными методами. Первый из них заключается в определении фиксации С-двуоки-си углерода растущей биомассой [53]. Второй предус- [c.449]

Пыльца растений. Для калибровки приборов может быть использована пыльца многих растений (табл. 22). Особенности применения пыльцы сводятся к следующему. Ввиду плохой суспендируемости пыльца перед разведением в электролите долнша быть смочена спиртом. Для предотвращения роста в растворе бактерий и грибков в суспензию пыльцы необходимо добавлять консервирующие вещества (например, формалин или тимол), а во избежание склеивания частиц — поверхностно-активные вещества. При помещении в жидкость частицы пыльцы часто разбухают или сморщиваются. Поэтому определение их размеров рекомендуется производить в том же электролите, в котором взвешены исследуемые частицы. Пыльца многих растений оказывает аллергенное действие на человека, поэтому следует остерегаться ее попадания в дыхательные пути. Вследствие шероховатой поверхности и некоторой несферичности зерен пыльцы точность измерения диаметра обычно не превышает 10% [509]. [c.146]

Наиболее уязвимым местом культивирования в турбидостате является точность регулирования биомассы. Больщинство старых методов регулирования плотности популяции основано на оптическом измерении (в рассеянном или проходящем свете) с помощью фотоэлектрического датчика. Недостатком этих методов являются помехи, вызываемые пеной и пузырьками, которые образуются при аэрации, а также ростом клеток на стенках ферментера и, что более важно, на оптическом измерительном устройстве. Если от помех, вызываемых пузырьками, можно избавиться, используя внещнюю проточную кювету, то пена создает серьезные проблемы. Зарастание бактериями оптических поверхностей можно частично преодолеть их протиранием, однако это малоэффективный прием. Возлагаются надежды на новые методы волоконной оптики, однако они еще не апробированы. [c.410]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология