Анионообменник в хроматографии

Сопоставляя условия хроматографии на этих двух этапах, можно заключить, что фактор инициации обладает большим сродством к катионообменнику, чем к анионообменнику, но нри pH 7,3—7,5 амфотерные свойства этого белка, по-видимому, выражены достаточно хорошо, чтобы обеспечить возможность хроматографии на [c.306]

В ион-парной хроматографии используют (см. разд. 8.7.1) щеточные сорбенты — силикагели с привитыми обращенными фазами 3, С , С, . Эта фаза легко превращается в катионо- или анионообменник при поглощении из подвижной фазы ионогенных поверхностно-активных веществ, например алкилсульфатов или Солей четвертичных аммониевых оснований. [c.317]

Ионообменная хроматография на анионообменнике Дауэкс-1 (С1 ) [c.143]

Ионообменная хроматография. Ионообменные смолы являются полимерными органическими соединениями, содержащими функциональные группы, способные вовлекаться в ионный обмен. Различают положительно заряженные анионообменники, представленные органическими основаниями и аминами, и отрицательно заряженные катионообменники, содержащие фенольные, сульфо- или карбоксильные группы. Из сильно- и слабоосновных анионообменников чаще используют производные полистирола и целлюлозы, несущие функциональные группы [c.29]

Выпускаемые промышленностью среднекислотные катионообменники и слабоосновные анионообменники практически нерастворимы в воде, но растворяются в соответствующих углеводородах. Эти ионообменники можно использовать в виде жидкостей (подобно жидкостной экстракции) или в виде жидкой фазы, нанесенной на соответствующий инертный носитель (экстракционная хроматография). Жидкие ионообменники обычно применяют в виде приблизительно 5%-ных растворов в подходящих углеводородах регенерация жидких ионообменников аналогична регенерации твердых смол. [c.38]

В классической ионообменной хроматографии разделение происходит за счет ионного обмена. ИХ применяется для разделения как неорганических, так и органических анионов и катионов (см. табл. 4.1.66). Разделение анионов в основном проводят на анионообменниках полимерной основы с четвертичными аммонийными группами. Катионы разделяются на катионообменниках с сульфогруппами. [c.326]

Отметим, что анионообменники с ионогеннымн группами двух последних типов разработаны для специальных целей. Так, радикалы PEI предназначены для связывания полианионов регулярного цепочечного строения, например олигонуклеотидов, а РАБ — для ковалентного присоединения белков и НК с помощью реакции диазотирования (для аффинной хроматографии). [c.252]

Пример 4. Очистка РПКазы D из Е. oli [ udny et al., 1981]. Здесь хроматографию на слабых анионообменниках использовали на двух первых этапах очистки. Интересно сопоставить их между собой. Освобожденный центрифугированием от рибосом гомогенат 300 г бактерии вносили на колонку DEAE-целлюлозы (8 X 25 см), уравновешенную 0,06 М раствором КС1 в 0,02 М Трис-НС1 (pH 7,5) с обычными для хроматографии белков защитными добавками (5 мМ [c.303]

На первый взгляд условия элюции с обменников обоих типов очень похожи, хотя сродство белка к анионообменннкам, по-видимому, несколько больше, чем к фосфоцеллюлозе. Однако более внимательное рассмотрение условий хроматографии обнаруживает еще одно (в данном случае — важное) отличие. В состав обычных стабилизирующих добавок для обоих анионообменников входили, помимо глицерина, 5 мМ Mg la, 10 мМ -меркаптоэтанола, 1 мМ [c.307]

В этой области хроматографии делаются только первые шаги, В 1980 г. были опубликованы результаты модельньсх экспериментов по отработке условий ионообменной ЖХВД белков на крупнопористом продажном анионообменнике на основе силикагеля Syn hropak АХ-300 . На колонку размером 0,41 X 25 см вносили по [c.313]

Значительные молекулярные размеры и многочисленные отрп-цательио заряженные остатки фосфорной кислоты заставляют использовать для хроматографии нуклеотидов н НК крупнопористые слабые анионообменники. [c.321]

Возможности ионообменной хроматографии целых молекул нуклеиновых кислот, естественно, ограничены кругом сравнительно низкомолекулярных НК (тРНК, рибосомальные 5S РНК, ядерные РНК) в последнее время к ним присоединились и плазмиды бактерий. Это ограничение обусловлено чересчур прочной многоточечной связью высокомолекулярных НК даже со слабыми анионообменник ами. [c.323]

СН2)зКН2 — (NH2, аминосиликагель) — используется для обращение- и нормально-фазовой хроматографии. В водных подвижных фазах сорбент может найти применение как слабый анионообменник для разделения кислот. Часто используется для хроматографии сахаров в водно-органических системах. Следует избегать использования сорбатов, содержащих альдегидные или кетогруппы, которые могут образовывать с аминогруппами сорбата шиффовы основания [c.32]

Для разделения нуклеотидов используют слабо- и среднеосновные анионообменники на основе целлюлозы. ДЭАЭ-, Эктеола- и ПЭИ-цел-люлозу. Могут быть использованы как коммерческие пластинки, так л приготовленные в лаборатории. Подготовка сорбента и приготовление пластинок с тонким слоем ПЭИ-целлюлозы описаны на с. 182. В отличие от хроматографии рибомононуклеотидов хорошего разделения компонентов адениловой системы можно добиться, применяя в качестве растворителя 0,5 М раствор хлористого лития [c.185]

Ионообменную хроматографию широко применяют в медицине, биологии, биохимии [11—15], для контроля окружающей среды, при анализе содержания лекарств и их метаболитов в крови и моче, ядохимикатов в пищевом сырье, а также для разделения неорганических соединений, в том числе радиоизотопов, лантаноидов, актиноидов и др. Анализ биополимеров (белков, нуклеиновых кислот и др.), на который обычно затрачивали часы или дни, с помощью ионообменной хроматографии проводят за 20-40 мин с лучшим разделением. Применение ионообменной хроматографии в биологии позволило наблюдать за образцами непосредственно в биосредах, уменьшая возможность перегруппировки или изомеризации, что может привести к неправильной интерпретации конечного результата. Интересно использование данного метода для контроля изменений, происходящих с биологическими жидкостями [11]. Применение пористых слабых анионообменников на силикагелевой основе позволило разделить пептиды [12]. [c.32]

Сильные катионо- и анионообменники находят применение анализе биологических жидкостей для определения ряда лекарственных препаратов, биогенных аминов, их метаболитов и др. Разработан метод ион-парной хроматографии, в котором используют динамические слои катионо- или анионоактивных агентов, обладающие свойствами ионообменников и в то же время обращенно-фазных сорбентов. Эти слои наносят из растворителя, содержащего ион-парный реагент, (обычно алкил-сульфокислоты или тетраалкиламмониевые основания), пропуская его через сорбент для обращенно-фазной хроматографии. Ион-парная обращенно-фазная хроматография является методом анализа смеси ионизирующихся и неионизирующихся веществ. [c.98]

Для регенерации силикагелевых колонок рекомендуется использовать следующий ряд растворителей тетрагидрофуран, метанол, тетрагидрофуран, метиленхлорид, гексан. Ряд для обращенно-фазных колонок и нитрильных фаз вода, диметилсульфоксид, метанол, хлороформ, метанол. Ряд для аминофаз и сильных анионообменников вода, метанол, хлороформ, метанол, вода (если аминофазу используют в водных системах растворителей). Ряд для аминофаз (неполярные растворители) хлороформ, метанол, вода, метанол, хлороформ. Ряд для сильных катионитов вода, тетрагидрофуран, вода. Ряд для органических гелей — сополимеров стирола и дивинилбензола (эксклюзионная хроматография) толуол, тетрагидрофуран, 1%-ный раствор меркаптоуксусной кислоты в толуоле или тетрагидрофуране, тетрагидрофуран, толуол. Приведенные рекомендации могут дополняться и видоизменяться в соответствии с опытом, накапливаемым в процессе работы. Если в результате регенерации не удалось восстановить работоспособность колонки, следует попытаться провести ее ремонт. [c.125]

По нерастворимому остову (матрице) определенным образом распределены ковалентно связанные функциональные группы, способные к диссоциации. Первые разработанные специально для ионо-обменной хроматографии твердые носители получали следующим образом на стеклянные шарики наносили путем полимеризации по-листирольную плен и в нее ввод1ши функциональные группы. В современных ионообменниках с пористым силикагелем ковалентно связаны (по типу щеток ) алкильные или арильные группы, в которые введены ионообменные группы. Чаще всего это сульфогруппы, реже карбоксильные группы (катионообменники) или четвертичные аммониевые группы (анионообменники). Обычные ионообменники меняют свой объем при изменении pH, концентрации ионов и температуры элюента. Прежде чем заполнять колонки, им надо дать набухнуть. [c.94]

Свойства смешанных простых эфиров целльэлозы, в том числе растворимость, зависят от вида и массовой доли введенных заместителей и могут обеспечить смешанному эфиру спеьифическое применение, t том числе использование подобных эфиров с низкой степенью замещения для модифицирования це-.люлозы. Перспективное направление - получение функциональных производных целлюлозы. Так, благодаря пористой структуре функциональных производных их можно использовать для получения ионообменных материалов, применяемых в колоночной хроматографии. Эти производные получают в волокнистой, порошковой или гранулированной формах введением алкильных заместителей, содержащих ами1югруппы (для анионообменников) и сульфо- [c.617]

ДЭАЭ-целлюлоза благодаря своей функциональной группе — диэтиламиноэтильному остатку — обладает свойствами слабого анионообменника. Ее используют главным образом для разделения природных высокомолекулярных полимеров, особенно чувствительных к резким изменениям pH и температуры, т. е. в первую очередь для фракционирования белков. Хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе отличается высокой разрешающей способностью. Этот ионообменник пригоден как для аналитического, так и- для препаративного фракционирования белков на колонках соответствующего размера. [c.204]

ПАР и ПАН-2 использованы для обнаружения Сс1, Си, РЬ и 2п [877] при хроматографическом разделении на бумаге, ПАР и ПАН-2 — для обнаружения В1, Сё, Со, Си, Мп, N1, РЬ, У(У), и(У1) [736] и 2п (ПАН-2) [658] при их разделении методом тонкослойной хроматографии. При анализе воды и лекарственных препаратов ионы Сё, Со, Си, Hg, N1, РЬ и 2п разделяют на катионообменных бумагах Амберлит 5А-2 или У А-2 , а затем обнаруживают при помощи ПАН-2 или ПАР [97]. Фуимото [637] отмечал, что сорбирование ионов смолами, а затем обнаружение при помощи ПАН-2 или ПАР понижает предел обнаружения В], Hg(И), N1, Рс1, Т1(П1) и У(1У, V) до рО < 8,7, в то время как без сорбции рО = 6,5—7,0 рВ — отрицательное значение логарифма предельного разбавления). Пиридиновые азосоединения широко применяются в качестве проявителей в тонкослойной хроматографии. Используют пластинки с гипофосфитом циркония [704] (разделяют и обнаруживают с помощью ПАН-2 лантан и иттрий), силикагелем [879] (разделяют и обнаруживают Со, Си, N1 с помощью ПАН-2), с целлюлозой МЫ-ЗОО-НК и силикагелем [736] (разделяют В , Сс1, Со, Си, Мп, N1, РЬ, У(У) и и(У1), подвижный растворитель СН3СОСН3—1-СЭН7ОН—СНзСООН—НС —НаО, проявитель — ПАН-2 или ПАР). На пластинках Силуфол на основе силикагеля [646] разделяют Со, Си, Ре, N1 и затем обнаруживают с помощью ПАН-2. Метод применяют для определения элементов в нитратах бария и стронция, хлоридах кальция, аммония и гидрокарбонате аммония. На целлюлозе МЫ-ЗОО-НК, пропитанной хлороформным раствором анионообменника — хлоргидрата Прайамина 1М-Т, отделяют цинк и обнаруживают его реагентом ПАН-2 [658]. Разработан метод обнаружения РО4 , В1, 5Ь, Н 2,6-диамино-З-фенилазо-пиридином [687]. [c.184]

Большие возможности открывает путь предварительного перевода составляющих оксидат соединений, содержащих одну или две карбоксильные группы,, в их метиловые эфиры. В частности, предварительно метилированная проба оксидата — продукта направленного окисления октадекана до кислот — подробно исследована по групповому и компонентному составу в результате многоступенчатого разделения, включающего стадии жидкостного хроматографирования на силикагеле, обработки щелочью, экстракции [204]. Учитывая, однако, сложность, длительность и недостаточную изученность такой схемы для исследования оксидатов фракций парафинов, предлагаете) более упрощенная схема разделения и анализа, опробированная на оксидатах Шебекинского химкомбината с различными кислотными числами [205]. Она заключается в том, что из исходной пробы оксидата отгоняют под вакуумом легкокипящую часть, остаток без перевода в метиловые эфиры разделяют, на анионо-обменнике на фракцию парафинов и неомыляемых соединений и фракцию жирных кислот. Легкокипящую часть оксидата, а также извлеченную из слоя анионообменника фракцию парафинов и неомыляемых соединений анализируют по фракционному составу методом газо-жидкостной хроматографии. Фракцию жирных кислот анализируют с помощью методов, применяемых для фракций СЖК (см. разд. 1.3.1.2.5). [c.79]

В присутств ИИ сульфатов жирных спиртов, алкил-и ал ниларил сульфонатов анионообменник из колонки II количественно переносят в плоскодонную колбу емкостью 250. мл, добавляют 100 мл 2 н. раствора НС1 в метаноле и кипятят с обратным холодильником при перемешивании магнитной мешалкой (для предотвращения перегревов и выбросов). При этом десорбируемые сульфаты жирных спиртов подвергаются гидрой-лизу (табл. 31). Анионообменник отфильтровывают, промывают его несколькими миллилитрами петролейного эфира и метанола и далее анализ ведут в зависимости от состава десорбированных веществ, определенного методом тонкослойной хроматографии (см.разд. III.1.3.5.1). [c.297]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология