Методы аминокислотного анализа

Нингидринная реакция широко используется для анализа аминокислот. Реакция протекает количественно. Образующийся альдегид является характерным для каждой аминокислоты Специфическое определение альдегида позволяет установить соответствующую аминокислоту. Колориметрия окрашенного комплекса в сочетании с хроматографией и ионо-форезом является сейчас одним из самых распространенных методов аминокислотного анализа белковой молекулы. [c.469]

Для анализа редких аминокислот из некоторых источников разработаны специальные условия элюирования. Системы, предназначенные для анализа аминокислот из животных тканей, приходится модифицировать при анализе аминокислот растительного происхождения, что связано с разным количественным и качественным составом экстрактов [44—46]. Разработаны также таблицы для идентификации компонентов, содержащихся в экстрактах из насекомых [47]. Для контрольных анализов изделий пищевой промышленности разработан специальный метод аминокислотного анализа гидролизатов пищевых продуктов и муки [48, 49], пива и солода [50]. Метод определения аминокислотного состава травы и силоса разработан с целью определения их кормовой ценности [51]. Для промышленных целей раз- [c.348]

Изотопные методы являются обычными методами аминокислотного анализа к ним относятся [c.66]

Приблизительно столько же испытаний необходимо провести при селекции растений для отбора одного нового вида с повышенным содержанием белка или более высоким содержанием Лиз и Мет. В клинической практике также имеется область, где анализ аминокислот используется в массовых обследованиях для выявления нарушений аминокислотного метаболизма у новорожденных. Во многих странах такое обследование уже введено в обязательном порядке, правда, с применением микробиологических методов, поскольку исследование огромного числа образцов другими методами аминокислотного анализа реально не выполнимо. [c.243]

При изучении небольших пептидов подходящим методом аминокислотного анализа, например с помощью автоматического аминокислотного анализатора, можно достаточно определенно установить состав пептида, лишенного своей концевой группы. Проследив за изменением аминокислотного состава на последовательных этапах деградации, можно восстановить аминокислотную последовательность изучаемого пептида. [c.283]

Современные методы количественного анализа аминокислот основаны на элютивной ионообменной хроматографии с использованием колонок, заполненных сульфополистирольным катионитом в натриевой форме. Этот метод аминокислотного анализа впервые предложен сотрудниками Рокфеллеровского института в США Штейном и Муром [1], которые до этого занимались разделением аминокислот на крахмальных колонках. [c.124]

МЕТОДЫ АМИНОКИСЛОТНОГО АНАЛИЗА [c.210]

В. Методы аминокислотного анализа [c.214]

ТОЧНОСТЬ МЕТОДОВ АМИНОКИСЛОТНОГО АНАЛИЗА [c.227]

Описание методов анализа белков лучше всего начать с изложения целей анализа. За последние годы исследования в различных областях науки, примыкающих к биохимии, показали физико-химическое своеобразие и однородность белков и многообразие форм проявления их активной и специфической роли в живых организмах. Поэтому было привлечено такое большое внимание к проблеме детального строения белков. Для выяснения этих вопросов точное знание природы и числа аминокислотных остатков, составляющих белки, так же важно, как и знание природы и числа составляющих атомов при изучении структуры более простых молекул. Методы аминокислотного анализа, однако, еще не так надежны, как методы элементарного анализа. Мы попытаемся здесь рассмотреть современное состояние этого вопроса и наметить возможные пути его развития. [c.46]

Надежные методы аминокислотного анализа необходимы также для агрохимических и клинических исследований, а также для анализа пищевых продуктов. В этих случаях точность иногда может быть принесена в жертву технической быстроте и простоте определений. [c.47]

Работа Бергмана с сотрудниками. Применяя различные замещенные сульфокислоты, Бергман с сотрудниками [355, 401—407] разработали новый важный метод аминокислотного анализа. Он основан главным образом на том экспериментальном факте, что в то время, как растворимость аминокислоты и произведение растворимости аминокислоты и сульфокислоты чувствительны к присутствию аминокислот или других веществ в растворе, — отношение произведений растворимости для двух данных различных пропорций аминокислоты и сульфокислоты мало зависит от других аминокислот. [c.94]

Аналитические методы Аминокислотный анализ [c.122]

НОВЕЙШИЕ МЕТОДЫ АМИНОКИСЛОТНОГО анализа [c.446]

Прежде чем определять аминокислотную последовательность белка, необходимо установить его аминокислотный состав. При этом можно использовать различные методы (разд. 4.1.3.3 и след.). Наиболее широко применяемый в настоящее время количественный метод аминокислотного анализа белкового гидролизата основан на использовании ионообменной хроматографии (разд. 5.6.3.3 и след.). Белок обычно гидролизуют в 6 н. НС1 при 100°С в течение 20 и более часов в отсутствие воздуха. Как правило, проводят несколько параллельных опытов с различной продолжительностью гидролиза при этом удается оценить скорость разрушения лабильных аминокислот, таких, как серии, треонин и тирозин, а также добиться полноты гидролиза наиболее стабильных пептидных связей, особенно образованных остатками изолейцина и валина. При кислотном гидролизе разрушается триптофан его можно опреде- [c.166]

Ферментативные методы аминокислотного анализа основаны на определении продуктов реакции, которые образуются при биохимическом расщеплении аминокислот. Из-за их сравнительно низкой чувствительности (10 — 10 моль/л) зти методы применяют только при серийных анализах определенных аминокислот. К анализируемой смеси аминокислот добавляют специфическую декарбоксилазу (или же производяшле эту декарбоксилазу микроорганизмы), и получающуюся при декарбоксилировании углекислоту определяют манометрически в аппарате Варбурга. [c.67]

Для поглощения и концентрирования аминокислот из морской воды был применен [64] метод хроматографии, основанный на обмене лигандов. Для этого пропускали большие объемы морской воды через небольшую колонку, заполненную иминодиацетатной комплексообразующей полистирольной смолой дауэкс А-1 в ее Си (И)-форме. При этом аминокислоты образовывали комплексы с м.едью, которые удерживались смолой. Затем аминокислоты вытесняли из медных комплексов пропусканием через ту же колонку 5 М раствора аммиака. При такой методике наряду с аминокислотами медь, как это свойственно небольшим по размеру ионам, также вытесняется с поверхности смолы и попадает в элюат. Медь можно поглотить или отфильтровать , пропуская раствор через небольшую колонку диаметром около 1 см и высотой 2 см, заполненную Ыа-формой карбоксильной полиметакриловой смолы амберлит ШС-50. Очищенный от меди раствор аминокислот можно сконцентрировать выпариванием и затем анализировать любым из методов аминокислотного анализа. [c.515]

Дейтерированные аналоги аминокислот были выбраны в качестве внутренних стандартов в недавно опубликованном Рафтером и др. [324] методе аминокислотного анализа белка на хроматомасс-спектрометре, снабженном компьютером. Подробная методика этого анализа приведена ниже. [c.87]

Мартин и Синдж [6] показали, что при разделении и определении индивидуальных компонентов из одной порции смеси аминокислот можно получить более точную картину суммарного анализа белка, чем при выделении различных аминокислот (или их производных) из отдельных порций гидролизата. В последнем случае получаемые величины будут независимо искажаться ошибками, возникающими за счет потерь определяемой аминокислоты и примесей других аминокислот, так что суммарная величина будет содержать сумму этих независимых ошибок. Если аминокислоты разде.лять непрерывным элюированием одной порции гидролизата, то, хотя ошибки этого рода еще могут влиять на индивидуальные величины, при суммировании они аннулируются, так как индивидуальные ошибки в этом случае зависят друг от друга. Это дает более надежные основания для расчета числа аминокислотных остатков каждого типа, присутствующих в молекуле белка. Далее, поскольку ионообменная хроматография включает только одну операцию, метод характеризуется высокой разрешающей способностью и проводится в мягких условиях температуры и значений pH, ошибки в определении индивидуальных аминокислот малы. Метод ионообменной хроматографии Мура и (Стейна представляет собой поэтому успешное практическое осуществлеш1е стремления к простому, универсальному и точному методу аминокислотного анализа, начало которому положили Мартин и Синдж. [c.121]

Только в последние несколько лет получены точные сведения о природе связи между углеводной группой (гетеросахаридом) и полипептидной цепью в гликопротеинах. Это объясняется тем, что только в последние годы в этой области были успешно применены хроматографические методы. Еще в 1938 г. Нойбергер [1] выделил из яичного альбумина гликопептид, который, как это стало ясно теперь, содержал остаток аспарагина но тогда аспарагин не был обнаружен, поскольку не были разработаны удобные методы анализа малых количеств аминокислот, не имеющих специфических характеристик. Решение проблемы было ускорено новыми методами аминокислотного анализа, такими, например, как метод, разработанный Муром и Стейном, и расширением знаний о принципе построения некоторых гликонротеинов. Как можно видеть из гл. 1 и 2, основная концепция об общем построении гликонротеинов была развита только сравнительно недавно, а первые экспериментальные данные о связи между углеводами и пептидами в гликопротеинах животного нроисхождения опубликованы в 1957 и 1958 гг. [c.278]

Впервые у-карбоксиглутаминовая кислота Gla была обнаружена в протромбине, позже — в других белках и моче для ее количественного определения были предложены различные методы аминокислотный, анализ [134, 145, 146, 179, 182, 234, 361], ГЖХ [247], колориметрический анализ (в интервале 0,5-10 5х Х10-4 моль/л) [290] и ВЭЖХ [205, 206]. [c.264]

Как указывалось в одной из работ [7], многие из этих сложных модификаций были предложены до появления современных методов аминокислотного анализа и в настоящее время устарели. Хотя гидразинолизат после удаления избытка гидразина [c.494]