Стерилизация жидкими средами

Стандартные приемы стерилизации жидких сред описываются в гл. 23 этого руководства. Для предотвращения распада термолабильных компонентов среды используют стерилизацию фильтрованием. Небольшие объемы простых сред, используемых для культивирования бактерий, автоклавируют непосредственно перед их использованием, но для автоклавирования больших объемов [c.407]

Ультрафильтрация — это процесс разделения, фракционирования и концентрирования растворов с помощью полупроницаемых мембран. При этом жидкость непрерывно подается в пространство над мембраной под давлением 0,1... 1,0 МПа. Процессы ультрафильтрации выполняют на мембранах со средним диаметром пор от 0,01 до 0,1 мкм, называемых ультрафильтрационными мембранами. В процессах ультрафильтрации из исходной смеси отделяют самые мелкие бактерии и сферические вирусы, крупные белковые молекулы и т. п. Эти процессы используют для стерилизации жидких сред. [c.518]

Культивирование гриба на жидких средах без автоклавирования, перемешивания и принудительной аэрации проводят без предварительной стерилизации среды, ее просто нагревают до кипения, разливают в деревянные каркасы, покрытые изнутри полиэтиленовой пленкой. Среду, охлажденную до 35—40°С, засевают сухими спорами. Сверху каркасы закрывают полиэтиленовой пленкой, которую после образования спороносной пленки гриба снимают. [c.77]

Стерилизация. Жидкие среды перед использованием обычно стерилизуются нагре- [c.454]

Бутыли довольно часто используются для выращивания многолитровых культур бактерий в жидких средах, но существует несколько факторов, ограничивающих их применение. Так, при работе с большими стеклянными бутылями приготовление сред, их стерилизация и инокуляция сильно усложняются. Кроме того, встряхивание заполненных средой бутылей при аэробном культивировании микроорганизмов небезопасно. (Правда, при работе с пластмассовыми бутылями опасность значительно меньше.) В больших бутылях очень трудно перемешивать среду даже с помощью мешалок, поэтому создать в них достаточно высокую концентрацию кислорода — задача не из легких. Хотя при крупномасштабных работах часто приходится готовить среды в больших бутылях, культивирования бактерий в них следует по возможности избегать. [c.387]

Мембранные фильтры готовят из коллодия, ацетата, целлюлозы и других материалов. Это диски толщиной около 0,1 мм отечественные мембранные фильтры диаметром 35 мм. В зависимости от размеров пор они обозначаются № 1, 2, 3, 4 н 5 средний диаметр их соответственно равен (в мкм) 0,35, 0,5 0,7 0,9 1,2. Для стерилизации жидких сред используют фильтр № 1. [c.75]

Стерилизация жидкими средами [c.312]

При осадочной фильтрации из культуральной среды удаляется большинство микроорганизмов, в результате чего получают хорошо просветленный фильтрат. Однако для стерилизации жидких сред этот метод неприменим. Клетки, полученные осадочной фильтрацией, обычно загрязнены большим количеством фильтрующего материала, который может помешать их дальнейшему изучению. [c.427]

Для глубинного культивирования используют жидкие среды, содержащие примесь твердых компонентов. В комплексных средах, основанных на естественном сырье с добавлением отрубей, ростков, кукурузного жмыха, глютена, свекловичного жома, спиртовой барды, следят за тем, чтобы не было крупных комочков, так как они затрудняют стерилизацию и могут привести к забиванию коммуникаций. Поэтому перед смешением необходимо проводить просеивание твердых компонентов или грубую фильтрацию (например, зерно-картофельной барды). [c.159]

В пробирках микроорганизмы культивируют как в жидких, так и на плотных средах. Жидкой средой для аэробных культур заполняют обычно 7з пробирки, для анаэробных—%. Если плотная среда в пробирке предназначается для выращивания микроорганизмов в этой же пробирке, ее при подготовке к стерилизации наливают в пробирки на 7з— А их объема. После стерилизации пробирки с еще не застывшей средой раскладывают на ровной- поверхности стола в наклонном (под небольшим углом) положении для получения скошенной поверхности агара. Это так называемые косяки —косые или скошенные среды. Плотная среда, застывшая при вертикальном положении пробирки, называется столбиком. Столбики (7з—пробирки) используют для посева культуры уколом (стр. 22). Столбики питательной среды (% объема) после стерилизации также [c.20]

При необходимости быстро определить биохимические свойства в пробирках с жидкими средами можно применять стерильные УБД (стерилизация в сухожаровом шкафу при 80—90°С в течение 1—2 ч). В пробирку делают массивный засев культуры и вводят один или более дисков. Индикатор и углевод диффундируют в среду. [c.203]

Для выявления газообразных продуктов, образующихся в жидкой среде при культивировании микроорганизмов, Я. 3. Зимин (1969) вместо поплавков предложил пользоваться поролоновой губкой. Ее нарезают кубиками такой величины, чтобы, находясь в пробирке, они не касались ее стенок. Кусочки поролона опускают в питательную среду до ее стерилизации. При автоклавировании пузырьки газа из пор губки вытесняются паром и после остывания заполняются питательной средой, в связи с чем губка опускается на дно пробирки. Если в среде, засеянной микроорганизмами, образуется газ, он задерживается в порах губки и она всплывает на поверхность среды. При этом сквозь полупрозрачную ткань поролона хорошо видны образующиеся пузырьки газа. [c.61]

Среди веществ, используемых при стерилизации в жидких средах, отмечены надкислоты, например, надуксусная кислота, показавшая хорошие результаты при обеззараживании комбинированных сердечных клапанов с использованием тканей свиньи [38]. [c.312]

Культуры для приготовления бактериальных вакцин выращивают на плотных или жидких средах. Для вакцин из вирусов и риккетсий возбудители культивируют в организме животного, куриного эмбриона или в культуре ткани. Полученную культуру убивают прогреванием (56—58°) или химическими веществами (эфир, фенол, формалин, спирт, ацетон и др.), при этом стерилизацию микробной взвеси производят таким образом, чтобы иммуногенность препарата была сохранена. Взвесь убитых микробов разводят изотоническим 0,9% раствором хлорида натрия до определенного содержания микробных тел в 1 мл. Готовую взвесь разливают в асептических условиях в стерильные ампулы или флаконы. [c.723]

Обязательным условием осуществления многих биотехнологических процессов является работа в асептических условиях, поэтому решающее значение имеет стерилизация среды, а в случае аэробных процессов — и воздуха. Тем не менее для разработки и оптимизации эффективных методов стерилизации сред и воздуха было сделано удивительно мало. В случае биотехнологических процессов жидкие среды стерилизуют исключительно нагреванием до высоких температур, а воздух, как правило, лишь фильтрованием мы обсудим только эти два метода стерилизации. [c.461]

Если требуется плотная среда, то до стерилизации добавляют агар. Когда для роста микроорганизма необходимы аэробные условия, то создают наклонную поверхность питательной среды, давая возможность агару застыть в пробирке, находящейся под углом приблизительно 25—30°. Затем косой агар засевают, распределяя на его поверхности живые клетки микроорганизмов, находящиеся в стерилизованной петле для посевов. В случае же выращивания на плотной среде анаэробного организма агару дают застыть в пробирке, расположенной вертикально, после чего засевают среду, погружая в агар петлю для посевов, содержащую клетки требуемого микроорганизма. Можно выращивать анаэробы и на жидких средах. [c.12]

В принципе метод стерилизующей фильтрации является идеальным средством стерилизации лабильных, в том числе термически неустойчивых жидких и газовых сред, поскольку он может быть проведен при низкой температуре и требует лишь градиента давления по разные стороны мембраны. Это позволяет говорить о больших технологических перспективах мембранной стерилизации, в первую очередь, жидких сред. Основная имевшаяся здесь трудность — наличие термостойких мембран, способных выносить многократную термическую стерилизацию их самих в ходе эксплуатации, сейчас успешно преодолевается путем широ- [c.15]

К жидким средам добавляют 10—20% желатины, оставляют набухать 5—10 мин и нагревают на водяной бане до растворения. Доводят pH среды до 6,8—7,0. Желатина имеет кислую реакцию и обладает большой буферностью, поэтому на ее нейтрализацию идет больше щелочи, чем, например, на нейтрализацию МПА. Желатиновые среды стерилизуют при 0,5 ати 15 мин или дробно — 3 раза По 20 мин в кипятильнике Коха. Повторная стерилизация желатиновых сред, особенно при pH сред ниже 6,0 или выше 7,3 не рекомендуется, поскольку желатина частично гидролизуется и теряет гелеобразующие свойства. [c.53]

В состав среды для роста продуцентов витамина В2 входят достаточно сложные органические вещества — соевая мука, кукурузный экстракт, сахароза, карбонат кальция, хлорид натрия, гидрофосфат калия, витамины, технический жир. Грибы весьма чувствительны к изменению состава среды и подвержены инфицированию. Перед подачей в ферментер среду подвергают стерилизации, добавляя к ней антибиотики и антисептики. Подготавливают жидкую питательную среду и посевной материал культуры дрожжей в разных емкостях — ферментере и посевном аппарате. [c.54]

Стерилизация в автоклаве. В автоклаве стерилизуют-питательные среды — жидкие и плотные (агаровые), не содержащие углеводов и белков, так как эти вещества разлагаются при обычном режиме стерилизации. Затем в автоклаве стерилизуют стеклянную посуду (при отсутствии сушильного шкафа), в частности, бутылки и склянки, закрытые корковыми и каучуковыми пробками при давлении 1 атм сверх нормального. [c.151]

Среды Гисса бывают жидкими и полужидкими (с добавлением 0,2—0,5% агар-агара). В пробирки с жидкими средами Гисса для обнаружения газов, являющихся конечными продуктами распада сахаров, опускают поплавок — трубочку диаметром 0,5—0,7 см, запаянную с одного конца. Поплавок помещают запаянным концом кверху при стерилизации он полностью заполняется питательной средой. При образовании в среде газообразных продуктов они вытесняют часть жидкости, находящейся в поплавке , вследствие чего у запаянного конца его собирается воздушный пузырек. [c.61]

На третьей стадии жидкая посевная культура выращивается в производственных условиях в посевных аппаратах — ииокулято-рах (рис. 1). Технологический цикл состоит из следующих операций подготовка аппарата, приготовление и стерилизация питательной среды, засев среды культурой, культивирование микроорганизмов. [c.58]

При выделении анаэробов во все жидкие среды после разливки в пробирки и флаконы перед стерилизацией вливают жидкое вазелиновое масло слоем 0,25—0,5 см и подвергают регенерации — кипячению в течение 15 мин для удаления кислорода. [c.377]

Изучение продуктов жизнедеятельности. При использовании микроорганизмами источников углерода, в частности углеводов, продуктами их жизнедеятельности нередко бывают газы, кислоты и спирты. Для обнаружения газов применяют посев уколом в агаровую среду в пробирки. При появлении газов столбик агар-агара разрывается. Используют также жидкую среду с перевернутыми вверх дном поплавками. Поплавок представляет собой небольшую узкую пробирку (0,5х3...4 см). Его опускают вверх дном в обычную пробирку с жидкой средой, которая при стерилизации заполняет поплавок. При развитии микроорганизмов, образуюш,их газы, последние вытесняют жидкость из поплавка. [c.62]

При выращивании микроорганизмов глубинным методом клетки суспендированы в жидкости и находятся во взвешенном состоянии. В небольшую (50—250 мл) колбу наливают жидкую питательную среду, в которую засевают чистую культуру либо с поверхности косого агара, либо из ампул. Затем колбу на сутки или более помещают в термостат с определенной температурой, где культура растет и размножается. Чисто аэробные микроорганизмы выращивают в специальных колбах, которые ставят на качалку в термокамере. После этого культуру пересевают в лабораторные ферментаторы со средой такого же или несколько измененного состава. Лабораторные ферментаторы — стеклянные аппараты емкостью 1—10 л, в которых можно обеспечить продувание среды воздухом, регуляцию температуры, pH и других условий роста. По описанной выше схеме обычно организуют исследование культур микроорганизмов. Кроме того, таким путем готовят и чистую культуру для производственных нужд. Дальнейшее размножение чистой культуры в производственных условиях идет в несколько стадий при использовании металлических инокулято-ров объемом от 0,1 до 100 м и более. Инокуляторы снабжены мешалками, аэраторами, устройствами для стерилизации и охлаждения, арматурой, измерительными приборами. Для каждой следующей стадии необходимо 3—20% посевного материала (по объему). [c.68]

Питательную среду для второй стадии готовят аналогично первой стадии. После доведения pH до 4,8, стерилизации при температуре 121—125° С в течение 40—60 мин и охлаждения до 26° С питательную среду разливают в сосуды вместимостью 6 л по 2,5 л в каждый и засевают жидкой посевной культурой первой стадии в количестве 10—12% к объему среды. Выращивание проводят при температуре 24—26° С при частоте колебаний качалки 200—220 мин—. [c.58]

Получение жидкого посевного материала в колбах (первая стадия) Автоклав Приготовление тельной среды Стерилизация Охлаждение пита- 60 мин 3" мгк 60 мин 45 мин 30 мин 120 мин 45 мин [c.69]

Получение жидкой посевной культуры в колбах (вторая стадия) Приготовление питательной среды Стерилизация среды 60 мин 20 Мин 60 мин 20 мин 120 мнн [c.70]

Растворы и нары П. обладают обеззараживающим действием в отношении различных микроорганизмов. Стерилизующие концентрации жидкого П. в отношении вегетативных форм 0,2—0,3%, споровых — 0,5— 0,7% (вес/объем), а паров П. —2—4 мг/л (при относительной влажности выше 70%, темп-ре 25—26° и экспозиции 2 часа). П. применяют в медицине для стерилизации многих биологич. жидкостей и препаратов (кровь, вакцины, ферменты, питательные среды и трансплантаты), а также в качестве фумиганта при дезинфекции. [c.179]

Поплавок—небольшая узкая пробирка (0,5X3—4 см). Его опускают (вверх дном) в обычную пробирку с жидкой средой, ко торая при стерилизации заполняет поплавок. При развитии микрг организмов, образующих газы, последние вытесняют жидкость из поплавка. [c.83]

Чистота и стерильность — важнейшие составляющие благопо-ЛЗП1НО проведенного биотехнологического процесса Это достигается при осуществлении подготовительных операций перед культивированием биообъекта, в том числе — стерилизации питательных сред, пеногасителей, различных жидких добавок, оборудования и коммуникаций, фильтров для очистки воздуха, использования высококачественного посевного материала [c.276]

При этом стараются не повредить поверхность плотной среды. В случае пересева в жидкую среду (в колбы или пробирки) петлю с микробной массой погружают непосредственно в среду Оставшиеся на петле после пересева или приготовления препарата клетки микроорганизмов тщательно сжигают Б пламени горелки. Прокаливание петли в этом случае начинают с участка проволоки, примыкающего к кольцу, для того, чтобы микробная масса, оставшаяся на петле, подсохла Затем петлю переводят в вертикальное положение и прокаливают докрасна. Та1кой порядок стерилизации петли необходим потому, что при быстром нагревании влажной микробной массы происходит ее разбрызгивание и образуется аэрозоль, загр-язняющий воздух. Только после прокаливания петлю можно положить на место. [c.27]

Для культивирования грибов этого семейства используются как искусственные питательные среды, так и сложные природные субстраты. К числу последних относятся стерилизованные в автоклаве продукты, используемые в виде кусочков или фарша морковь, редька, картофель, свинина, говядина, телятина, рыба, печень, селезенка. Кровь, свернувшаяся сыворотка, а также яичный желток или молоко являются основными частями, добавляемыми в бактериологические среды. Среды из насекомых готовились из растертых простерилизованиых особей видов хозяев, поражаемых данным возбудителем, обычно с 1,5—2,0% -ным агаром. Для стерилизации животных тканей применяют преимущественно автоклавирование или холодную стерилизацию этиленоксидом. Этот газ при низких температурах сжижается, и его можно долго сохранять в холодильнике. Жидкий этиленоксид выливают на стерилизуемый материал в пробирке или чашке Петри, помещаемые в эксикатор, где химикат, испаряясь, переходит в газообразное состояние и после полного испарения стерилизует материал, используемый в качестве питательного субстрата. Лучшая среда для выделения и культивирования грибов этого семейства — [c.313]

Приготовление н стерилизация питательной среды. Приготовление маточных дрожжей, ведение процесса их выращивания в АЧК. Мойка и дезинфекция АЧК. Уборка рабочего места Обслуживание технологического оборудования цеха жидких кормовых дрожжей. Проведение мелкого и аварийного ремонта Изготовление несложных деталей для оборудования, наблюдение за его правильной эксплуатацией. Ведение записей в журнале о состоянии оборудования при сдаче смены. В ремонтный период — выполнение работ по ремонту оборудоваяия цеха в соответствии с гра фиком планово-профилактического ремонт [c.135]

В пробирках микроорганизмы культивируют как в жидких, так и на плотных средах. Жидкой средой для аэробных культур пробирки обычно заполняют на 1/3, для анаэробных - на 2/3 объема. Если плотная среда в пробирке предназначена для выращивания микроорганизмов б той же проб.ирке, при подготовке к стерилизации среду наливают в пробирки на 1/3...1/4 объема. После стерилизации пробирки с еще не застывшей средой раскладывают на ровной поверхности стола в наклонном под небольшим углом положении для получения скошенной поверхности агар-агара. Это так называемые косяки - косые, или скошенные, среды. [c.13]

Более простая система разработана Филлипсом и Трекслером [20]. Она пригодна для большинства исследований и лишена недостатков, связанных с введением бентонита, который может вызвать загрязнение питательного расвора. По этому методу навеску битума растворяют в минимально возможном объеме бензола с тем, чтобы получить жидкий раствор, который можно набрать пипеткой. Определенную порцию раствора битума вводят непосредственно жидкую питательную среду, где он образует слой над водной фазой. В процессе стерилизации в автоклаве бензол испаряется, оставляя тонкую пленку битума на поверхности жидкой питательной среды. Этот тонкий слой создает достаточную площадь поверхности для большинства организмов. Концентрация битума, вводимого в среду, обычно 1 % и ниже. [c.179]

На рис. 16.32 приведена принципиальная схема установки для СВЧ-стерилизации (пастеризации) жидких пищевых сред. Установка состоит из электромагнитной системы ЭС 9 с системой фторопластовьпс трубопроводов 10, рекуперативного теплообменника 4, предварительного нагревателя 5, гидравлической системы с клапанными устройствами 2 и датчиками 6 для измерения температуры, магнетронов 8, блоков питания 12 и управления 11, расходомера 1, возбудителей 7 электромагнитных полей. [c.889]

В противоположность дерматологическим мазям, за последнее де сятилетие ничего нового среди мазевых основ для глазных мазей не появилось. Причина прежде всего заключается в неудовлетворительной переносимости современных вспомогательных веществ. Классические компоненты - вазелин, цетиловый спирт, жидкий и твердый парафин имеют отличную стабильность при тепловой обработке. Пригодность масляных веществ офаничивается их стабильностью, особенно при тепловой стерилизации. Касторовое масло, холестерол, ланолин, ланолиновый спирт достаточно стабильны при тепловой обработке. Парафиновое масло и твердый парафин практически не обладают раздражающим действием. Белый вазелин в некоторых случаях может оказывать раздражающее действие на глаз, что обусловлено продуктами окисления и остатками отбеливающих средств. Из-за этого предпочтение отдается вазелину желтого цвета. Холестерол практически не вызывает аллергических явлений. Этерифицированные производные ланолина переносятся значительно лучше, чем исходный продукт. [c.396]

Возможности типовой технологической схемы в настоящее время использованы далеко не полностью. Один из современных приемов улучшения ее показателей — обработка непищевых отходов в среде расплавленного жира, обеспечивающая стерилизацию сырья без герметизации системы. В этом случае, за счет весьма плотного контакта жидкого жира-теплоносителя с высокой теплоемкостью и сырья при температуре около 150°С, влага отходов интенсивно испаряется. Однако кратковременный высокотемпературный нагрев меньше разрушает аминокислоты белков, чем более продолжительная низкотемпературная теплообработка по стандартной схеме. Как следствие, качество получаемой кормовой муки повышается. [c.335]

В связи с тем, что в большинстве своем питательные среды имеют жидкую и твердую фазы, возникает необходимость тонкого измельчения твердых компонентов — отрубей, муки грубого помола, рыбно-костной муки, соевого жмыха В этих целях с большой эффективностью используют роторно-пульсационный аппарат, или РПА, через который пропускают суспензию компонента перед завариванием или после него Благодаря этой процедуре не только избавляются от комков, образовавшихся при заваривании, но и повышают степень использования сырья, равно как и получают возможность применять отдельные виды сырья (например, среды с рыбно-костной мукой, плохо пoA aюIциe я стерилизации из-за большого количества рыбьих глаз) [c.313]

Г. Разведение в растворе. Жидкая питательная среда заливается в колбы на V4—Vs их объема и после стерилизации инокулируется смывом 5—7-диевиой культуры с косого агара, где полностью закончилось спорообразование. Инокулированные колбы помещают на качалку на 48 часов при температуре 28— 30 С и 105 оборотах в минуту. Через двое суток инокулят готов для его переноса в емкости большего размера. Инокуляцию лучше B ero производить 2,5%-ным вегетативным инокулятом [244]. В инокуляционных резервуарах оседает 1% инокулята (3 л на 300 л питательной среды). Для промышленного разведения используется среда, содержащая 2,5% сахарозы, 2,5—3,5% кукурузного экстракта и 0,68% КН2РО4 [247]. [c.206]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология