Бромфеноловая синяя бумага

Широкое распространение в настоящее время получил так называемый зональный электрофорез — электрофорез на твердом носителе (на бумажных полосах, агаре, крахмале, акриламиде), пропитанном буферным раствором с нужным значением pH. Положение белков на бумаге или геле определяют путем фиксации и последующего окрашивания их тем или иным красителем (обычно бромфеноловым синим, ами-довым черным или кумасси синим). Количество белка в каждой фракции можно ориентировочно определять по интенсивности окраски связанного красителя. Такое определение не дает строго количественного соотношения белковых фракций, так как количество красителя, связываемого различными белками, неодинаково. [c.89]

Второе сочетание ведут с раствором натриевых солей 1,6- и 1,7-нафтиламинсульфокислот (берут избыток) при температуре 18—20° при слабокислой реакции на бромфеноловую синюю бумагу. Такую кислотность создают содой, которую постепенно добавляют в реакционную массу до перехода желтого окрашивания реактивной бумаги в синее. Недопустимо появление щелочной реакции, при которой наступает разложение диазосоединения. [c.182]

Бромфеноловая синяя бумага окрашена в серый цвет, соответствующий рН=4, и окраска ее изменяется на желтую при действии минеральных и наиболее сильных органических кислот (при рН=3) н на синюю—при действии оснований или солей сильных оснований (при рН=5). [c.14]

Хроматография R 0,76 бумага типа быстрая система диэтиловый эфир — уксусная кислота — вода (13 3 1). Проявление опрыскивают очень слабым щелочным раствором бромфенолового синего после высушивания проявляют парами иода. [c.139]

Для идентификации белковых зон реплику помещают на 3—5 мин в раствор бромфенолового синего краситель отмывают дважды 5%-ным раствором СНзСООН и закрепляют 2%-ным уксуснокислым натрием, приготовленным на 10%-ном растворе СНзСООН. После тщательного промывания в холодной проточной воде хроматографическую бумагу высушивают и измеряют расстояние, пройденное каждым белком от точки нанесения до центра белкового пятна. Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс величину отношения и Лст (/а — длина пути, пройденного данным белком /ст — расстояние,( пройденное стандартным белком, например цитохромом с или химо-трипсиногеном А), по оси ординат — логарифм молекулярной массы данного белка. Определив расстояние белковой зоны исследуемого елка от старта, по калибровочному графику находят его молекулярную массу. [c.119]

Затем в колбу приливают 5—6 капель раствора метилового желтого или бромфенолового синего, или смешанного индикатора. В другую коническую колбу наливают такой же объем анализируемой воды и столько же индикатора, сколько было введено в первый раствор ставят обе колбы на белую бумагу и титруют жидкость в первой колбе кислотой до тех пор, пока цвет ее не станет отличаться от цвета жидкости во второй колбе. Если известен качественный и приближенный количественный состав пробы, то лучше приготовить раствор- свидетель , состав которого должен быть близким к составу пробы в конце титрования, прибавить в этот раствор индикатор и титровать пробу до совпадения ее окраски с окраской раствора- свидетеля . [c.31]

Индикаторная бумага. Полоски фильтровальной бумаги смачивают 0,1%-ным раствором бромфенолового синего и высушивают при комнатной температуре. [c.249]

При работе с сефадексами применяют как нисходящую, так и восходящую хроматографию. Для обнаружения результатов хроматографии разделяемые вещества переносят на лист хроматографической (бумаги путем контакта бумаги с поверхностью геля в течение обычно 1 мин. Затем бумагу сушат 30 мин при 80°С и обрабатывают соответствующими реагентами, например в случае белковых соединений 0,1%-ным раствором бромфенолового синего в смеси метанола и уксусной кислоты (9 1). Затем бумагу промывают водой, подкисленной уксусной кислотой. [c.112]

Ход определения. Отобрав такой объем пробы, чтобы в нем содержалось от 50 до 200 мкг катионоактивного вещества, разбавляют (или упаривают) до 100 мл и переносят в делительную-воронку вместимостью 250 мл. Приливают 10 мл цитратного буферного раствора, 5 мл 0,1 н. соляной кислоты, 2 мл раствора бромфенолового синего и 50 мл хлороформа. При анализе сильно загрязненных сточных вод рекомендуется брать меньший объем пробы, чтобы не получилась эмульсия при экстрагировании. Взбалтывают 3 мин равномерно, но не слишком сильно. Полученный хлороформный экстракт фильтруют через фильтровальную бумагу, предварительно смоченную хлороформом, отбрасывая первые 5 мл фильтрата. Измеряют оптическую плотность оставшегося раствора при X = 416 нм. [c.356]

Окраску электрофореграмм производят в ванночках с красителем (бромфеноловым синим) в течение 20—30 минут (полоски нельзя класть друг на друга или сворачивать). Краску, не связавшуюся с белком, отмывают в 2% растворе уксусной кислоты, меняя ее 3—4 раза, пока участки бумаги, не содержащие белка, полностью не отмоются от краски (фон [c.34]

Б. Непосредственно в сточной воде. Отбирают такой объем пробы, чтобы в нем содержалось не более 30 мкг МН4, помещают в делительную воронку и разбавляют до 50 мл безаммиачной водой. Затем добавляют по каплям разбавленную (1 3) хлористоводородную кислоту до pH = 3 (применяют в качестве внешнего индикатора бромфеноловый синий или бумагу конго). Затем вводят 5 мл хлороформа, встряхивают [c.69]

МЛ анализируемой смеси, содержащей 2—50 мг восстанавливающих сахаров, наносят в центр кружка фильтровальной бумаги ватман 3 (17 см в диаметре). Проявление проводят в эксикаторе обычным способом, применяемым в круговой хроматографии. В качестве растворителей можно применять смеси н-пропанол + + этилацетат + вода (6 1 3) или н-бутанол+ муравьиная кислота + вода (5 1 4). По окончании проявления бумагу высушивают и обрабатывают раствором, полученным растворением 40 мг бромкрезолового пурпурного (или бромфенолового синего) и 100 мг борной кислоты в 100 мл метанола, и содержащим 7,5 мл [c.257]

Бромфеноловая синяя и бромкрезоловая пурпуровая бумаги [c.14]

Бромфеноловый синий. На I л раствора берут 100 мг красителя, 50 мл уксусной кислоты и 50 г сульфата цинка. Для развития окрашивания полоску бумаги прогревают при 120° в течение 30 мин или обрабатывают водным раствором, содержащим 1 % двуххлористой ртути, 0,05% бромфенолового синего и 2% уксусной кислоты. Избыток красителя удаляют 0,5%-ным раствором уксусной кислоты и элюируют зоны 0,5%-ным (по объему) раствором карбоната натрия или 50%-ным (по объему) метанолом. Абсорбцию измеряют при 585 ммк. [c.251]

Опубликованные об электрофорезе водорастворимых красителей статьи посвящены в основном не красителям для текстильных материалов, а индикаторам и красителям для бактериологических исследований. Применялись органические растворители для изучения миграции Эозина, Метиленового голубого. Жирового красного О и Ализаринового синего смеси абсолютный этанол-ле-дяная уксусная кислота) [126]. Эозин V был разделен на три компонента на бумаге ватман № 1 при градиенте потенциала 3,5 В/см за 2—15 ч с использованием в качестве электролита 0,1 н. аммиак (pH 11,1) [127]. Исследовано также поведение краски Райта (Эозин + Метиленовый голубой), Кристаллического фиолетового и Фуксина, которые разделили непрерывным электрофорезом на ряд фракций. Разделена смесь Метилового оранжевО го и Фенолфталеина [124]. Применен непрерывный электрофорез для разделения Бромфенолового синего и Крезолового красного [124]. Описано хроматографическое и электрофоретическое раЗ деление многих сходных веществ, а также интересный процесс для проверки наличия добавок, иллюстрированный на парах таких красителей, как Оранжевый II — Метиленовый голубой и Амидо-черный — Фуксин [128]. Разделены акридиновые красители в 0,1 н. соляной кислоте при градиенте потенциала 8 В/см за 1— [c.98]

Примечание. Опыт проводили на ленинградской бумаге для хроматографии марки М , проявитель — этилацетат — ледяная уксусная кислота — вода (2 1 1), содержащий бромфеноловый синий (0,015%) и ацетат натрия (0,05%). [c.132]

Диазосоставляющей в этом красителе служит метаниловая кислота, первой азосоставляющей — ж-толуидин и второй азосоставляющей— -аминобензоил-И-кислота. Метаниловую кислоту диазотируют, к раствору л-диазобензолсульфокислоты приливают из мерника л-толуидин, взятый с избытком 5% от теории, и массу размешивают в течение нескольких часов при температуре 20—23° при слабокислой реакции на бромфеноловую синюю бумагу. Выделяющуюся при сочетании кислоту нейтрализуют, постепенно добавляя соду. Избыток соды недопустим, гак как в щелочной среде образуется диазоаминосоединение, причем вытек пробы массы на фильтровальной бумаге окрашивается в желтый цвет. По окончании сочетания ж-толуидин находится в ясном избытке (желтовато-красное окрашивание с п-нитродиазобензолом). Образовавшийся краситель выпадает в осадок цвета бордо. [c.179]

Получение хроматограммы. На предварительно приготовленную фильтровальную бумагу (см. стр. 153) наносят три капли раствора кислот на расстоянии 2 см одна от другой и четвертую каплю на расстоянии 4 см от предыдущей. Кроме того, на расстоянии 3 см от четвертого пятна наносят капли свидетелей . Развитие хроматограммы проводят так же, как и при кат ествен-ном определении. Полоску бумаги, на которой находятся четвертое пятно и свидетели , отрезают, опрыскивают 0,04%-ным раствором бромфенолового синего и высушивают при комнатной температуре. Затем проявленную часть прикладывают к непроявленной и из последней вырезают полосы бумаги, где находятся пятна лимонной и яблочной кислот, положения которых определяют по пятнам свидетелей . [c.154]

Бумагу использовали в качестве пористой среды для изоэлектрического фракционирования в искусственных градиентах pH [115, 116], однако такая методика не получила распространения, частично из-за трудности создания искусственного градиента pH. Более удовлетворительные результаты получаются при использовании синтетических амфолитов-носителей, дающих естественный градиент pH. По сравнению с гелем бумага более удобна в обращении. Кроме того, здесь легче удалять амфолиты, поскольку белки могут быть подвергнуты тепловой денатурации непосредственно на бумаге к тому же белки легче снимаются с бумаги после фракционирования. Для. окрашивания белков на бумаге в присутствии амфолитов-носителей. применяют водный раствор, содержащий 0,05% бромфенолового синего, 1% хлористой ртути и 2% уксусной кислоты (117] при этом предварительно высушенную в сушильном шкафу электро-фореграмму погружают в горячий 10%-ный раствор ТХУ. Интенсивность окраски можно увеличить, выдерживая высушенную бумагу в атмосфере аммиака. [c.336]

Индикаторные бумаги бромфеноловая синяя и бромкрезоловая пурпуровая представляют собой фильтровальную бумагу, пропитанную соответственно 0,1%-ными растворами индикатора бромфенолового синего или бромкре-золового пурпурового. [c.14]

Полученный раствор переносят в сосуд для титрования и подкисляют концентрированной азотной кислотой (не содержащей хлора) так, чтобы pH раствора был равен 5. Величину pH проверяют индикаторными бумагами (бромкрезоловой пурпуровой или бромфеноловой синей—см. стр. 14) или потенциометрически. Затем к исследуемому раствору прибавляют 2,5—3 г нитрата бария (не содержащего хлора) и жидкость титруют 0,1 н. расвором AgNOg (см. стр. 403) при непрерывном перемешивании. [c.404]

Показано, что для разделения сывороточных белков удобны буферы с pH 8,6—9. Для полосок шириной 6 см и длиной 30 см рекомендуется плотность тока 1 мА на 1 см ширины полоски при ионной силе ц = 0,075 и времени разделения 16 ч. При плотности тока 2 мА/см для разделения в барбитуратном буферном растворе с ионной силой ц,=0,05 достаточно 7 ч [86]. Барбиту-ратный буферный раствор (ц=0,075, pH 0,6) можно приготовить путем растворения 2,76 г диэтилбарбитуровой кислоты и 15,45 г диэтилбарбитурата натрия в 1 л воды. Боратный буферный раствор с pH 9,0 готовят путем растворения 8,8 г буры и 0,62 г борной кислоты в 1 л воды. Полоску влажной бумаги промокают между листами фильтровальной бумаги и затем на две трети расстояния от анода до катода наносят образец из расчета около 4 мкл на 1 см ширины. В качестве индикатора миграции можно использовать сывороточный альбумин, окрашенный небольшим количеством бромфенолового синего. После высушивания в термостате при 100 °С электрофореграмму окрашивают, погружая на 10 мин в 1%-ный раствор бромфенолового синего [c.341]

Колориметрическое измерение при помощи буферных растворов. Для определения pH неизвестного раствора в первую очередь должен быть найден подходящий индикатор. Могут быть использованы только индикаторы, дающие промежуточную окраску между крайне кислой и щелочной окрасками. Начинающие часто забывают это элементарное правило и поэтому делают очень серьезные ошибки. Если приближенное значение pH исследуемого раствора неизвестно, порядок его величины должен быть приблизительно установлен для того, чтобы выбрать надлежащий индикатор. Несколько простых опытов, как правило, дадут требуемые данные. К небольшой части раствора прибавляют каплю фенолфталеина. Если индикатор остается бесцветным, это значит, что pH раствора меньше 8,0 (см. интервалы pH индикаторов, стр. 42). Другую пробу производят с метиловым оранжевым нли бромфеноловым синим. Если один из этих индикаторов приобретает щелочную окраску, это значит, что pH больше 4,5 следовательно, pH неизвестного раствора лежит между 4,5 и 8,0. Еще несколько опытов с метиловым красным (pH в пределах 4,4—6,0), бромти-моловым синим (6,0 — 7,6) и феноловым красным (6,8—8,0) дадут приближенное значение pH и определят индикатор, который должен быть применен для точного установления pH исследуемого раствора. Вместо испробования растворами индикаторов небольших количеств жидкости, как правило, можно пользоваться индикаторной бумагой (фенолфталеин нли тимо.товый синий, лакмус или конго красный и т. п.), применяя капельный метод. Универсальный индикатор также очень удобен для нахождения приближенного значения pH. [c.54]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология