Изоионная точка, определени

Отсюда следует, что существует такое значение кислотности среды (pH), при котором аминокислота в растворе находится в виде цвиттер-иона, т. е. суммарный заряд молекулы равен нулю. Значение pH, при котором это имеет место вследствие определенного положения протона в молекуле), называется изоионной точкой (p/ ). Точно так же, если при определенных экспериментальных условиях молекула не несет электрического заряда (например, не обладает электрофоретической подвижностью), значение pH, при котором это происходит, называется изоэлектрической точкой (р/е). Для водных растворов аминокислот [c.32]

Цель работы. Определение изоионной точки желатина. [c.134]

Работа IV. 5. Определение изоионной точки полиамфолита [c.134]

По этим соображениям становится понятной важность точного определения изоэлектрической точки белка, однако, поскольку связывание различного рода ионов (особенно многовалентных и органических) значительно изменяет положение изоэлектрической точки белка, она не является постоянной величиной. Для обозначения pH чистого белка в свободной от солей воде употребляется термин изоионная точка (р1). Прямое определение этой константы трудно, а часто и невозможно, осуществить, так как многие белки в отсутствие солей нерастворимы кроме того, проводимость обессоленных растворов крайне низка. Обычно изоионную точку определяют косвенно — путем измерения изоэлектрической точки при различных концентрациях нейтральных солей и экстраполяции к нулевой концентрации [38, с. 122]. К сожалению, в различных источниках наблюдается значительный разброс величин р1 для БСА, например, от 4,7 [94, с. 318] до 5,3 [95, с. 55]. [c.550]

Изоионная точка. Теоретически изоионную точку определяют как величину pH, при которой число положительных и отрицательных групп, образующихся только за счет отщепления или присоединения прогона, становится одним и тем же. Чтобы найти изоионную точку экспериментально, необходимо иметь дело с изоионным препаратом. Последний получают электродиализом или, еще лучше, с помощью смеси ионообменных смол, добиваясь, чтобы из раствора были удалены все ионы, кроме водородных и гидроксильных. В повседневной практике приняты два определения изоионной точки. Согласно первому из них, изоионная точка—это то значение pH раствора изоионного препарата. [c.119]

Удобным и точным методом определения заряда белка является потенциометрическое титрование, в котором заряд определяется по количеству связываемой белком сильной кислоты или щелочи. Это количество эквивалентно количеству связываемых белком (или диссоциированных) протонов. За начало отсчета принимается так называемая изоионная точка, в которой количества связанных с молекулой и диссоциированных протонов равны. Эту точку можно определить, определив pH раствора белка, диализованного против дистиллированной воды. Если pH отличается от 7 не более чем на 3 единицы, а концентрация белка достаточно высока, можно пренебречь количеством протонов и гидроксилов в растворе и считать, что белок нейтрален. [c.60]

Правда, в белке имеются различные кислые и основные группы, но формула (У.8) остается приближенно правильной, если отнести значения и к наиболее сильным группам. Для полного определения молярного содержания различных ионогенных групп в белке и их констант диссоциации измеряют ход поглощения ионов Н и ОН в широком интервале pH (примерно pH = 2—12), прибавляя к белковому раствору различные количества кислоты или щелочи и измеряя равновесное значение pH водородным или стеклянным электродом, что позволяет построить кривую электрометрического титрования белков. Значение pH, при котором избирательное поглощение Нили ОН ионов по кривой титрования равно нулю, т. е. оба иона поглощаются в равной мере, и составляет изоионную точку белка. [c.102]

Как видно из изложенного, изоэлектрическая точка белка зависит от наличия посторонних ионов, в связи с чем она непостоянна. Для того чтобы обозначить pH чистого белка, растворенного в воде в отсутствие солей, употребляют термин изоионная точка [32]. Однако определение изоионной точки также встречает много затруднений и часто невозможно, поскольку многие белки нерастворимы в отсутствие солей. Кроме того, проводимость бессолевых растворов белков очень низка. Изоионная точка карб-оксигемоглобина крови овцы лежит при pH 7,6, в то время как изоэлектрическая точка того же белка в аммонийно-фосфатном буфере варьирует в пределах 6,70—7,16 [33]. [c.85]

Для чистого водного р-ра белка, в к-ром заряд макромолекул определяется только ионами Н+ и ОН , И. т. совпадает по смыслу и по методам определения с изоионной точкой. В присутствии солей, когда заряд белковых макромолекул определяется также ионами электролитов, обе изоточки изменяются различным образом. Напр., при преимущественной адсорбции анионов и щелочном смещении изоионной точки на белковой макромолекуле остаются избыточные отрицательные заряды анионов, сообщающие ей электрофоретич. подвижность в сторону анода. Для ее компенсации следует сообщить макромолекуле эквивалентное количество положительных зарядов, что может быть достигнуто подкислепием раствора, т. к. из более кислого р-ра белок адсорбирует больше Н+-И0Н0В. Т. обр., И. т. сместится в более кислую область, т. е. в другом направлении, чем изоионная точка. При преимущественной адсорбции белком катиона соли И. т. смещается в щелочном направлении, а изоионная точка — в кислом. Смещение И. т. в р-рах солей можно иногда также наблюдать косвенными [c.106]

Для чистого водного р-ра белка, в к-ром заряд макромолекул определяется только ионами Н+ и ОП , П. т. совпадает по смыслу и по методам определения с изоионной точкой. В присутствии солей, когда заряд белковых макромолекул онределяется также ионами [c.106]

ИИТ по определению может быть измерена, как pH изоионного раствора, т. е. раствора полиамфолита в воде в отсутствие посторонних ионов. ИИТ может быть также определена из кривых титрования полиамфолита. Выполняя титрование при разных ионных силах раствора, получают серию кривых титрования, которые различаются наклоном в кислой и щелочной областях, но все пересекаются в одной точке, соответствующей ИИТ. Иначе ее можно определить путем подбора раствора с таким значением pH, которое не изменяется при добавлении в раствор полиамфолита. Необходимо учитывать, что ИИТ в отличие от ИЭТ зависит от концентрации раствора. С уменьщением концентрации полиамфолита в изоионном растворе средний заряд макромолекулы увеличивается и соответственно изменяется значение pH раствора (в кислой области pH уменьшается, в щелочной — увеличивается). Однако при достаточно высокой концентрации (порядка 1 %) заряд макромолекул в изоионном растворе становится очень малым и ИИТ практически перестает зависеть от концентрации раствора. [c.128]

Дайте определение изоионной и изоэлектрической точек аминокислот. Какими свойствами обладают аминокислоты при различных значениях pH [c.92]

Приведенное выше определение изоионной точки не указывает на способ экспериментального измерения соответствующих pH. Изоионные точки белков могут быть определены различными методами. Наиболее употребительный из них состоит в следующем. Раствор белка подвергают тщательному электродиали- [c.159]

Из данных титрования от изоионной точки до точки максимального связывания протонов вблизи pH 1,5 можно определить содержание основных групп (имидазольных, аминных и гуанидиновых) независимо оттого, какие группы действительно играют роль в процессах ионного равновесия. На первый взгляд, кажется непонятным, что общее число основных групп определяется титрованием в кислой области pH. Для пояснения этого необходимо вернуться к определению изоионной точки белка. Как уже говорилось выше, изоионная точка белка соответствует тому значению pH, при котором число протонов, освобождаемых кислотными группами белковой молекулы, равно числу протонов, связываемых ее основными группами. Это означает, что в изоионной точке число протонов, освобождаемых молекулой белка, равно максимальному заряду, который может получить белок за счет максимального связывания протонов. Поскольку же при pH максимального поглощения кислоты (pH максимального связывания протонов) все азотсодержащие группы несут положительный заряд, тогда как все другие группы являются незаряженными, постольку заряд белковой молекулы максимален и число азотсодержащих групп может быть определено по количеству связанной кислоты. Иными словами, общее число основных групп равно числу эквивалентов кислоты, необходимых для титрования от изоионной точки до pH 1,5. [c.162]

ИЗОИОННАЯ ТОЧКА (изопротонная точка) — концентрация водородных ионов в растворе белка, при к-рой белок поглощает из раствора одинаковое количество ионов П+ и ОН . Это определение приложимо не только к белкам, но и к другим амфотерным полиэлектролитам, напр, к полилизин-полиглутамиповой к-те, к сополимерам акриловой к-ты и 2-винилпиридина и др. Вследствие равного поглощения обоих видов ионов белок или другой амфотерный полиэлектролит при внесении в такой раствор не из.меняет ого pH, что является одним из методов экспериментального определепия И. т. Дру-1ой метод определения И. т. заключается в том, что к белковому р-ру добавляют различные количества 1 ислоты или щелочи и измеряют равновесное pH водородным или стеклянным электродом. По кривым титрования белков измеряют ход поглощения ионов И и ОН в зависимости от pH и определяют значение pH, пря к-ром поглощение обоих ионов равно нулю (кривая поглощения пересекает ось pH). [c.74]

Помимо ИЭТ кислотно-основные свойства белков характеризует также изоионная точка. Согласно определению, изоион-ная точка соответствует pH раствора изоионного белка в воде или в растворе какого-либо другого вещества, которое само по себе при растворении в воде не дает водородных или гидроксильных ионов [767]. [c.213]

В отличие от аминокислот у белков изоионная точка обычно не совпадает с изоэлектрической. По определению изоионная точка — это такая величина pH, при которой молекула белка содержит равное число положительно и отрицательно заряженных групп, образовавшихся в результате связывания основных групп слрото-нами и соответствующей диссоциации кислотных групп. Изоэлект-рическая точка — это pH, при котором белок электрофоретически неподвижен. При ее определении белок растворяют в буферном растворе. В этом растворе всегда содержатся низкомолекулярные анионы и катионы, способные связываться с многочисленными заряженными группами белка. В таких условиях наблюдаемое в изоэлектрической точке равновесие зарядов частично обусловлено их компенсацией связавшимися с молекулой белка анионами и катионами. [c.24]