ДНБ-аминокислотные на силикагеле

При выборе методов разделения пептидов учитывают физ.-хим. свойства, кол-во и длину молекул разделяемых соединений. Для первичного фракционирования смесей коротких пептидов, содержащих до 15-20 аминокислотных остатков, в большинстве случаев используют ионообменную хроматографию на катионитах. Дальнейшее разделение и очистку проводят с помощью хроматографии и электрофореза на бумаге или пластинках с тонким слоем целлюлозы или силикагеля. [c.251]

Подвижная фаза всегда водная, обычно забуференная, содержит некоторое, очень малое (= 0,1—1,0 мМ), количество металла-комплексообразователя. Известную пользу иногда приносит применение смесей воды с такими органическими растворителями, как метанол или ацетонитрил, в качестве модификаторов. На линейном полиакриламиде, содержащем аминокислотные фрагменты и Си(П) и сорбированном на силикагеле, лигандный обмен также проходит медленно [114]. [c.146]

В эту группу входят сорбенты для ионообменной хроматографии, аминокислотного анализа, ионной хроматографии, разделения энантиомеров и для других специфических задач. Имеющаяся информация об этих сорбентах носит весьма поверхностный характер. В качестве матрицы в этой группе сорбентов используют как силикагель с полимерным покрытием, так и макропористые полимеры с привитыми ионогенными группами. [c.235]

Для хроматографии на силикагеле колхицеина и его производных рекомендована гомогенная смесь бутилового спирта, воды и уксусной кислоты, 4 2 1 09 успешно использовали эту смесь при идентификации некоторых аминокислотных производных колхицина. [c.105]

Что касается весьма распространенных методов определения аминокислотного состава с помощью хроматографии на бумаге (БХ) [12] и хроматографии в тонком слое силикагеля (ТСХ), то ими при исследовании пищевых продуктов для получения количественных данных пользоваться не рекомендуется, поскольку они не могут обеспечить необходимой точности анализа. При составлении настоящих таблиц данные, полученные этими методами, не использовались. [c.189]

Если нельзя провести полный анализ аминокислотной последовательности, то первичную структуру исходных белков можно сравнить по гомологии пептидов, полученных при ферментативном или химическом расщеплении. При структурном анализе чаще всего используют трипсин, так как действие его специфично он разрывает только те пептидные связи, в которых участвуют карбоксильные группы лизина и аргинина. Полученные триптические пептиды разделяют двумерным электрофорезом и хроматографией в тонком слое целлюлозы или силикагеля. [c.83]

Помимо аминокислотных хиральных фаз для разделения энантиомеров описано применение силикагеля с привитыми (В)-пеницилламином [279], Ь(+)-винной кислотой [280[ и силикагеля со слоем полистирола с привитыми молекулами N,N -дибензил-1,2-пропандиамина [280]. [c.444]

Матрицы для ЖХВД. К их числу можно отнести особо мелкозернистые, с малым разбросом диаметров сферические ионообменники на основе полистирола (например типа Aminex ), специально разработанные для использования в аминокислотных анализаторах и жидкостных хроматографах высокого давления. Для последней цели чаще всего применяют модифицированные присадкой ионогенных групп пористые силикагели. [c.251]

Для анализа методом ХТС сильнее защищенных пептидов (до 10 аминокислотных остатков) пригоден по Гуттману [143] слой из силикагеля и алокса при разделении диметилформамидом или ледяной уксусной кислотой, содер- [c.409]

Аминокислотный анализ проводился либо методом бумажной и тонкослойной (на силикагеле) хроматографии гидролиза с последующим проявлением пятен аминокислот раствором нингид-рина и изменением плотности смытых с сорбента нингид-риновых производных [17], либо на автоматическом кислотном анализаторе. [c.362]

В работах [122—124] описано разделение на слоях силикагеля, нанесенных на пластмассовые полоски. Элюирование при этом проводилось смесями гептан—пропионовая кислота—дихлорэтан (58 17 25) и гептан—бутанол—75 %-ная муравьиная кислота (50 30 9) [122] верхний слой смеси бутилацетат—фор-мамид—пропионовая кислота—вода (160 6 3 3) удобен при разделении кислых аминокислотных ФТГ-производных смеси ксилол—метанол (8 1) полезны при идентификации пролина, а смесь ксилол—изопропанол (7 2) —лучший из этих трех смесей элюент общего назначения. Элюирование всеми перечисленными смесями проводилось в камере с ненасыщенной атмосферой на полосках Eastman hromatogram 6060 [123]. Авторы работы [124] использовали для разделения смеси гептан—дихлорэтан—пропионовая кислота (9 5 6) и ксилол—метанол (8 1). После разделения проб хроматограммы изучали в УФ-свете, обрабатывали их реактивом на основе азида иода и смеськ> 1,7 %-ный нингидрин—коллидин—уксусная кислота (15 2 5). В результате эти авторы смогли идентифицировать продукты семи стадий разложения, протекающих в автомате Эдмана за [c.503]

В дальнейших исследованиях Сенгер разработал, а впоследствии довел до полного совершенства, метод, позволивший определять последовательность аминокислотных остатков в полипетидных цепях. При этом он исходил из следующих, сформулированных им на симпозиуме по аминокислотам и белкам в Колд Спринг Харборе в 1949 г. положений Методом динитрофенилирования можно определить природу концевых групп путем идентификации ДНФ-аминокислот (динитрофенил-амино-кислот.—Л. Ш.), полученных при гидролизе ДНФ-белка. Однако, если гидролизовать ДНФ-белок лишь частично, можно получить ДНФ-пептиды, исследование строения которых дает указания относительно природы аминокислот, расположенных в пептидных цепях вблизи концевых групп. ДНФ-пептиды довольно хорошо поддаются отделению от незамещенных пептидов и аминокислот путем экстракции органическим растворителем из подкисленного раствора и хроматографическим фракционированием на силикагеле. Смеси ДНФ-пептидов, полученные этим способом, гораздо менее сложны, чем продукты частичного гидролиза необработанного белка, так как отделяются только пептиды, содержащие М-концевые группы исходного белка. Для дальнейшего упрощения анализа последовательности аминокислот вместо инсулина были взяты очищенные фракции А и В, образующиеся при его окислении и содержащие только по одной концевой группе [37]. [c.133]

Триптофан претерпевает некоторое разрушение независимо от того, применяется ли в качестве гидролизующего агента кислота или щелочь. В присутствии углеводов его разрушение горячей кислотой обычно протекает сполна [14, 134]. Тирозин при этих -условиях такл е изменяется г134], а цистеин в присутствии углеводов является более лабильным, чем в других случаях [135]. Тирозин может также претерпевать разрушение при щелочном гидролизе [136]. Предполагается, что в горячей кислоте триптофан в присутствии некоторых других аминокислот может быть менее стабилен, чем когда он одни. Доступ кислорода может также усиливать его стабильность и влиять на количество получающегося гумина. Следует ожидать также иЗхМенения других аминокислот, если происходит такое взаимодействие с триптофаном. При обработке кислотами триптофан, вероятно,, переходит в дикарбоновую аминокислоту [137]. В связи с этим аминокислотным распадом интересны полосы, имеющие характер артефактов при хроматографии на силикагеле [78]. Тристрам [138] показал распад аргинина при кислотном гидролизе в присутствии углевода. Шейн и Берг [121а] при кислотном гидролизе [c.57]

Одной из ее модификаций является хроматография, основанная на гидрофобном взаимодействии носителя (фенил- или октилсефароза) с соответствующими неполярными аминокислотными радикалами белковых молекул. Применение эффективных сорбентов (различные производные силикагеля) и высокого давления при элюировании с них белков привело к возникновению ряда вариантов жидкостной хроматографии высокого разрешения. [c.30]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология