глицеральдегид фосфат

D-глиЦеральдегид-фосфат дегидро -геназа [c.450]

Глицеральдегид-фосфат дегидрогеназа Мозг Мышца G3P G3P NAD Pi 3 3 600 2000 44 70 46 15 23 0,08 > 10 [c.308]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФОСФОТРИОЗ (ГЛИЦЕРАЛЬДЕГИД-З-ФОСФАТА [c.38]

На основании полученных данных рассчитывают кажущуюся константу равновесия, принимая, что концентрации глицеральдегид-З-фосфата и диоксиацетонфосфата равны [c.64]

О-глицеральдегид-З-фосфат НАД -оксидоредуктаза фосфорилирующая, КФ 1.2.1.12) [c.253]

Для получения растворимых денатурированных субъединиц апо-фермент глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназы из дрожжей в концентрации 2,5—3,5 мг/мл инкубируют в течение 1 ч в 8 М растворе мочевины (за полнотой денатурации следят по изменению активности фермента). Полностью денатурированные субъединицы добавляют к суспензии иммобилизованных мономеров в 8-кратном избытке по отношению к связанному с сефарозой белку. Эту процедуру проводят трижды с 30-минутными интервалами между добавками при постоянном перемешивании и температуре 25° С. Несвязавшийся белок отмывают 0,1 М Ма-фосфатом. Определяют содержание белка и активность в препарате после реассоциации. [c.303]

Работами Кальвина, Башама и Бенсона было показано, что одна молекула рибулеза-дифосфата и одна молекула СОг реагируют при помощи соответствующих энзимов и образуют две молекулы фосфоглицериновой кислоты. Эти две молекулы превращаются в две молекулы глицеральдегид-фосфата по реакции, вовлекающей в себя две молекулы ЫАВФН и две молекулы АТФ [9]. [c.347]

Ферменты катализируют биохимические реакции стереоспеци-фично. Вследствие этого асимметрический синтез в природе происходит повсеместно и чаще всего в единственном направлепии, Следовательно, большинство природных соединений оптически активно, потому что получены ири каталитическом действии ферментов, обладающих определенной трехмерной структурой, В самом общем виде можно сказать, что между субстратом и активным центром фермента существует точное геометрическое соответствие, Например, фермент триозофосфатизомераза катализирует превращение оптически неактивного диоксиацетонмонофос-фата до о-глицеральдегид-З-фосфата [59]. Субстрат имеет прохиральный центр , и один атом водорода специфически переносится с одной стороны (ге-поверхности) двойной связи на карбонильную [c.203]

Глюкоза подвергается действию АТФ и превращается в глюко-зо-6-фосфат. Это соединение под влиянием фермента (оксоизоме-разы) перестраивается так, что образуется фруктозо-6-фосфат. Повторное действие АТФ переводит его в фруктозо-1,б-дифосфат. Для этого требуется участие фермента — фосфофруктокиназы. Фермент альдолаза разрывает шестичленную цепь атомов углерода, так что образуются трехуглеродные соединения — фосфогли-цериновый альдегид и фосфодиоксиацетон (он под действием фермента триозофосфатизомеразы переходит в фосфоглицериновый альдегид). Далее на фосфорилированный глицеральдегид воздействует важный фермент — дегидрогеназа. Активная группа этого фермента, переносящая водород, построена по тому же общему типу, по какому построены и фрагменты нуклеиновых кислот она содержит органические основания, остатки углевода рибозы и фосфатную группу и обозначается НАД. [c.367]

При метаболизме фруктозы в организме большая ее часть фосфорилируется в печени при воздействии особого фермента — фруктокиназы в положении С-1 и образует фруктозо-1-фосфат. Считают, что при участии специфической альдолазы фруктозо-1-фосфат превращается в диокси-ацетонфосфат и глицеральдегид. Глицеральдегид восстанавливается до глицерина, затем через глицерол-З-фосфат окисляется до диоксиацетонфосфата. [c.126]

Центральной реакцией анаэробного превращения углеводов является реакция окисления глицеральдегид-З-фосфата в 1,3-дифосфогли-цериновую кислоту, которую катализирует глицеральдегид-З-фосфат-дегидрогеназа (КФ 1.2.1.12). Дегидрогеназу ингибируют алкилирующие агенты, например йодацетат, который необратимо связывает SH-rpyn- [c.52]

Расщепление фруктозо-1,6-дифосфата на две фосфотриозы катализирует альдолаза (КФ 4.1.2.13). При этом образуется глицеральдегид-3-фосфат и диоксиацетонфосфат. Альдолаза мышц не требует для проявления ферментативной активности ионов металлов или каких-либо кофакторов. При исследовании превращения фруктозо-1,6-дифосфата в качестве источника альдолазы используют диализованные экстракты мышц. В процессе диализа из экстракта удаляются компоненты адени-ловой системы НАД и неорганический фосфат, в отсутствие которых становится невозможным дальнейшее превращение глицеральдегид-З-фосфата под влиянием глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназы. Альдолаза относительно термостабильна. Ферментативное расщепление фруктозо-1,6-дифосфата обратимо, положение равновесия с повышением температуры смещается в сторону образования фосфотриоз, константа равновесия при этом возрастает. [c.63]

Однако следует принять во внимание, что в диализованном экстракте присутствует высокоактивный фермент — триозофосфат изомераза, катализирующий реакцию изомеризации фосфотриоз. Равновесие этой реакции сильно сдвинуто в сторону фосфодиоксиацетона. В положении равновесия отношение концентраций фосфодиоксиацетона и гли-церальдегид-З-фосфата равно 22 1. Поэтому концентрации диоксиацетонфосфата и глицеральдегид-З-фосфата при расчете кал ущейся константы равновесия альдолазной реакции выражают как [c.64]

Для определения количества образующегося фруктозо-1,6-фосфата вместо а-глицерол-З-фосфатдегидрогеяазы может быть использована дегидрогеназа 3-фосфоглицеринового альдегида. В этом случае активность фосфофруктокиназы измеряют по скорости восстановления НАД+ (см. определение активности глицеральдегид-З-фосфатдегидро-геназы на с. 253). [c.240]

Активность альдолазы может быть измерена двумя методами химическим, основанным на определении концентрации продуктов реакции — фосфотриоз (по нарастанию щелочнолабильного фосфорл), и энзиматическим, в сопряженной системе, содержащей помимо альдолазы и фруктозо-1,6-дифосфата также НАД+ и глицеральдегид-З-фосфат-дегидрогеназу или НАДН и глицерол-З-фосфатдегидрогеназу. Скорость альдолазной реакции определяют по нарастанию или убыли НАДН. [c.246]

Триозофосфатизомераза — фермент гликолиза, катализирует обратимую реакцию превращения -глицеральдегид-З-фосфата в диоксиацетонфосфат [c.249]

Триозофосфатизомераза пивных дрожжей имеет молекулярную массу 53 000 Да, состоит из двух неидентичных субъединиц. Оптимум pH в триэтаноламин-НС1-буфере — 7,0—8,5 и 7,6—9,5 соответственно при определении активности с использованием в качестве вспомогательного фермента глицерол-З-фосфатдегидрогеназы или глицеральде-гид-З-фосфатдегидрогеназы. Константа равновесия реакции изомеризации D-глицеральдегид-З-фосфата при pH 7,5 и 25°С равна 19. Кт для этого субстрата при тех же условиях — 1,27x10 М, а для диоксиацетонфосфата — 1,23X10 М. Л ° 1см при 280 нм равна 9,9. [c.249]

Активность триозосфосфатизомеразы можно измерять по убыли или образованию НАДН в зависимости от того, используется ли в качестве субстрата глицеральдегид-З-фосфат, а в качестве вспомогательного фермента — глицерол-З-фосфатдегидрогеназа или соответственно диоксиацетонфосфат и глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназа. В обоих случаях за ходом реакции следят спектрофотометрически, определяя изменение оптической плотности при 340 нм (с. 7). [c.249]

В спектрофотометрическую кювету помещают реакционную смесь содержащую (указаны конечные концентрации) 80 мМ буфер, 0,25 мМ НАДН, 0,1 мл глицеральдегид-З-фосфата и 0,05 мл глицерол-З-фосфатдегидрогеназы. Перемешивают и устанавливают величину оптической плотности при 340 нм по шкале спектрофотометра на отметке 0,4—0,5. Добавляют 0,05 мл триозофосфатизомеразы (общий объем пробы — [c.250]

Глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназа — тетрамер (м. м.= 144 000 Да), построенный из химически идентичных субъединиц. Центральную роль в катализе выполняет цистеиновый остаток. Фермент ингибируется ионами тяжелых металлов. Константы Михаэлиса гли-церальдегид-З-фосфатдегидрогеназы из мышц кролика для НАД+ — 13 мкМ, для глицеральдегид-З-фосфата — 90 мкМ, для фосфата — [c.253]

Получение апофермента. Для отщепления НАД+, прочно связанного с мышечной глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназой, препарат фермента обрабатывают норитом (активированный уголь), 500 мг норита суспендируют в 10 мл 10 мМ фосфата натрия, содержащего 5 мМ ЭДТА, pH 7,2. Через 2—3 мин надосадочную жидкость декантируют для удаления мелких частиц норита. Эту процедуру повторяют [c.256]

Субстратами-донорами двууглеродного остатка являются ксилу-лозо-5-фосфат, фруктозо-6-фосфат, седогептулозо-7-фосфат и др. Функцию субстратов-акцепторов выполняют 0-рибозо-5-фосфат, D-глицеральдегид-З-фосфат, 1)-эритрозо-4-фосфат и др. [c.279]

Таким образом, количество молей восстановленной формы НАД, вступившей в реакцию, равно количеству молей глицеральдегид-З-фосфата, образовавшегося под действием транскетолазы. Убыль восстановленного НАД определяют спектрофотометрически по уменьшеник величины оптической плотности при 340 нм (с. 7). [c.280]

В спектрофотометрическую кювету помещают реакционную смесь следующего состава (указаны конечные концентрации) 25 мМ глицил-глициновый буфер (pH 7,6), 0,3 мМ НАД, глицеральдегид-З-фосфат-дегидрогеназа — 5 Е на пробу, 3 мМ хлористый магний, 5 мМ арсе- [c.281]

Препараты олигомерных ферментов, связанных с матрицей через одну из субъединиц, могут быть использованы для получения иммобилизованных форм ферментов разной степени олигомерности. Сравнение каталитических свойств этих форм и их стабильности позволяет сделать выводы о роли четвертичной структуры в функционировании ферментов-олигомеров. Диссоциация олигомерного иммобилизованного фермента может быть индуцирована специфическими воздействиями (например, диссоциация иммобилизованной глицеральдегид-З-фосфат-дегидрогеназы из дрожжей на димеры) или обработкой денатурирующими реагентами (например, мочевиной). [c.300]

Препараты иммобилизованной глицеральдегид-З-фосфатдегидроге-назы промывают 10-кратным объемом 0,15 М Na l. Добавляют к осажденному центрифугированием гелю равный объем раствора АТФ и инкубируют суспензию при 4° С в течение 2 ч. После окончания инкубации препараты промывают 0,1 М Na-фосфатом для отделения денатурированного белка и АТФ до полного исчезновения поглощения элюата при 260 и 280 нм. В полученных препаратах иммобилизованных димеров определяют активность и содержание белка. Такого рода определения можно проводить и в процессе инкубации с АТФ для выяснения особенностей протекания процесса диссоциации иммобилизованного тетрамера. [c.301]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология