Изменение активности ферментов

Чем обусловлено изменение активности фермента при изменении pH среды Как определить оптимум pH для действия фермента [c.72]

Интересным развитием идеи использовать ферментные метки является контроль соотношения связанный свободный> путем изменения активности фермента в результате связывания в конъюгат с антителом или дополнительного связывания антиферментных антител. Такие способы анализа не нуждаются в этапе разделения, а значит, можно упростить проведение определения. Разработано несколько способов гомогенного ферментативного иммунного анализа (ФИА). [c.595]

Преимущества этого метода перед другими состоят в следующем при его применении сохраняется постоянное значение pH и, следовательно, нет опасности изменения активности фермента вследствие изменений его ионизации метод сразу дает постоянную по большому числу точек кинетическую кривую, позволяющую рассчитывать необходимые кинетические константы ферментативной реакции метод позволяет измерять кинетику процесса практически при любых условиях расход времени на измерение скорости реакции весьма невелик при условиях нулевого порядка реакции обычно бывает достаточно проводить титрование в течение 3— 4 мин., зафиксировав 8—10 точек расхода щелочи метод может быть использован для исследования кинетики взаимодействия холинэстераз с ингибиторами. [c.149]

Изменение активности ферментов путем ковалентной модификации. [c.490]

Для получения растворимых денатурированных субъединиц апо-фермент глицеральдегид-З-фосфатдегидрогеназы из дрожжей в концентрации 2,5—3,5 мг/мл инкубируют в течение 1 ч в 8 М растворе мочевины (за полнотой денатурации следят по изменению активности фермента). Полностью денатурированные субъединицы добавляют к суспензии иммобилизованных мономеров в 8-кратном избытке по отношению к связанному с сефарозой белку. Эту процедуру проводят трижды с 30-минутными интервалами между добавками при постоянном перемешивании и температуре 25° С. Несвязавшийся белок отмывают 0,1 М Ма-фосфатом. Определяют содержание белка и активность в препарате после реассоциации. [c.303]

Имеющее регуляторное значение изменение активности фермента часто усиливается при помощи каскадного механизма первый фермент воздействует на второй, второй — на третий и т. д. Этот механизм обеспечивает быстрое появление больших количеств активной формы последнего фермента цепи. Примером каскадного механизма может служить механизм свертывания крови [89], представленный схематически на рис. 6-16. Мы видим последовательность, состоящую из пяти ферментов и начинающуюся с фактора XII, в которой каждый фермент активирует следующий путем отщепления небольшой части пептидной цепи (ограниченный протеолиз). На конечном этапе тромбин воздействует на фибриноген и, отщепляя небольшой пептид, превращает его в фибрин — специализированный белок, который спонтанно свертывается. Какие факторы препятствуют выходу каскадного механизма из-под контроля Почему при небольшом кровоподтеке весь протромбин в нашем организме не превращается в тромбин и не происходит свертывания всей крови Здесь, несомненно, имеет место та же ситуация, что и в случае сАМР, который быстро удаляется из системы с помощью специфического фермента существуют механизмы удаления активированного фермента из каскадной последовательности, представленной на рис. 6-16. Помимо этого имеется специальная ферментная система, растворяющая сгусток крови при заживлении раны [89]. [c.72]

При патологии мышечной ткани можно наблюдать определенную закономерность в изменении активности ферментов в мышцах уменьшается активность ферментов, локализованных в саркоплазме незначительно изменяется активность ферментов, связанных с митохондриями заметно возрастает активность лизосомальных ферментов. Наконец, показано, что при многих заболеваниях мышечной системы наступают сдвиги в системе цАМФ снижается содержание цАМФ в мышечной ткани, повышается [c.659]

Бол сложно организованной является регуляция, основанная на изменении активности фермента или белкового фактора путем его химической модификации. Чаще всего для этой цели используют реакции фосфорилирования белков с помощью специальных, специфичных к определенным белкам или группам белков — протеинкиназ (подробнее см. 10.2). [c.420]

Изменение активности ферментов при действии на организм химических веществ может выражаться либо уменьшением активности, либо увеличением активности, либо изменениями в соотношениях активности ряда ферментных систем. [c.239]

Характер изменения активности ферментов (скорости ферментативной реакции под влиянием различной концентрации ионов Н" [c.103]

Было показано, что оба фермента могут быть отделены один от другого и являются двумя самостоятельными ферментами [4, 5]. Так, нагревание при 55° (pH 4,8) вызывало инактивацию фермента, имеющего оптимум действия при pH 6,8—7,0, и не оказывало влияния на активность кислого фермента (оптимум действия pH 4,8) (рис. 1, Л) и наоборот, хранение ферментного препарата при pH 7,0 и 0° приводило к снижению или даже исчезновению активности кислого фермента без изменения активности фермента с оптимумом действия при pH 7,0 (рис. 1, Б). [c.92]

Оба типа регуляции-индукция и репрессия, с одной стороны, и изменение активности фермента, с другой,-приводят к почти одинаковому результату они влияют на пропускную способность того или иного метаболического пути. Индукция и репрессия действуют медленно, [c.473]

Обычно зависимость скорости реакции от pH выражается кривой с одним (иногда двумя) максимумами. Концентрация водородных ионов, при которой наблюдается максимальная скорость реакции, называется оптимальной (оптимум pH). Величина оптимума pH является характерной для каждого фермента, хотя и изменяет свое значение от концентрации субстрата и температуры. В сильно кислой и сильно щелочной среде падение активности фермента может быть связано с необратимой денатурацией белковой молекулы. Вблизи же оптимума pH изменение активности фермента может быть обратимым и при изменении концентрации водородных ионов в сторону оптимального значения активность фермента также полностью восстанавливается. [c.229]

Необходимо, однако, еще раз напомнить, что при всех. определениях активности фермента, которая при прочих равных условиях пропорциональна содержанию фермента в растворе, для получения сравнимых данных следует самым тщательным образом придерживаться раз навсегда установленных для данной методики условий опыта (температуры, кислотности среды и т. п., стр. 116, 117). В противном случае неизбежно более или менее резкое изменение активности фермента и получение неправильных результатов. [c.124]

Одновременно была установлена важная роль имидазольного остатка в ферментативных реакциях подобного типа. При помощи модельных систем было доказано, что /г-нитрофенилацетат можно гидролизовать также производными имидазола, например пептидами, в которых имеется гистидиновый остаток, или полимерами этой аминокислоты. Кривая диссоциации имидазоль-ной группы в зависимости от изменений pH вполне соответствует кривой изменений активности фермента в зависимости от pH среды. Этот факт, естественно, свидетельствует о важной роли имидазольных радикалов в реакции. [c.83]

Вещества, получающиеся в результате ферментной реакции, в той или иной степени похожи на субстрат, который связывается с активной группой фермента. Следовательно, возможно и связывание продуктов с ферментом, блокирующее его активные участки. Это явление называется конкурентным торможением. Оно делает возможным изменение активности фермента за счет обратимой адсорбции на его поверхности продуктов реакции и стерических аналогов субстрата. [c.114]

Другим распространенным способом регулирования является изменение активности фермента посредством отщепления и присоединения целого фрагмента пептидной цепи. Так, неактивные формы протеолитических ферментов — зимогены, отщепляя низкомолекулярный пептид, пре вращаются в активные протеазы. Моно и Жакоб называют этот процесс молекулярным превращением и считают его одним из средств регулирования деятельности внутриклеточных ферментов. Молекулярные превра- [c.114]

Подострые отравления. Поступление 115 мг/кг с кормом а течение 2 месяцев вызвало изменение активности ферментов сыворотки крови и дистрофические изменения печени и головного мозга. Ежедневный прием 8 добровольцами [c.134]

Подострые отравления. Систематическое скармливание крысам 45 мг/кг привело через 2 месяца к изменениям активности ферментов сыворотки крови и появлению признаков дистрофических изменений в печени и головном мозге (Галета). [c.173]

Др. тип регуляции активности ключевых ферментов-их хим. модификация (напр., обратимое ковалентное фосфорилирование, гликозилирование). Нек-рые ферменты активны в модифицированном, а ряд ферментов - в немодифици-рованном состоянии. Хим. модификация и превращение модифицированного фермента в исходную форму катализируются разными ферментами, чаще всего аллостерич. природы, к-рые, т. обр., выступают в роли регуляторов активности ферментов. Так, катализирующая фосфорилирование белков, в т. ч. ферментов, цАМФ-зависимая протеинкиназа-тетрамерный белок, состоящий из двух типов субъединиц (полипептидов). Фермент активен лишь после связывания двух молекул циклич. аденозинмонофосфата (цАМФ) с двумя регуляторными субъединицами в результате такого связывания фермент диссоциирует на две каталитически активные субъединицы и димер, с к-рым связаны две молекулы цАМФ. Т. обр., изменение активности ферментов путем их хим. модификации дополняет аллостерич. регуляцию и составляет часть каскадного механизма регуляции. Хим. модификацию ферментов осуществляют также специфич. протеазы, катализирующие ограниченный протеолиз и тем самым инактивирующие ферменты (напр., разрушая апоформы ферментов) или, наоборот, превращающие неактивные проферменты (напр., проферменты пищеварит. протеаз-пепсина и трипсина) в каталитически активные формы. [c.219]

Натриевая соль 2,4-Д вызывала значительно меньшие изменения активности фермента, чем 2,4-Д и 2,4,5-Т кислоты, что согласуется с гербицидной активностью этих соединений. [c.65]

Существование температурных пределов, вне которых нормального созревания не происходит, вряд ли может вызывать удивление, если мы вспомним, что реакции, протекающие при созревании, катализируются ферментами. Ферменты, как известно, имеют температурный оптимум, который отражает равновесие между тепловой активацией, необходимой для химической реакции, и тепловой инактивацией фермента в результате денатурации. Температурные оптимумы, характерные для каждого фермента, изменяются в зависимости от времени, в течение которого фермент находится при данной температуре, а также от некоторых других условий, например от pH. В столь сложной системе, как плод, содержащей много ферментов, активность различных ферментов и скорости катализируемых ими реакций при изменении температуры должны изменяться по-раз-пому. Повренедение под действием высокой или низкой температуры может быть вызвано, например, накоплением вещества, обычно вовлекаемого в дальнейший обмен причиной же этого накопления может быть изменение активности фермента (или ферментов), катализирующего в нормальных условиях превращение данного [c.496]

Действие производных триазина на чувствительные растения в токсических дозах вызывает нарушение процесса фотосинтеза, разрушение хлоропластов, ослабление фотолиза воды, уменьшение содержания углеводов, угнетение дыхания тканей, изменение активности ферментов, приводящее к преобладанию гидролитических, процессов над синтетическими. [c.325]

Показано, что глюконеогенез может регулироваться и непрямым путем, т.е. через изменение активности фермента, непосредственно не участвующего в синтезе глюкозы. Так, установлено, что фермент гликолиза пируваткиназа существует в 2 формах—L и М. Форма L (от англ. liver—печень) преобладает в тканях, способных к глюконеогенезу. Эта форма ингибируется избытком АТФ и некоторыми аминокислотами, в частности аланином. М-форма (от англ. mus le—мыщцы) такой регуляции не подвержена. В условиях достаточного обеспечения клетки энергией происходит ингибирование L-формы пируваткиназы. Как следствие ингибирования замедляется гликолиз и создаются условия, благоприятствующие глюконеогенезу. [c.343]

Если определение содержания субстрата параллельно с определением активности фермента произвести по тем или иным причинам не удается, можно рекомендовать оценку полученных изменений активности фермента методом нагрузочных проб . Смысл приема состоит в том, чтобы создать в организме определенный избыток субстрата. При этом если уменьшение активности фермента несущественно, то в условиях избытка субстрата организм не будет поврежден и, наоборот, при значимом уменьшении активности фермента избыток введенного извне субстрата вызывает отчетливые изменения жизнедеятельности или даже гибель организма. В качестве примера можно привести опыт, выполненный М. А. Ахматовой с этилендиамином. Этот яд в дозе 300 мг/кг у белых крыс вызывал некоторое изменение активности мо-ноаминоксидазы печени. Следовало оценить значимость указанного изменения. Вопрос был решен с использованием нагрузочной пробы . Отравленным этилендиамином белым крысам был дважды введен внутрибрюшинно субстрат моно-аминоксидазы — серотонин в дозе 30 мг/кг (табл. 23). [c.240]

Фермент Продол жи-телыюсть обработки ультразвуком, мин Газ, которым насыщался раствор фермента Молекулярный вес фермента Изменение молекуляр-ис го нееа. Изменение активности фермента [c.250]

Комбинированное действие. Индукция микросомальных монооксигеназ (с помощью фенобарбитала) оказывает защитное влияние от повреждения печени в сыворотке крови в 4 раза снижается активность сорбитолдегидрогеназы, в 5 раз — фрукто-зомонофосфатальдолазы, в 2 раза — АлАт и щелочной фосфатазы и в 4 раза снижается концентрация билирубина. В лизосомах печени частично восстанавливается осмотическая и термальная стабильность мембран. Изменения активности ферментов в сыворотке крови, а также в лизосомах и цитозоле гепатоцитов носили адаптивный характер (Курышева и др.). [c.478]

Расчет с помощью графического метода, предложенного А. П. Брестки-ным с сотр. [1, 2], позволяет определить промежуточные константы скорости реакции. Однако в ряде случаев наблюдается несоответствие между экспериментами и расчетными данными по изменению активности фермента во времени. Подобное несоответствие, по-видимому, может быть следствием по меньшей мере трех причин неточности экспериментальных данных при изучении активности фермента во времени, неточности метода расчета, возможности иного, чем описывается схемой [I], механизма взаимодействия ФОИ с холинэстеразами. [c.333]

Механизм взаимодействия холинэстераз с ФОИ описывается схемой реакции с одним промежуточным фермент-ингибиторным комплексом. При расчете промежуточных констант по методу Бресткина наблюдается несоответствие между экспериментальными расчетными данными по изменению активности фермента во времени. В работе приведены сравнительные данные расчета промежуточных констант скоростей с помощью метода Бресткина и градиентного метода с аналитическим интегрированием соответствующей системы обыкновенных дифференциальных уравнений по автокодовой программе для ЭЦВМ и Минск-2 . [c.413]

В сыворотке крови была обнаружена другая специфическая холинэстераза, отличающаяся от находящейся в эритроцитах АХЭ наряду с другим также и тем, что ее наивысшая активность проявляется при иной концентрации субстрата Основная функция АХЭ, как это установлено, заключается в быстром снижении концентрации ацетилхолина, образовавшегося при передаче нервного импульса физиологическая функция ХЭ еще полностью не выяснена. "при отравлении фосфорорганическимн соединениями мо>кет происходить снижение активности ХЭ, которое, однако, не находится в определенной связи с тяжестью клинических симптомов поражения. Так, снижение активности ХЭ на 85% от начальной было установлено при отсутствии симптомов поражения. С другой стороны, при ингаляционном отравлении появление тяжелых признаков поражения наступало без заметного изменения активности фермента 2. Однако, в общем, определение активности ХЭ в сыворотке крови дает хорошую возможность диагностировать отравления фосфорорганическимн веществами для профилактических или терапевтических целей. Угнетение активности фермента на 40% может служить признаком начала поражения, естественно, если исключены другие факторы, снижающие его активность, такие, как анемия, гепатит, или разные другие инфекционные заболевания. [c.161]

Одним из уникальных свойств белка является его способность к денатурации — утрате ряда характерных физи-ко-химических и биологических свойств при незначительных воздействиях, не нарушающих системы пептидных связей. Следует, однако, отметить, что известно немало белков, отличающихся очень высокой устойчивостью к денатурации, например, белки Термофильных бактерий, трипсин, химотрипсин и многие другие. Представляется более правильным считать денатурацию проявлением наиболее общего свойства белков. А именно, для всех белков не только при денатурации, но и при выполнении нативными белками их функций в живом организме характерна способность к существенным изменениям физико-химических и биологических свойств без одновременного изменения состава и без расщепления пептидных связей в молекуле. Примерами могут служить реакции сверхосаждения актомиозина под действием АТФ, резкие изменения активности ферментов под влиянием незначительных изменений условий среды и многие другие. Это общее свойство белков должно быть непременно признано их характерным отличием. [c.9]

Отсюда следует, что ретроингибитор имеет прямое отношение к созданию и поддержанию определенной структурной организации или конформации ферментной молекулы и что изменения активности фермента при аллостерических взаимодействиях могут быть связаны с изменением этой конформации. Высокая чувствительность аллостерически регулируемых ферментов ( по сравнению с каталитической активностью) может определяться их структурной организацией высокого порядка (например, четвертичной, составленной из нескольких белковых субъединиц). [c.244]

Токсичность для теплокровных следующая СД50 для крыс при оральном воздействии—300—2000 мг/кг. Нанесение на кожу в течение 14 дней по 100 мг/кг вызывает некоторое изменение активности ферментов. Не оказывает отдаленных последствий на потомство. [c.99]

Принимая во внимание ключевую позицию, которую занимает в регуляции биосинтеза ДНК процесс образования тимиди-лой кислоты (ТМФ), и тот факт, что синтез ТМФ из дезоксиу-ридилата (УМФ) является основным для большинства органов и тканей, мы, совместно с Винецким, изучали переход дУМФ в ТМФ в норме и после облучения. Нам представлялось интересным проследить за корреляцией в изменении активности ферментов как анаболизма, так и катаболизма ТМФ и его предшественников на одной модели и в одни и те же сроки после облучения. [c.137]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология