Стандартные буферы

В конечном счете правильность измерений pH обусловливается постоянством параметра К. Для оптимальных условий, когда значения pH стандартного буфера и раствора неизвестной пробы по существу идентичны и когда любые изменения жидкостного диффузионного потенциала сведены по мере возможности к минимуму, погрешность измерения э. д. с. гальванического элемента может достичь приблизительно 1 мВ. При этом погрешность определения pH неизвестного раствора будет равна около 0,02. Следует отметить, что промышленность выпускает рН-метры, в инструкциях к которым можно прочесть, что-значение pH определяются с воспроизводимостью 0,003 единицы ила лучше. Необходимость измерений изменений pH с такой воспроизводимостью возникает при изучении какой-либо системы в тщательно контролируемых условиях. Однако на практике такая воспроизводимость не должна приниматься за правильность измерений, последняя будет не лучше, чем одна или две сотых доли единицы pH. [c.377]

Рис. 1. УФ-спектры п стандартном буфере

При проведении градуировки рН-метра потенциал стеклянного электрода измеряют сначала в растворе, содержащем стандартный буфер. С помощью кнопки регулировки нуля на приборе устанавливают показание, соответствующее pH раствора. Затем электрод извлекают из него, промывают, помещают во второй стандартный буферный раствор с другим pH и кнопкой регулировки усиления рН-метра устанавливают показание, соответствующее pH этого буфера. Далее электрод вновь извлекают из раствора, промывают и 190 [c.190]

Состав и свойства пяти первичных стандартных буферов при 25°С [c.350]

В этом уравнении К включает первый, второй и пятый источники потенциалов, перечисленные ранее, плюс жидкостный диффузионный потенциал и потенциал асимметрии. Однако величина К не может быть точно известна, так как жидкостный диффузионный потенциал и потенциал асимметрии являются неопределенными. Поэтому в практике определения pH обязательно проводят калибровку, сравнивая pH неизвестного раствора с pH стандартного буфера. Если в гальванический элемент налить стандартный буфер, то получим [c.376]

Еэл)в = -К + 0,059(рН)з где индекс з относится к стандартному буферу. [c.376]

Дополнительным стандартным буфером с pH, равным 1,68, может служить 0,05 М раствор тетраоксалата калия. Указанные значения pH относятся к температуре 25 °С. [c.399]

Калибруют рН-метр по стандартному буферу. [c.53]

Проверяют величину pH приготовленного буфера. При этом разница температур приготовленного и стандартного буферов не должна превышать 0,5 °С. [c.53]

И, следовательно, его можно использовать для того, чтобы согласовывать показания прибора для двух стандартных буферов. В идеале рН-метр, настроенный на 7 по буферу с pH 7, должен показать точно 4, если его проверяют по буферу с pH 4, и точно 10, если буфер имеет pH 10. В противном случае плавной регулировкой температурного компенсатора можно установить правильное показание при повторном контроле при pH 7 и вновь при pH 4 или 10. По своей сути эта процедура пригодна для обычных температур. [c.328]

Таким образом, открывается возможность определения величины а вместе с нею и значений раН неводных растворов с использованием стандартных буферов в воде, даже при отсутствии [c.156]

Доводить температуру буфера, используемого для калибровки рН-метра, до температуры измеряемой пробы, поскольку pH буфера зависит от температуры. Так, pH стандартного фосфатного буфера равен 6,98 при 0°С, 6,88 при 20 °С и 6,84 при 37 °С. Значения pH стандартных буферов при различных температурах приведены в Справочнике по химии и физике [16]. [c.166]

Если проба во время измерения перемешивается на магнитной мешалке, то таким же путем нужно перемешивать стандартный буфер. [c.166]

Прибор следует откалибровать с помощью буферных растворов с известными значениями pH. Для этой цели часто применяют готовые жидкие или твердые буферы с указанными на упаковках величинами pH, однако такой дорогостоящий и отнюдь не лучший способ калибровки использовать вовсе не обязательно. В табл. 16.1 приведены некоторые стандартные буферы [10], имеющие надежные значения pH. Если электрод дает линейные показания, то для калибровки прибора в пределах нужного диапазона pH можно использовать один стандартный буфер. Однако поведение электрода редко бывает идеальным, поэтому целесообразно использовать два стандартных буфера (например, с pH 4,00 и 6,88), установив тем самым соответствующий диапазон pH измеряемых растворов. [c.183]

Таблица 16.1. Значения pH стандартных буферов при 20 °С [3]

Для определения катионов а) стандартный буфер — 0,003 М НМОз б) буфер для определения щелочноземельных металлов — 0,001 М раствор дихлоргидрата п-фенилендиамина (0,724 г дихлоргидрата п-фенилендиамина в 4 л деионизованной воды) или 0,002 мг этилендиамина и 0,003 М раствор ННОз. [c.201]

Полученный таким образом клеточный осадок ресуспендируют в стандартном буфере для ретикулоцитов (РСБ) и в течение 10 мин дают клеткам набухнуть. Цитоплазматическую фракцию клеток получают в гомогенизаторе Даунса. [c.281]

Указанные трудности были разрешены после принятия определения ИЮПАК, основанного на рекомевдациях Роджера Г. Бейтса. Согласно этим рекомендациям, pH определяют относительно стандартного буфера, для которого pH рассчитьтают как для бесконечно разбавленного на основе измерений в ячейке с жидкостным соединением (стеклянный электрод в паре с каломельным). Измеренное значение pH не стрсго вдентично ран, поскольку потенциал жидкостного соединения и активность индивидуального иона нельзя оценить, не прибегая к нестрогим допущениям. [c.150]

Национальным бюро стандартов ШA(NBS), ныне Национальным институтом стацдартов и технологий (NIST), рекомендован ряд стандартных буферов с точно известными значениями pH, Наиболее важные из них Гфиведены в табл. 4.2-3. [c.155]

Взаимодействие аргинил- РНК-синтетазы из Е.соИ с субстратом аргинином, содержащим радиоактивную метку [ С]-аргинина, исследовали с использованием метода равновесного диализа. Диализ проводили в кювете, разделенной на два равных по объему отсека целлюлозной мембраной, проницаемой для а згинина и непроницаемой для фермента. В кювету запива.пи раствор субстрата различной концентрации в стандартном буфере. Далее в один из отсеков кюветы вносили раствор фермента в стандартном буфере. Концентрация фермента во всех опытах была постоянной, равной 6,5 мкМ. После проведения диализа и установления равновесия определяли концентрацию арпшина в отсеке, не содержащем фермент. [c.126]

Приготовление стандартного буфера для калибровки pH-метра. Стеклянный электрод, используемый в имеющихся в продаже рН-метрах, дает электрический сигнал, величина которого пропорциональна концентрации ионов водорода. Для того чтобы по величине сигнала можно было правильно судить о величине pH, необходимо провести калибровку стеклянного электрода, используя для этого стандартные растворы с известной концентрацией ионов водорода. Определите, какие количества (в граммах) первичного кислого фосфата натрия (НаН2Р04-Н20 мол. масса 138,01) и вторичного кислого фосфата натрия (МазНРО мол. масса 141,98) необходимы для приготовления 1 л стандартного буфера с pH 7,00, в котором суммарная концентрация фосфатов равна 0,100 М. (Мол. масса смеси фосфатов будет зависеть от их соотновдения). Величина рК первичного кислого фосфата при 25°С равна 6,86. [c.106]

Александров и Спирина [343] предложили составы нескольких юбразцов стандартных буферов и исследовали кислотность разбавленных растворов в системах пропанол-2 —вода, использовав для этой цели метод Вольта-потенциалов [344]. [c.96]

Напряжение является прямолинейяой функцией pH. Наклон линии изменяется с температурой. При 25°С напряжение изменяется ка 59 милливольт при изменении температуры на единицу. Необходимо калибровать стеклянный электрод по стандартному буферу. [c.143]

SSG—0,15 М раствор Na l в 0,015 М цитратном буфере, pH 7 впереди стоящая цифра означает, во сколько раз увеличена пли уменьшена концентрация стандартного буфера 1 X SS . [c.149]

Изотопные эффекты в ферментативных реакциях, которые проводят в окиси дейтерия, нельзя интерпретировать строго, хотя из данных достаточно детального исследования можно с различной степенью уверенности сделать определенные выводы. Прежде всего наобходимо определить, насколько наблюдаемый изотопный эффект отражает изменения характеристик различных ионогенных форм фермента или субстрата при замене воды на окись дейтерия. Кислотность растворов в окиси дейтерия mojkho определить при помощи обычных стеклянных электродов, если к наблюдаемым показаниям рН-метра, который прокалиброван обычным стандартным буфером в водном растворе, прибавить поправку, равную 0,4 [74]. Желательна проверка этой процедуры непосредственным сравнением показаний рН-метра, полученных с 0,001М НС1 в воде и с 0,001 М D 1 в окиси дейтерия. Различие в константах ионизации субстрата в воде и в окиси дейтерия можно определить непосредственно соответствующее различие активных форм фермента можно обнаружить лишь из зависимости ферментативной активности от pH (или pD), либо путем изучения изотопного влияния на кислотность ионогенных групп, о которых известно, что они важны для проявления ферментативной активности. Сопоставление изотопных эффектов ионизации различного типа ионогенных групп было сделано Бантоном и Шайнером [17]. В окиси дейтерия большинство кислот в 3 — 5 раз слабее, чем в воде, что соответствует разнице в значении p/iT 0,5...0,7 единицы. [c.218]

Кинетические измерения проведены в стандартном буфере спектрофо-то.метрическим методом. Необходимость забуферивания среды вызвана [c.250]

На рис. 1 приведен спектр в стандартном буфере исходного фенил-р-нитровинилкетона, полученный экстраполяцией кривых поглощения — время к началу реакции, а также спектры продуктов реакции I и II, которые достаточно постоянны во времени. Как было найдено, скорости превращения I и II в III и IV, соответственно, малы по сравнению со скоростью взаимодействия фенил-Р-нитровинилкетона с метиловым спиртом (табл. 1) и их можно не учитывать при расчетах к, Кх и Кхх. Из рис. 1 видно, что область спектра, где фенил-р-нитровинилкетон имеет высокое поглощение, а поглощение образующихся продуктов относительно мало, расположена между 230—240 ммк. Эта область удобна еще и тем, что в ней можно выбрать такую длину волны, при которой коэффициент молярной экстинкции продукта присоединения I равен сумме коэффициентов экстинкции продукта замещения II и нитрита натрия. Такому условию соответствует длина волны 232 ммк, нри которой коэффициент экстинкции образующихся продуктов составляет 0,53-10 . По изменению во времени поглощения реакционной смеси при 232 ммк можно проследить скорость взаимодействия фенил-р-нитровинилкетона с метиловым спиртом в стандартном буфере, причем соотношение образующихся продуктов не играет никакой роли. Следует отметить, что в области 247—249 ммк, где поглощение исходного соединения и продуктов реакции почти одинаково, оптическая плотность реакционной смеси практически не изменяется во времени, что может служить еще одним подтверждением правильности предлагаемой схемы реакции. [c.251]

Спектр фенилэтинилкетона не изменяется в стандартном буфере в течение 24 час. за это время фенил-р-нитровинилкетон практически полностью превращается в I и II. Таким образом, один из возможных механизмов образования II по схеме [c.253]

Кинетические измерения. Из навески фенил-Р-нитровинилкетона приготовляли 5-10 М раствор двукратным разбавлением стандартным буфером соответствующей температуры. Раствор переносили в термостатированную кювету и время от времени измеряли его оптическую плотность при 232 и 273 ммк. Момент прибавления буфера считался началом реакции. Значения констант скоростей сохранялись при использовании более концентрированных растворов фенил-р-питровинилкетона (до 2,5-10 М ) Пример расчета констант суммарной скорости исчезновения феппл-р-нитровинилкетона к) и скоростей образования продуктов реакции КЛ и Кц) приведен в табл. 3. [c.255]

Определение скорости отщепления азотистой кислоты от фенил-а-метокси-Р-нитроэтилкетона (К ц) в стандартном буфере при 25° С [c.256]

Примечание. Приготовление 0,3мол раствора ацетатного буфера с pH 4,50 0,05. 17,5 г ацетата натрия и 10,3 г ледяной уксусной кислоты растворяют в воде в мерной колбе емкостью 1 литр, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. pH определяют потенциометрически одновременно со стандартным буфером с pH в пределах 4,0—5,0. [c.981]

Отберите аликвоты обработанных фосфатазой плеч и убедитесь, что они не способны лигироваться в течение ночи цри использовании стандартных буферов и условий для лигирования (разд, 2.2.3). В качестве контроля вы можете использовать аликвоту, полученную на этапе 1. [c.49]

Проведите контрольную рестрикцию половинок агарозных блоков различными концентрациями МЬо1 (1 ч при 37°С в микропробирках объемом 300 мкл со стандартным буфером для рестрикции, используя разные количества фермента от [c.102]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология