Положительная селекция клеток

Факт прохождения положительной селекции в коре определяет дальнейшую дифференцировку на субпопуляции D4 D8 и D4 D8 , которая осуществляется в основном в переходной области — кортико-медуллярном соединении под влиянием взаимодействия с дендритными клетками и макрофагами. Эти клетки получили название одинарных позитивов . Здесь же проходит и отрицательная селекция тимоцитов (см.ниже). В результате прошедших дифференцировочных событий в медуллярной области накапливаются клетки с фенотипом D4 D8 TKP (Т-хелперы) и D4 D8 TKP (Т-киллеры), часть которых мигрирует в периферические лимфоидные органы. [c.163]

Данные в пользу положительной селекции на слабое узнавание собственных МНС в тимусе менее убедительны, чем данные об отрицательной селекции, элиминирующей в тимусе те клетки, которые слишком сильно связываются с собственными молекулами МНС или с собственными МНС в ассоциации с другими собственными молекулами. Наиболее убедительные доказательства того, что сильно реагирующие с собственными МНС Т-клетки элиминируются в тимусе, были получены в генетических исследованиях на мышах. К одному из таких исследований привело случайное наблюдение один из У-сегментов, кодирующих в геноме вариабельную область Р-цепи Т-клеточного рецептора, придает любой экспрессирующей его Т-клетке способность к сильному узнаванию специфических молекул МНС класса II (обозначаемых Н-2Е) независимо от В- и Д-областей Р-цепи и от У-области а-цепи. (Это позволяет предположить, что У-сегменты для Т-клеточных рецепторов могли быть отобраны в ходе эволюции на способность кодировать рецепторы, связывающие молекулы МНС.) Не все линии мышей, однако, экспрессируют Н-2Е. У линий, не имеющих Н-2Е, Т-клетки со специфическим У-сегментом Р-цепи выявляются как среди незрелых, так и среди зрелых лимфоцитов тимуса, а у линий, экспрессирующие Н-2Е, - только в популяции незрелых лимфоцитов. Ио-видимому, Т-клетки такого типа элиминируются еще до их созревания в тимусе. [c.279]

Использование полужидкой среды позволяет также осуществлять селекцию мутантов, не способных к хемотаксису [2, 18]. В случае положительного хемотаксиса эти мутанты (а также неподвижные мутанты) не реагируют на сформированный клетками градиент субстрата и остаются в центре чашки Петри, откуда их можно извлечь для субкультивирования и очистки. В случае отрицательного хемотаксиса мутанты, не способные к хемотаксису, можно выделить из прозрачной зоны, окружающей кусочек твердого агара. [c.372]

Селекция гибридом, образующих специфические антитела, обычно происходит в два этапа. Сначала культуральную жидкость анализируют на содержание антител, специфичных к данному иммуногену. Положительные супернатанты затем подвергают скринингу с использованием тест-панели антигенов, чтобы обнаружить, связываются ли выявленные антитела селективно с интересующим исследователя антигеном. Лунки с нужными гибридомами неизменно составляют только небольшой процент от общего числа лунок с растущими или антителопродуцирующими клетками. Важно идентифицировать нужные гибридомные клоны как можно скорее, в противном случае непроизводительно расходуются время и материалы для размножения большого числа бесполезных линий. Успех процедуры гибридизации для получения специфических антител в большой степени зависит от тщательного выполнения скрининга. Необходимо выявить данные антитела н отбросить ненужные клоны быстро и без сомнения. [c.134]

Механизмы, ответственные за селекцию Т-клеток в тимусе, неизвестны. Положительная селекция происходит, возможно, через посредство сигналов для роста или выживания, которым эпителий тимуса снабжает слабо связывающие Т-клетки В случае отрицательной селекции клетки, происходящие из костного мозга, могут действовать как извращенные антиген-представляющие клетки, которые не активируют, а убивают любую узнающую их Т-клетку. Обладающие таким свойством клетки, пазваппые клетками вето, были выявлены в опытах in vitro. [c.280]

Клетки коры — это в основном малые, плотно упакованные тимоциты. Они находятся в непосредственных контактных отношениях с кортикальными эпителиальными клетками, обладающими разветвленными выростами, которые окружают тимоциты. Выраженная экспрессия на поверхности эпителиальных клеток молекул I и П классов МНС является определяющим фактором положительной селекции клеток тимуса (см. ниже). В результате взаимодействия эмигрантов из субкапсулярной области с эпителиальными клетками коры происходит активная, одновременная [c.162]

Завершившаяся реорганизация генов а- и р-цепей Т-клеточного антиген-распознаюшего рецептора (ТКР) обеспечивает формирование множества клонов с отличающимися по специфичности рецепторами. Среди этих клонов представлены те, рецепторы которых способны распознавать собственные молекулы I класса МНС (1), молекулы II класса МНС (2) и не обладающие такой способностью (3). Последние представлены в подавляющем большинстве. Антигенсвязывающий цен ф ТКР имеет участок, взаимодействующий с молекулами I или II классов (более толстая линия) и участок, взаимодействующий с антигенным пептидом (тонкая линия). Среди обилия формирующихся клонов отбираются только те, которые способны взаимодействовать с молекулами МНС. Все прочие подвергаются апоп-тозу и погибают в тимусе. Клетки, прошедшие положительную селекцию на специфичность взаимодействия с собственными молекулами МНС, после дополнительной дифференцировки на субпопуляции и отрицательной селекции на аутоантигены (см. рис. 7.13) покидают тимус и мифируют в периферические лимфоидные органы, где они образуют пул антигенреактивных Т-киллеров и Т-хелперов [c.177]

Т-клеточные рецепторы (ТКР) разной степени аффинности по отношению к молекулам МНС. У.меренная степень сродства ТКР к молекулам МНС (1) определяет начало дифференцировки соответствующего клона, который по завершению процесса созревания мигрирует на периферию (пример положительной селекции). Очень высокая и очень низкая степень аффинности ТКР или полное отсутствие такой аффинности определяют гибель клеток через процесс апоптоза (2, 3). Клетки с ТКР, имеющим оптимальную аффинность по отношению к молекулам МНС, но при этом способным к распознаванию аутоантигена, комплексированного с молекулами I или И классов, также подвергаются апоптозу (пример отрицательной селекции) [c.181]

Кора тамуса (кортикальная зова, корковое вещество) — гистологически внешняя зона каждой, отдельно взятой дольки тимуса место, где предшественники Т-клеточного пути развития пролифе Я1руют, реорганизуют гены Т-клеточных рецепторов, подвергаются положительной селекции при взаимодействии с молекулами I или II классов МНС на кортикальных эпителиальных клетках. [c.463]

Используя те же клетки, можно начинать культивирование с клонирования одиночных клеток или проводить анализ методом лимитирующего разведения. В ряде случаев популяцию предшественников В-клеток обогащают или даже выделяют их в чистом виде с помощью положительной селекции, применяя моноклональные антитела к антигенам В-220, АА4.1 или GF1.2. При этом используют методики адсорбции на чашках (пен-нинг), образования розеток или применяют флуоресцентный клеточный сортер. Одиночные клетки можно поместить с помощью микроманипуляций в круглодонные лунки микропанелей и культивировать их в 200 мкл WEHI-K или в присутствии очищенного ИЛ-3. При этом среду меняют каждые 3 ср и положительные культуры размножают в лунках панелей Limbro и во флаконах для тканевых культур. [c.310]

В тимусе происходит положительная и отрицательная селекция развивающихся Т-клеток Положительная селекция Т-клетки распознают антигенные пептиды только представленными в контексте собственных молекул МНС на поверхности АПК (см. гл. 7 и 9). В действительности Т-клетки осуществляют двойное распознавание - и антигенных пептидов, и полиморфной части молекул МНС. (Маркер С04, присутствующий на поверхности Т-клеток одной из субпопуляций, распознает неполиморфную часть молекул класса II.) Положительная селекция (называемая также обучением в тимусе ) заключается в том, что дальнейшей дифференцировке подвергаются только те клетки, ТкР которых обладают невысокой аффинностью к собственным молекулам МНС. По имеющимся данным, положительную селекцию осуществляют эпителиальные клетки тимуса, выступающие в роли АПК рис. 12.8). Т-клетки, рецепторы которых обладают очень высокой или очень низкой аффинностью к собственным молекулам МНС, подвергаются в корковой зоне тимуса апоптозу и погибают. Апоптоз — это запрограммированное самоубийство клетки, осуществляемое активированными эндогенными нуклеазами путем расщепления ДНК на фрагменты рис. 12.9). [c.224]

Согласно этой гипотетической схеме, претимиче-ские Т-клетки направляются в закладку тимуса и проникают в нее. В подкапсульном слое они пролиферируют, образуя крупные лимфобласты, которые, размножаясь, дают начало популяции клеток, вступающих на путь дифференцировки. Многие из этих клеток находятся в тесном контакте с эпителиальными клет-ками- нянями тимуса (значение такого взаимодействия остается спорным вопросом). В этом слое клетки впервые начинают экспрессировать D8, а затем и D4, оба с низкой плотностью. В них происходит также перестройка генов ТкР и может начаться экспрессия в небольшом количестве продуктов этих генов на поверхности клеток. Созревающие клетки перемещаются в более глубокие слои корковой зоны и контактируют здесь с эпителиальными клетками. Последние удлиняются и ветвятся, создавая тем самым большую поверхность для контакта с тимоцитами. Этот контакт обеспечивает обзор ТкР тимоцитов молекулами МНС, экспрессированными на поверхности эпителиальных клеток. В результате происходит положительная селекция. Отбракованные клетки подвергаются апоптозу и поглощаются макрофагами. Во время миграции тимоцитов из подкапсульного слоя глубже в корковую зону в них усиливается экспрессия СОЗ, [c.225]

Отрицательная селекция Некоторые Т-клетки, прошедщие положительную селекцию, могут обладать рецепторами, распознающими не молекулы МНС, а другие компоненты собственных тканей. Такие клетки выбраковываются путем отрицательной селекции , происходящей в более глубоких слоях корковой зоны тимуса, в месте соединения корковой и мозговой зон и в мозговой зоне. Тимоциты взаимодействуют с собственными антигенами, которые презентируются интердигитатными клетками. Дальнейшее со- [c.225]

Большинство созреваюших в костном мозге В-клеток (более 75%) не попадает в кровоток, а подобно тимоцитам погибает в результате апоптоза и поглошения костномозговыми макрофагами. Предполагается, что при взаимодействии В-клеток с клетками стромы происходит своего рода положительная селекция, которая спасает от запрограммированной гибели небольшую часть В-клеток с продуктивной перестройкой генов иммуноглобулинов. Отрицательная селекция аутореактивных В-клеток может происходить в костном мозге или селезенке — органе, в который мигрирует большинство новообразованных В-клеток в период внутриутробного развития. [c.228]

Тимоциты получали от трансгенных мышей, Т-клетки DS" которых несли ТкР, распознающий ВЛХМ в ассоциации с молекулой При помощи флуоресцентного клеточного сортера изучали экспрессию молекул D4 и D8 тимоцитами. При нормальном развитии клетки D4 D8 становились D4 D8 , а затем превращались в зрелые D4 D8 или D4 D8 либо погибали. В контроле (нетрансгенные мыши) основную популяцию тимоцитов составляли клетки D4 D8 и меньшие популяции - D4 D8 и D4 D8. У трансгенных мышей, экспрессирующих аллель происходила положительная селекция Т-клеток в тимусе, в результате чего формировалась гораздо более многочисленная популяция D4" D8. Такая селекция не происходила в отсутствие аллеля (Обозначения высокий , низкий , и относятся к уровню экспрессии маркеров D.) [c.250]

Тимоциты С04 С08 взаимодействуют со стромальными клетками тимуса, экспрессирующими МНС-молекулы классов I и II в виде комплексов с собственными пептидами. Клетки, обладающие высокой аффинностью к собственным антигенам МНС классов I или II, делетируются, так же как и тимоциты, которые не распознают эти антигены. Клетки с невысокой аффинностью к собственным МНС-антигенам класса I проходят отбор (положительная селекция), утрачивают маркер С04 и становятся Т-клетками С08 . В отличие от этого тимоциты с невысокой аффинностью к собственным МНС-антигенам класса II образуют популяцию зрелых Т-лимфоцитов С04 . [c.253]

Предшественники тимоцитов в корковой зоне тимуса превращаются в дважды положительные клетки, экспрессирующие незначительное количество а 3-ТкР. Эти клетки проходят положительную селекцию, взаимодействуя со своими молекулами МНС класса I или II на кортикальном эпителии. Неотобранные клетки (их большинство) погибают в результате запро- [c.261]

Обе эти экспериментальные модели были использованы для изучения роли стромальных клеток тимуса в процессе обучения , включающего отрицательную селекцию (формирование толерантности Т-клеток к аутоантигенам) и положительную селекцию (рестрикция по специфическим антигенам МНС, с которыми преимущественно взаимодействуют хелперные и эффекторные популяции Т-клеток). Результаты таких экспериментов, проведенные на Xenopus, свидетельствуют об участии эпителия чужеродного тимуса в положительной селекции и индукции толерантности к кожным трансплантатам с МНС-специ-фичностью тимуса, хотя, что удивительно, эта толерантность не препятствует возникновению реакции смещанной культуры лимфоцитов на клетки донора тимуса. Аналогичные данные получены на зародыщах птиц и млекопитающих. [c.302]

Недостаточность экспрессии антигенов МНС класса II антигенпрезентирующими клетками (макрофагами и В-клетками) наследуется как ау-тосомно-рецессивный признак, не сцепленный с МНС-локусом в коротком плече хромосомы 6. У больных детей наблюдаются повторяющиеся инфекции с преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта. Поскольку развитие Тх-клеток С04 (Т-хелперов) зависит от положительной селекции с участием молекул МНС класса II в тимусе (см. гл. 12), у детей с недостаточностью этих молекул возникает дефицит Т-лимфоцитов С04" . Отсутствие Тх-клеток ведет также к недостаточности продукции антител. Дефицит МНС класса И возникает в результате дефектов промоторных белков, которые связываются с 5 -нетранслируемой областью генов класса II. [c.399]

МУТАГЕНЫ ХИМИЧЕСКИЕ. Вещества, вызывающие наследственные изменения — мутации. Используются в селекции растений и микроорганизмов для получения новых форм. Разделяются на две группы. К первой группе относятся вещества, вызывающие изменение числа хромосом в клетках (полиплоидия), приводящие к изменению комплекса признаков организма. К ним относятся аценафтен, ауранцин, вератрин, гаммексан, гранозан, закись азота, колхицин, линдан (гамма гексахлорциклогексан), фенилуретан и др. Такие вещества, как 2,4гД, 2,4,5-Т и ИУК, стимулируют деление естественно полинлоидизировавшихся клеток. Ко второй группе относятся вещества, вызывающие изменения структуры хромосом (так называемые точковые мутации и перестройки), приводящие к изменению одного или очень небольшого числа признаков, что позволяет улучшать отдельные признаки сортов, не изменяя других, положительных признаков. К ним относятся азиризин, [c.190]

Т-система иммунитета включает тимус (центральный орган иммунитета), различные субпопуляции Т-клеток (Т-киллеры/Т-супрессоры, Т-хелперы/Т-клетки воспаления), антигенраспознающий комплекс как основной специфический компоненет системы и, наконец, 1руппу Т-клеточных цитокинов, которые выступают в качестве регуляторов как клеточного, так и гуморального иммунного ответа. Особое место занимает, конечно, тимус как место становления специфических клонов Т-клеток, прошедших положительную и отрицательную селекцию в органе (гл.7). [c.27]

Универсальность, относительная простота и доступность метода слияния протопластов делают особенно полезным его применение в селекции промышленных микроорганизмов. Как уже отмечалось, генетическая рекомбинация в сочетании с мутагенезом создает огромное многообразие форм и резко увеличивает материал для отбора. Тем самым значительно повышается производительность работы по получению новых штаммов с улучшенными свойствами. Метод слияния протопластов позволяет объединять в одном геноме мутации, положительно влияющие на продуктивность и полученные в разных селекционных линиях, в том числе такие, которые трудно или даже невозможно последовательно индуцировать в одной и той же клетке, а также избавляться от вредных мутаций, снижающих жизнеспособность штаммов-про-дуцентов. Во многих отношениях этот метод является более эф- [c.131]

Несмотря на то, что многие детали процесса обучения лимфоцитов в тимусе пока еще не известны, в целом ясны по меньшей мере следующие закономерности. Биохимические преобразования в лимфоцитах индуцируют растворимые факторы, которые вырабатываются эпителиальными клетками тимуса. Процессы положительной и отрицательной селекции, а также рестрикция по МНС критически зависят от контактных взаимодействий тимического лимфоцита с разными клетками стромы этого органа. Важнейшим условием нормального созревания и обучения является строго детерминированная миграция лимфоцитов из одного отсека тимуса в другой, а затем — в третий. [c.125]

Муса, ТкР образует нестабильное соединение рис. 14.4). Тот же самый ТкР относительно стабильно связывается с комплексом агонист—молекула МНС, и в тех же экспериментальных условиях это ведет к отрицательной селекции. Полученные результаты сближают количественную и качественную теории и соответствуют кинетической модели, согласно которой индукция процессов положительной или отрицательной селекции определяется скоростью диссоциации ТкР от комплекса пептид—молекула МНС. На обшую авидность взаимодействия Т-клеток с антиген-презентируюшими клетками (АПК) в тимусе рис. 14.5) влияют следующие факторы [c.263]

Обучение Т-клеток. Процессы положительной и отрицательной селекции развивающихся тимоцитов. Положительный отбор проходят незрелые Т-клетки, способные отвечать на антигенные пептиды, ассоциированные с собственными молекулами IVIH . Отрицательному отбору с последующей гибелью подвергаются Т-клетки, которые отвечают на собственные антигены МНС. Опсонизация. Процесс, облегчающий фагоцитоз. Обусловлен связыванием опсонинов (антител и компонента СЗЬ комплемента) с поверхностными антигенами бактерий. [c.561]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология