Седиментация примеры использования

Примеры использования скоростной седиментации [c.302]

Трение влияние формы 299 Молекулярная масса 300 Метод точного измерения коэффициента седиментации 301 Примеры использования скоростной седиментации 302 Зональное центрифугирование в предварительно подготовлен ном градиенте плотности 306 Определение коэффициента седиментации с помощью зонального центрифугирования в предварительно приготовленном градиенте плотности ЗП [c.578]

Однако в ряде случаев (в частности, при исследовании процессов седиментации, обжига, растворения) нельзя ограничиваться использованием первых моментов функции распределения. В качестве примера рассмотрим процесс поглощения целевого компо- нента частицами диспергированной фазы. Скорость 1 поглощения целевого компонента диспергированной фазой можно выразить как [c.152]

Расшифруем некоторые из записанных таким образом способов разделения, приведенных на рис. 8. Два движения, обеспечивающих различные скорости движения частиц смеси, расположенные под прямым углом друг к другу, запишутся как W°W . При этом могут в одном направлении двигаться все частицы, а в другом только часть из них. Как пример такого способа разделения можно привести комбинации электрофореза с хроматографией на бумаге. Похожего эффекта разделения можно достичь включением вместо движения с равным углом. Практически этот случай реализуется, например, в хроматографии на бумаге с вращающимся бумажным барабаном или при сочетании свободного электрофореза с седиментацией. Вклад достигается здесь механическим перемещением всего разделяющего наполнителя поперечно к направлению движения W. При этом все частицы движутся в обоих направлениях. Время разделения (при лучшем его качестве) значительно уменьшается при использовании схемы противотока По этой схеме организованы, например, про-тивоточный электрофорез или газохроматографический метод, при котором против тока газа-носителя движется разделяющий наполнитель (вниз по вертикальной колонке). Схема W°V позволяет при непрерывном ее исполнении разделить только два компонента. Для того чтобы можно было осуществлять непрерывное противоточное разделение многочисленных компонентов, реализуют схему ГО ОУ У . Движение У выносит отдельные частицы из противотока. [c.47]

В случае смеси макромолекул с различными значениями 5 при относительно высокой концентрации возникает особая проблема. В этом случае молекулы мешают седиментации не только себе подобных, но и других типов молекул. К тому же молекула с большим S и большей концентрационной зависимостью, должна седиментировать через раствор более медленно движущихся молекул. При высокой концентрации более быстро осаждаемые молекулы будут так задерживаться, что они седиментируют почти с той же скоростью, что и более медленно осаждаемые молекулы при этом может происходить маскировка того факта, что в действительности имеется смесь, и можно получить ошибочную информацию о гомогенности материала. Этот процесс носит название эффекта Джонстона — Огстона. На деле для разделения больших молекул нуклеиновых кислот часто приходится работать с очень низкими концентрациями, поскольку только в этих условиях происходит разделение двух компонентов. Однако даже при этих концентрациях полученные данные показывают меньшее содержание более быстро осаждаемого компонента, чем имеется в действительности. Пример этого дан на рис. 11-14. Как будет показано ниже (см. разд. Зональное центрифугирование в предварительно подготовленном градиенте плотности ), эта трудность сводится к минимуму при использовании метода зонального центрифугирования. [c.294]

Вычисление константы свднментацин из данных, полученных методом шкалы. В качестве примера процесса вычисления констант седиментации веществ с высоким молекулярным весом по данным, полученным из диаграммы седиментации с использованием метода шкалы, приведем вычисления для раствора ацетилцеллюлозы в ацетоне. Основными данными, необходимыми для вычисления константы седиментации, являются положения подвижной границы в различные моменты времени после начала центрифугирования. Так как по методу шкалы положение максимума отклонения соответствует положению границы при отсутствии диффузии, то задача заключается в том, чтобы получить зависимость смещения Z от расстояния от оси вращения и найти положение биссектрисы полученного максимума на дифференциальной кривой. Второй задачей является преобразование отсчетов по компаратору в расстояния (в сантиметрах) от мениска раствора. [c.532]

Примеры использования зонального центрифугирования в препаративной ультрацентрифуге 313 Зональная седиментация в самогенерирующемся градиенте плотности 317 Седиментация ДНК при щелочных значениях pH 319 Определение молекулярной массы методом седиментации — диффузии 320 [c.578]

Приведем пример такого эксперимента. Изучение молекулярных свойств поли-п-бензамида (ППБА) ультрацентрифугированием было выполнено [78 ] в диметилацетамиде (ДМАА) с добавкой 3% ЫС1. Данный полимер растворяется также в концентрированной серной кислоте, но наблюдать седиментацию ППБА в ней практически невозможно. В то же время на стандартных диффузометрах исследование столь агрессивных жидкостей весьма затруднительно. Окатова, Деккер и один из авторов провели сравнительное изучение растворов ППБА в 96% Н2504 и ДМАА на аналитической ультрацентрифуге МОМ-3170 при частоте вращения ротора п = 10 ООО об/мин в кюветах со специально изготовленными вкладышами из фторопласта, однородного или наполненного коксом с добавкой двуокиси ванадия, устойчивыми к действию концентрированной Нг504. Одновременное вращение двух ячеек с использованием клиновидного окна позволило в одина- [c.42]

Начнем с того, что метод скорости седиментации вполне можно использоватсь для обнаружения существенных конформационных изменений даже в тех случаях, когда исследуемое явление не поддается точному аналитическому описанию. Хорошим примером такого использования седиментационного анализа служит работа Кроуфорда и Уоринга [9] по исследованию супер-спирализованной ДНК. [c.213]

В начале главы говорилось об использовании поглощения рентгеновских лучей для контроля дисперсности полимерных материалов [157, 158]. Приведем еще пример. Так, в работе [168] предложены прибор и метод измерения и автоматической реги страции распределения размеров частиц дисперсной фазы полимерных суспензий, основанный на использовании законов седиментации твердых частиц (например, закона Стокса) и погло щения рентгеновского излучения.. Рентгеновский луч исполь-зуется для измерения концентрации частиц по его поглощению суспензией, сравниваемому с поглощением чистой жидкостью. [c.120]

Материал, полученный одним из описанных выше методов, обычно контаминирован клеточными компонентами. Однако в тех случаях, когда высокая степень очистки не обязательна (например, для постановки RIA или ELISA), его можно использовать уже на этой стадии. Тем не менее для большинства исследований необходима дальнейшая очистка вируса с помощью зонально-скоростного или изопикнического центрифугирования в градиенте. При скоростном центрифугировании положение вируса в градиенте определяется его коэффициентом седиментации, а при изопикническом — плавучей плотностью. Для достижения максимальной степени очистки вирусных частиц от примесей изменение концентрации образующего градиент вещества должно быть плавным в то же время на промежуточных стадиях очистки нередко используют ступенчатые градиенты. В некоторых случаях принципы скоростного и изопикнического центрифугирования совмещаются примером может служить использование градиентов глицерина — тартрата калия [14]. В таких градиентах концентрация тартрата калия возрастает в направлении дна пробирки, достигая плотности, соответствующей плавучей плотности вируса концентрация глицерина, наоборот, максимальна на мениске, что препятствует продвижению медленно седиментирующего материала в направлении дна. Все типы градиентов обычно центрифугируют в бакет-роторах, но в случае изопикнических градиентов такие же или даже лучшие результаты можно получить в угловых или вертикальных роторах с помощью приспособлений для медленного разгона и остановки, обеспечивающих переориентацию градиента без перемешивания. При очистке конкретного вируса часто приходится проводить целую серию последовательных стадий центрифугирования в разных типах градиентов, чтобы добиться нужной степени очистки. [c.100]

Пример 11-3. Измерение изменений величины мутантного фермента. Многие методы, применяемые для определения молекулярных масс ферментов, требуют образцов с высокой степенью очистки (например, метод седиментационного равновесия, который будет описан позже) или при использовании не очень чистых образцов дают массы субъединиц (например, ДСН-гель-электрофорез, гл. 9). Использование зональной седиментации позволяет определить молекулярную массу активного фермента непосредственно в неочищенном лизате при применении в качестве метода контроля анализа ферментативной активности. Например, ДНК-полимераза I Е. oli седиментирует при 5 = 5,4. Зоны полимери-зующей и 5 —З -экзонуклеазной активности, связанные с этим белком, седиментируют вместе, поэтому для локализации фермента в градиенте сахарозы можно использовать любую из них. Мутантная форма фермента не обладает полимеразной активностью, однако сохраняет 5 —З -экзонуклеазную. Как следует из рис. 11-26, мутантный фермент обладает значением s = 2,8. Поскольку данная мутация является терминирующей цепь белка, пониженное значение 5 указывает на то, что данный фермент является лишь небольшим фрагментом белка дикого типа и имеет только 0,4% активности. [c.314]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология