Получение ферментных препаратов

Первый раздел Практикума должен помочь студентам освоить методические приемы и основы аналитической биохимии. Он содержит описание основных принципов и методов концентрационного анализа, принятых в биохимии (спектрофотометрического, колориметрического, манометрического), в частности, для количественного определения гликогена, глюкозы, неорганического фосфата, фосфорных эфиров углеводов, молочной и пировиноградной кислот. В раздел включены работы, посвященные анаэробному превращению углеводов. Каждая задача, выполняемая студентом, предусматривает анализ чистоты исходного препарата углевода или его фосфорного эфира, получение ферментного препарата (гомогената или экстракта ткани), постановку биохимического эксперимента, количественную оценку результатов. Количественное определение веществ проводится несколькими методами, результаты сопоставляются. Так, выполняя задание по теме Превращение фруктозо-1,6-дифосфата в молочную кислоту , студент анализирует фруктозо-1,6-дифосфат по фруктозе и по фосфату, молочную кислоту определяет спектрофотометрическим и колориметрическим методами. Подобным образом выполняются работы, связанные с превращением других фосфорных эфиров углеводов, гликогена, глюкозы. [c.5]

Получение ферментного препарата [c.287]

ПОЛУЧЕНИЕ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА, СОДЕРЖАЩЕГО [c.290]

В зависимости от источника технология получения ферментных препаратов имеет свои особенности. При извлечении ферментов из растительного сырья и животных тканей технология сводится к экстракции энзимов и очистке их от сопутствующих балластных веществ. Технология ферментных препаратов микробного происхождения более сложная, так как дополнительно включает этапы культивирования микроорганизмов — продуцентов ферментов, в том числе этапы получения посевного материала и производственной культуры соответствующего микроорганизма. [c.76]

При издании книги Введение в биотехнологию на русском языке текст несколько переработан и дополнен новейшими данными. Дана характеристика новых видов сырья, применяемого для приготовления питательных сред для культивирования микроорганизмов. Показана возможность производства богатой белком микробной биомассы не только на средах, содержащих растворимые углеводы, но и на средах, содержащих углеводороды нефти, природного газа, этанол, целлюлозу сельскохозяйственных отходов и др. Расширен раздел о получении ферментных препаратов, в частности показаны принципы иммобилизации ферментов и клеток микроорганизмов, приведены новые данные по микробиологической трансформации органических соединений. Раздел об использовании микробиологических процессов для защиты окружающей среды дополнен последними работами в области утилизации навоза. [c.6]

В конце процесса брожения жидкость культивации сливают и мицелий промывают. Промывные воды используют далее, а мицелий после высушивания используют для нужд животноводства или для получения ферментного препарата пектиназы. [c.151]

ПОЛУЧЕНИЕ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ [c.193]

Ферменты входят в состав клеток растений, животных и микроорганизмов в виде сложных, многокомпонентных соединений. Для получения ферментного препарата необходимо извлечь ферментный белок из клеток сырьевого источника и провести соответствующую очистку для удаления сопутствующих балластных веществ, отрицательно влияющих на активность и выход целевого продукта. Общие принципы, включая подготовку сырья и оборудования и заканчивая получением очищенного препарата, не являются унифицированными, а формируются и используются в зависимости от задач исследования, типа и индивидуальных особенностей фермента [4, 6, 45, 46]. [c.168]

Ход работы. 1. Для получения ферментного препарата 1—2 г свежей мышцы, измельченной ножницами, растирают в ступке с небольшим количеством воды, затем мышечную кашицу переносят на двойной слой марли, помещенной на воронку, и промывают 25 мл дистиллированной воды. Промытую кашицу отжимают, переносят в пробирку и суспендируют стеклянной палочкой с [c.112]

Ход работы. Для получения ферментного препарата тирозиназы сырой картофельный клубень очищают от кожуры, верхние слои клубня (2,0—4,0 г) кусочками нарезают в ступку, растирают с 10 мл дистиллированной воды и фильтруют через два слоя марли или бумажный складчатый фильтр. [c.173]

ОТДЕЛЬНЫЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ ФЕРМЕНТОВ и ПОЛУЧЕНИЕ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ [c.44]

Способы промышленного получения ферментных препаратов сравнительно просты. Приемы выделения ферментных белков из сырья, получения технических препаратов, требуемая для этого аппаратура — доступны и, в целом, относительно несложны. [c.98]

Рис. 24. Технологическая схема получения ферментных препаратов глубинным способом

Одним из чувствительных методов оценки гомогенности полученного ферментного препарата является определение его растворимости. [c.77]

В 20-х годах все чаше стали обращать внимание на противоречие следующего рода стремление получать максимально активные препараты ферментов не всегда могло быть реализовано путем максимальной очистки этих препаратов. В связи с этим даже методически получение ферментных препаратов и их очистка стали рассматриваться как операции не идентичные. Это различие в подходе нашло выражение и в толковании получаемых результатов и в выводах относительно природы и свойств ферментов. [c.135]

Продуцентами ферментов могут быть бактерии, грибы, дрожжи и актиномицеты. Для промышленного получения ферментных препаратов используются как природные штаммы микроорганизмов, выделенные из естественных сред, так и мутантные, селекциониро- [c.145]

Рис. 4.3. Схема получения ферментных препаратов из культур микроорганизмов (по Дж. Бейли, Д.Оллис, 1989) [c.81]

Оборудование для ведения биотехнологических процессов солодоращеиия и получения ферментных препаратов (солодорастильные установки, дрожжевые и дрожжерастильные аппараты, ферментаторы и биореакторы и т.п.) [c.24]

Научное обеспечение процессов солодоращеиия и получения ферментных препаратов................1019 [c.713]

Ферментные препараты — продукты культивирования продуцентов на поверхности твердых сред или в глубине жидких сред. Для получения ферментных препаратов используют различные виды микроорганизмов, которые в процессе роста и развития могут осуществлять направленный синтез тех или иных групп ферментов. В качестве продуцентов ферментов используют бактерии, дрожжи, аминокислоты и мицелиальные грибы (микролицеты). [c.1019]

НАУЧНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ПРОЦЕССА СОЛОДОРАЩЕИИЯ И ПОЛУЧЕНИЯ ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ [c.1019]

Классификация оборудования для солодоращеиия и получения ферментных препаратов приведена на рис. 20.1. [c.1021]

Для получения ферментных препаратов используют как микроскопические грибы, так и бактерии и дрожжи. Иногда получение технического ферментного препарата кончается проведением процесса ферментации, например в спиртовой промышленности для осахаривания крахмала используют жидкую культуру Aspergillus niger, выращенную глубинным методом культивирования на спиртовой барде с добавками крахмала (1%) и различных солей. Впоследствии ее добавляют в жидком виде в количестве 10—127о к осахариваемому затору. Однако активность ферментов в культуральной жидкости быстро снижается. Поэтому широко практикуют получение сухих технических ферментных препаратов. [c.193]

Технология получения ферментного препарата методом поверхностного культивирования показана на рис. 65. Для стерилизации отрубей, используемых в главной ферментации, применяют специальные аппараты стерилизации с мешалками, притоком пара и охлаждающими устройствами. Для охлаждения отрубей используется стерильный воздух. Вначале через люк в аппарат вводят отруби, затем постепенно добавляют 0,2% формалина (от количества отрубей), предварительно разбавленного водой. Затем при работе мешалок подводят пар и стерилизуют отруби 50—60 мин при 100—105°С. Затем следует охлаждение водой через рубашку аппарата и воздухом до температуры 37°С, Влажность массы доводят до 56—58% охлажденной кипяченой водой, добавляют чистую культуру и хорошо перемешивают. Такой массой заполняют кюветы и помещают их на специальные полки. Размеры кювет 0,5 м , высота бокового борта 25 мм. Кюветы сделаны из перфорированной жести, размеры отверстий 1,5x20 мм. Перед загрузкой камеры кюветами ее и подсобное помещение стерилизуют 8 ч паром и формалином, затем 3—4 ч проветривают стерильным воздухом. [c.195]

Хорошие результаты дает использование сульфат-изопропило-вого способа выделения целлюлазы из культуральной жидкости. В качестве оптимальных условии выделения целлюлолитических ферментов можно считать следующие температура 4—15°С, исходный pH культуральной жидкости 7—8, длительность высаливания сульфатом аммония 12—16 ч, концентрация изопропанола 10%. При этом выход фермента по активности достигает 75— 80%, а активность полученного ферментного препарата составляет 1 — 1000 Сз — ИЗО и Сж — 3900 ед./г. Лучшим методом сушки, обеспечивающим максимальную стабильность препарата является лиофильная или вакуумная сушка при относительно низкой температуре. [c.201]

Например, препарат, в котором основными ферментами являются целлюлазы, полученный при культивировании T.viride называется целловиридином. Лалее после маркировки культуры продуцента следует индексация, отражающая способ культивирования и методы получения ферментного препарата. [c.111]

В последние годы в отдельных случаях вместо солода для оса-хариваиия крахмала стали применять спещ1альным образом полученные ферментные препараты. Образовавшийся после осахарива-ния продукт охлаждают и вводят в него дрожжи. Находящийся в них фермент мальтаза вызывает гидролиз мальтозы с образованием двух молекул глюкозы [c.101]

Такое производство весьма сложно, но, как показал опыт многих зарубежных фирм, вполне окупается экономически — избавляет научных работников от малопроизводительного и кропотливого труда, связанного с получением ферментных препаратов в каждом отдельном учреждении или лаборатории. Препараты, полученные на специализированном заводе, более качественны, постоянны по своему составу и могут быть точнее охаракте- [c.211]

Лебедева Е. И. Получение ферментных препаратов каталазы Peni illium vitale и изучение некоторых их свойств. Канд. дисс. УкрНИИСП. Киев, 1967, [c.352]

Насколько известно автору, до настоящего времени еще не получен ферментный препарат, вызывающий распад сульфоксида до меркаптана. Описаны только два случая биологического расщепления сульфоксидов — восстановление до соответствующих сульфидов диметил- и диэтилсульфоксидов культурами S opulariopsis brevi aulis, выращенными на хлебной среде. При этом выход меркурихлорида диметилсульфида составлял 60% [69, 70]. Автор согласен с Синджем и Вудом, что необходимо еще много работать, чтобы пролить свет на реакционную способность сульфоксидной группы . [c.65]

Напротив, у надосадочных фракций из гомогенатов клеток зеленых и спелых бананов альдолазная активность была одинаковой [92]. Правда, мы пока еще не очень хорошо знаем, как влияют на активность ферментов те методы, которые используются для получения ферментных препаратов. Поэтому трудно сравнивать активность различных ферментных препаратов, особенно в тех случаях, когда их получают из тканей, различающихся по своей химической и физической природе. Гп vivo активность ферментов изменяется также под действием целого ряда факторов, и факторы эти в разных тканях, вероятно, различны. [c.487]

Для получения ферментных препаратов экстракт ферментов до или после фракционирования пропускают через иониты, сорбирующие пигдмептные вещества вытяжки или культуральной жидкости. [c.61]

Проверка разработанного статического способа сорбции амилазы культуральной жидкости в полупроизводственных условиях на Московском опытном заводе ВНИИФСа подтвердила возмо-жность 100%-ной сорбции и элюции в пределах 90—94% и получения ферментных препаратов, обладающих амилолитической активностью 1200—2800 ед. АС на 1 г. [c.109]

Для определения активности нитратредуктазы в полученных ферментных препаратах в стеклянные центрифужные пробирки емкостью около 10 мл помещают 20 микромолей (0,2 мл 0,1 М раствора) КНОз, 0,2 микромоля НАД-Нг или НАДФ-Нг (растворы с концентрацией 4—5 микромолей), 1,7 мц 1М ФАД (0,1 мл 1,7-16- миллимолярного раствора), 0,5 мл ферментного препарата и 0,15 М фосфатный буфер с pH 7,0 до конечного объема 1 мл. Инкубацию системы проводят в термостате при температуре 28° в течение 15—30 минут. В конце инкубационного периода к реакционной смеси на холоде прибавляют 0,2 мл 1 М раствора ацетата бария и 5 мл 95—97%-НОГО этанола. Небольшой осадок белка отделяют центрифугированием. В центрифугате определяют нитриты. Для этого к реакционной смеси после осаждения белка приливают 0,2 мл реактива 1. через 7—10 минут 0,2 мл реактива 2. Объем смеси доводят до 10 мл и определяют оптическую плотность раствора на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром через 10 минут после приливания реактива 2. [c.137]

Используя методику Погеля и Грайдера [10] для печени, мы показали наличие в мозгу ферментной системы, синтезирующей глюкозамин из глюкозо-6-фосфата и глютамина. Для получения ферментного препарата 2 г мозга крыс гомогенизировали 5 мин. в [c.146]

Процессы экстракции в фармацевтической промышленности на растительных и животных веществах, например алкалоидах, гормонах, наркотиках и т. д., часто осложняются цветными веществами, водорастворимыми полимерами и другими примесями, которые, если их не удалить, придают цвет продуктам или затрудняют их кристаллизацию. Во многих случаях простая ультрафильтрация акстракта через мембрану, проницаемую для продукта, но не проницаемую для загрязнений, дает чистый, бесцветный раствор, из которого легко получить высокочистый кристаллический продукт. При получении ферментных препаратов из культур микроорганизмов неотъемлемой стадией технологического процесса является концентрирование ферментных растворов с применением таких методов, как вакуум-выпаривание, сублимационная сушка, сушка распылением, вымораживание, охлаждение органическими растворителями или солями и др. В этих методах концентрирование раствора связано либо с действием температур, либо с глубокими изменениями физико-химических свойств ферментного раствора. [c.17]

Т. И. Голубе в. Получение ферментного препарата — протеолитина. — Мед. промышленность СССР, № 1, 1962. [c.106]

Для ускорения процесса (обычно идущего 2,5—3 сут) и повышения качества волокна был получен ферментный препарат пектоклостридин ГЗх — отфильтрованная и высушенная культуральная жидкость lostridium sp. Препарат позволяет ускорить процесс мочки в 2—2,5 раза и получить волокно с высокой механической прочностью. Амилолитические препараты используются для удаления клея из тканей (расшлихтовка). Некоторые протеиназы, в частности протосубтилин, используются для обесклеи-вания шелка (удаления серицина) и высвобождения шелковых волокон, состоящих из фиброина. Для освобождения шелкового волокна от жира применяют препараты липаз. [c.374]

При электрофорезе полученного ферментного препарата в полиакриламидном геле (5% гель, 0,1- М триС-глициновый буфер, pH 9,3, в течение 90 мин) были обнаружены четыре белковые фракции, одна из которых остается на линии нанесения. Каждая из фракций обладала моноаминоксидазной активностью при использовании триптамина в качестве субстрата (01еппег е. а., 1957). [c.33]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология