ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ В МИТОХОНДРИЯХ

ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ В МИТОХОНДРИЯХ [c.134]

В биологических мембранах (мембраны эритроцитов, митохондрий, саркоплазматического и эндоплазматического ретикулума, лизосом) вследствие перекисного окисления липидов индуцируется проницаемость для различных ионов, неэлектролитов и макромолекул. Этот эффект потери мембранами барьерных функций лежит в основе патогенеза многих заболеваний. [c.66]

Было установлено, что липидные перекиси, накапливаясь в аномальных количествах, вызывают многочисленные морфологические, физиологические и биохимические изменения, по существу не отличающиеся от нарушений, наблюдаемых при соответствующих формах лучевого поражения острейшей, острой и хронической. Исследования проводились на различных биологических объектах на кроликах, крысах, мышах, дрожжевых клетках, клетках асцитных карцином, изолированных митохондриях печени. Во всех случаях были получены результаты, указывающие иа широкий спектр радиомиметического действия продуктов перекисного окисления липидов, т, е. воздействие на биологические объекты липидными перекисями во многом имитировало процесс лучевого поражения. [c.220]

Метод замораживания и хранения изолированных митохондрий. Митохондрии — четко выраженная мембранная структура с весьма тонкой архитектоникой, содержащая системы дыхания и окислительного фосфорилирования. Митохондрии нельзя хранить в изолированном состоянии при комнатной температуре, так как они быстро разрушаются. При температурах порядка О—4°С митохондрии в средах выделения можно сохранять не более 1—2 ч, так как они подвергаются ишемии и гибнут в результате быстрого развития процессов перекисного окисления липидов и денатурации ферментативных комплексов, регулирующих окислительное фосфорилирование. Замораживать митохондрии можно под защитой криопротекторов — диметилсульфоксида (ДМСО) или полиэтиленоксида (ПЭО). Для этого свежую печень крыс измельчают ножницами в холодной стандартной среде выделения и навеску заливают 9-кратным объемом этой среды. После измельчения в гомогенизаторе типа стекло — тефлон в течение 30—40 с гомогенат центрифугируют при 600 об/мин в течение 10 мин, надосадочную жидкость — при 6000 об/мин в течение 15 мин. Митохондрии, находящиеся в осадке, суспендируют в 2 мл сре- [c.74]

Решающее значение для получения качественного препарата изолированных митохондрий имеет способ размельчения ткани. Оно должно проводиться в сравнительно мягких условиях за короткое время. Одним из важнейших факторов помимо среды выделения и способа размельчения ткани является выделение митохондрий в холодной камере при О—4 °С с охлажденными растворами и посудой. Это необходимо для предотвращения тепловой денатурации белков, снижения активности процессов лизиса и перекисного окисления липидов. [c.154]

До 80% от общего количества Ог используется -в реакции дисмутации (реакция 30) катализируемой мембраносвязанной СОД в матриксе митохондрий. Остальные 20% мигрируют в пространство цитозоля [428, 429]. Эта фракция может включаться в инициацию свободнорадикальных цепных реакций, взаимодействуя с метиленовыми мостиками полиненасыщенных жирных кислот (перекисное окисление липидов). [c.178]

Интенсификация процессов гидролиза фосфолипидов в мембранах митохондрий, эритроцитов и других клеток становится возможной также благодаря и тому, что при низкотемпературном воздействии разрушаются природные антиоксидант-ные системы. Установлено, например, что в процессе замораживания митохондрий они теряют эндогенный глутатион, который 51вляется эффективным фактором защиты от процессов перекисного окисления липидов. Появление в составе мембраны пере-кисных группировок приводит к резкому ослаблению связей липидных молекул друг с другом, белками и другими компонентами, повышает вероятность окисления 8Н-групп белков, что существенно модифицирует функционирование ферментов-катализаторов, ионных переносчиков и т. д. Лизосомы, очень чувствительные к воздействию низких температур, в процессе замораживания— отогрева разрушаются, существенно повышая концентрацию в цитоплазме высокоактивных гидролаз, которые оказывают лизирующее действие на внутриклеточные структуры, например ядра, митохондрии и т. д. (табл. 4). [c.27]

Ниже приведены результаты изучения некоторых его функций, в частности его влияния на степень сопряженности окислительного фосфорилирования и его влияния на процессы перекисного окисления липидов в митохондриях. [c.54]

Л0. Влияние БХШ 310 на различные системы перекисного окисления липидов в митохондриях озимой [c.80]

Полученные в настоящем исследовании результаты, как нам кажется, говорят против предположений, что в липидах облученных живых тканей возникают длительно идущие, разветвленные реакции окисления, не зависимые от обмена и приводящие к накоплению перекисей. Мы видим, что перекиси не образуются в облученном семени, пока не начнутся интенсивные процессы обмена. Мы видим, что они не найдены ни в эндосперме, ни в зародыше их образование происходит только в той ткани (щитке), которая богата окислительными ферментными системами, упорядоченно расположенными в микроструктурах (митохондрии). Как отмечалось одним из авторов [7], под влиянием радиации в первую очередь страдают координированные ферментативные процессы, сосредоточенные в микроструктуре клетки, отражением чего, по-ви-димому, и является найденное повышение перекисных соединений. [c.39]

Марзоев A., Мирталипов Д., Алматов К. Роль перекисного окисления липидов митохондрий в их гидролизе эндогенной фосфолипазой Аг // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1987. №. 7. С. 35—38. [c.67]

Используя методы полярографии, удается обнаружить ранние биохимические изменения в клетках печени. Так, спустя несколько мйнут после облучения животного в клетках заметно возрастает содержание продуктов перекисного окисления липидов. Накапливающиеся гидроперекиси и перекиси свободных высших ненасыщенных л<ирных кислот обладают высокой биологической активностью — проявляют свойства эндогенных радиосенсибилизаторов, повреладают структуры внутриклеточных мембран, нарушая их проницаемость. С помощью электронной микроскопии показано, что в клетках печени вскоре после облучения существенно увеличивается количество пероксисом, нарушается структура мембран лизосом и митохондрий, а также эндоплазматического ретикулума. [c.195]

Значительное число исследований было посвящено анализу механизмов образования липидных радиотоксинов и их роли в лучевом поражении организмов. У облученных животных было обнаружено значительное возрастание уровня продуктов перекисного окисления липидов в радиочувствительных органах — костном мозге, семенниках, селезенке. Накопление липидных перекисей было зарегистрировано в органеллах клеток печени облученных животных — в лизосомах, микросомах, митохондриях и ядрах (Таппел, 1962 Кудряшов, 1962 Виллс, 1966 Данилов, Козлов, 1973 и др.). Большой интерес представляет обнаруженное в митохондриях радиационное нарушение процессов перекисного окисления липидов, так как продукты перекисного окисления липидов, накапливаясь в митохондриях, способны разобщать окислительное фосфорилирование (Кудряшов и др., 1964 Ленинджер, 1964), инактивировать тиоловые ферменты, окислять сульфгид- [c.222]

Интенсивность этих. процессов зависит от степени охлаждения биообъекта, наличия криопротек-торных добавок, конечной температуры охлаждения и сроков хранения материала при низких температурах. Реальность протекания процессов перекисного окисления липидов при низких температурах хорошо прослеживается в опытах на митохондриях, изолированных из печени крысы, которые медленно замораживали до —25°С, а затем отогревали в присутствии 40%-но№ трихлоруксусной кислоты, тормозящей перекисное окисление липидов. При этом в составе мембраны накапливаются лизофосфа-тиды, лизолецитины и свободные жирные кислоты (рис. 15). [c.26]

При замораживании, когда происходит разрушение мембраны кристаллами льда, субстрат окисления (фосфолипиды) и катализатор (железосодержащие белки) изменяют свою пространственную и структурную упорядоченность таким образом, что процессы перекисного окисления липидов ускоряются. В-четвертых, мембраны митохондрий обогащены заряженными фосфолипидами — кардиолипином (15%) и фосфатидилинози-том (8—10%). что обусловливает суммарный отрицательный заряд поверхности мембраны. Все эти типы фосфолипидов, составляющие 97% фосфолипидов мембран митохондрий, расположены в основном в наружном слое внутренней мембраны и содержат большое количество полиненасыщенных жирных кислот. [c.28]

Содержание глутатионпероксидазы в различных тканях организма уменьшается в ряду печень > эритроциты > почки > желудок > сердце = легкие = мозг > плазма > мышцы [278, 297, 298]. Около 75 % глутатионпероксидазной активности определяется в цитоплазме клеток, остальное количество фермента локализовано в митохондриях [297, 299, 300]. В плазме крови выявлен изофермент, отличающийся иммунологически от внутриклеточной глутатионпероксидазы. Подобно внеклеточной СОД апо-фермент плазматической формы является гликопротеидом [301]. Показано, что существуют возрастные и суточные (циркадные) изменения активности глутатионпероксидазы в различных тканях экспериментальных животных [298, 302]. В период снижения активности глутатионпероксидазы в сердце отмечена активация процессов перекисного окисления липидов [302]. [c.40]

Так, например (табл. 8), проводили определение относительного содержания гидроперекисей в интактной митохондриальной фракции и фракции митохондрий, инкубированной при 37°С в разное время в присутствии 0,1 мМ FeS04, что создавало условия стимулирования перекисного окисления липидов Ре +. В качестве контроля использовали пробы, не обработанные FeSO . [c.66]

В эксперименте было показано, что белки семейства БХШ 310, выделенные из пшеницы, кукурузы и пырейника, не обладают прооксидантной активностью (рис. 40). При этом, если белки, выделенные из пшеницы, не оказывали заметного влияния на ПОЛ, то белки, выделенные из кукурузы, и особенно из пырейника, вызывали значительное ингибирование во всех изученных системах ПОЛ более чем в два раза (рис. 40). По-видимому, обнаруженные отличия, касающиеся влияния белков данного семейства из разных видов растений на активность ПОЛ в митохондриях связаны с различиями структуры нативных белков, в связи с чем они по-разному ассоциируют с митохондриями и, следовательно, по-разному влияют на их энергетические функции и протекающие в митохондриях процессы перекисного окисления липидов. [c.82]

Рассмотрим сначала участие липидной фотохимии в УФ-повреждении биологических мембран. Хорошо известно, что в мембранах при УФ-облучении имеет место накопление перекисных соединений и стабильных продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой. Первые данные такого рода получены в 1955 г. Отто-ленги, Бернхаймом и Уилбуром на митохондриях. Позднее Эречинска обнаружила корреляцию между концентрацией продуктов окисления липидов в мембране [c.334]

Для восстановления функциональной активности митохондрий после быстрого замораживания — отогрева в среде без криопротектора необходимо в среду криоконсервирования добавить субстраты (сукцинат, глутамат), ионы магния, адениновые нуклеотиды или ингибиторы перекисного окисления и гидролиза липидов фосфолипазами (комплексоны Са +, местные анестетики, антиоксиданты). При использовании этих соединений значения биоэнергетических показателей восстанавливаются при инкубации суспензии митохондрий в физиологических условиях и достигают 70% от уровня контроля. Иногда возникает необходимость сохранять функцию митохондрий в составе срезов тканей (почки, печени, сердца и т. д.). С целью увеличения срока хранения срезов ткани почки и улучшения структурно-функциональ-пого состояния митохондрий тканевой препарат замораживают следующим способом охлаждают на первом этапе от 37 до 4°С со скоростью 5—7°С/мин, на втором — со скоростью 1 — 1,5°С/мин до —(6—8)°С и на третьем этапе — со скоростью 300—400°С/мин до —196°С, т. е. быстрым погружением ткани в жидкий азот. Перед замораживанием сред ткани инкубируют в растворе, содержащем сукцинат и глутамат натрия, аденозинтри-фосфат, цитохром с, ЭДТА, сахарозу и фосфат в следующих соотношениях (М) [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология