Тирозин определение колориметрическим методом

При определении белка в лекарственных препаратах при помощи колориметрических методов предварительно строят калибровочный график с использованием стандартного образца белка, указанного в частных статьях (бычьего сывороточного альбумина, сывороточного альбумина человека или аминокислоты тирозина). [c.30]

В литературе описаны и другие методы определения тирозина, не даюш ие, однако, точных результатов при анализе малых количеств веш ества. К ним относятся формольное титрование [1,2], колориметрические методы определения с применением диазореакции Паули, а-нитрозо-р-нафтола, сернокислой меди и др. (3, 4, 5]. [c.217]

Наиболее общим методом определения концентрации пептидов является колориметрия продуктов реакции с нингидрином [2]. Это один из наиболее чувствительных колориметрических методов. Для обнаружения аминокислот и пептидов разработаны как обычный, так и полностью автоматизированный варианты, причем нингидриновый реагент не вызывает коррозии и его можно подавать обычным микронасосом. Реакция идет по свободным аминогруппам, но в некоторых случаях хромофор образуется с низким выходом. Данные по окрашиванию дипептидов можно найти в работе [3]. У всех дипептидов, содержащих в качестве Ы-концевой аминокислоты аргинин, треонин, серин, глутаминовую кислоту, глицин, фенилаланин, метионин, лейцин и тирозин, интенсивность окраски составляет 1,6-10 у лейцина эта величина составляет 1,7-10 . У дипептидов с М-концевым лизином и аспарагиновой кислотой интенсивность окраски несколько выше (на 20 и 29% соответственно), а дипептиды с Ы-концевым гистидином и триптофаном проявляются несколько слабее (42 и 67% соответственно от средней интенсивности). Дипептиды с М-концевым пролином, валином и изолейцином окрашиваются очень слабо [2,7 6,4 и 8,5% от средней (1,6- 10 ) интенсивности]. [c.391]

При совместном определении диоксида хлора и хлорит-иона концентрацию СЮа устанавливают колориметрическим методом с тирозином, сумму концентраций СЮ2 и хлорит-иона — иодометрическим методом по количеству выделившегося иода. По разности иодометрического и колориметрического определений можно вычислить содержание хлорит-иона [339]. [c.70]

Определение сахаров в гликонротеине нуждается в подходе, несколько отличающемся от того, который используется при анализе аминокислотного состава белков. Во-первых, все методики количественного определения данного сахара требуют освобонедения моносахарида из его глпкозида либо в отдельной предварительной стадии, либо в общей части используемой аналитической процедуры. Это объясняется тем фактом, что, вообще говоря, единственными функциональными группами, присутствующими в углеводной части гликопротеинов и обнаруживаемыми физическими или химическими методами до гидролиза, являются гидроксильные группы, общие для всех типов сахаров. Конечно, имеются также карбоксильные группы сиаловых кислот, обусловливающие сильно кислотный характер гликопротеинов, содержащих остатки сиаловых кислот. С другой стороны, боковые цепи аминокислотных остатков обычно свободны, сильно отличаются по структуре и реакционной способности и многие из них могут быть обнаружены и определены количественно физическими или химическими методами. Так, измерение поглощения в ультрафиолете применяется для определения тирозина и триптофана с помощью специальных методик можно отличить цистеин от цистина, а аргинин и гистидин можно определить колориметрическими методами, причем все это выполняется на интактном белке. [c.195]

Триптофан обычно определяют в белках, которые пе подвергались гидролизу [165, 186]. Однако в последнее время были сделаны попеки стабилизации его молекулы, а также молекулы тирозина, цистеина и метионина при помощи реакции восстановления, которой предшествовала реакция десульфурации [92]. Кроме того, был разработан количественный метод колориметрического определения аминокислот в гидролизатах, полученных при действии селенитов щелочных металлов [56]. [c.392]

Тироксин почти нерастворим в воде (при рН 4,5) и в органических растворителях, но растворяется в бутиловом спирте при отщеплении иода он дает тиронин. Тироксин устойчив в щелочной среде, однако кислотная или щелочная обработка в присутствии двухлористого олова или станнита приводит к полному разрушению его и образованию тирозина и тиронина. Синтез рацемической формы тироксина был осуществлен в 1926 г. Харинг-тоном и Барджером 227] описан также синтез /-изомера тироксина из /-тирозина [228]. Количественное определение этих трех иодпроизводных тирозина осуществляется колориметрически после предварительного разделения в бутиловом спирте [229] в настоящее время, однако, этот метод вытеснен методом хроматографии на бумаге с применением радиоизотопа иода 230, 2311. [c.133]

С помощью иодиметрического метода можно определять в смеси хлорит и диоксид хлора [8]. По описанной выше методике находят сумму соединений. После колориметрического определения диоксида хлора с тирозином можно рассчитать содержание хлорита. Хлорид, хлорат и хлорит не мешают определению диоксида хлора. В результате проведения интересного исследования Норкис [9] нашел объяснение, почему арсенит в присутствии осмиевой кислоты в гидрокарбонатной среде ускоряет реакцию взаимодействия хлорита с иодидом. По-видимому, механизм процесса следующий арсенит восстанавливает 0з04 до Ма20з04, который в свою очередь восстанавливает хлорит до гипохлорита, а сам окисляется до Оз . Гипохлорит окисляет иодид до иода, который и взаимодействует с мышьяком (П1). Методика, основанная на описанных выше реакциях, успешно использована для определения диоксида хлора и хлорита [10]. Эти же реакции используют и в потенциометрическом методе определения хлорита, гипохлорита, хлората и хлорида, который будет подробно описан ниже. [c.328]

По литературным данным, одределение тирозина в продуктах гидролиза белка и других биологических материалах принято производить колориметрическим методом, основанным на применении реакции Миллона-Бернгарта. Однако в отношении пригодности данного метода определения тирозина суш,ествуют разноречивые мнения. [c.217]

После опробования ряда методов было решено проверить пригодность реакции Миллона-Бернгарта к определению малых количеств тирозина и исследовать возможность применения колориметрического метода для определения тирозина с нингидрином. [c.217]

Прямые методы. 1. Сырую биомассу определяют после осаждения клеток центрифугированием. После центрифугирования отмытых клеток можно определить сухую массу. Оба метода не свободны от довольно больших систематических ошибок. 2. Гораздо большую точность обеспечивает определение общего азота (метод микро-Кьельдаля и микродиффузионный метод определения аммиака), а также определение общего содержания углерода (по ван Слай-ку-Фолчу). 3. В повседневной практике часто определяют содержание бактериального белка. Хорошие результаты дают модификации биуретового метода и другж колориметрические методы. Микрометоды основаны на измерении количества характерных компонентов белка тирозина, триптофана (по Лоури или Фолину). [c.192]

Кроме того, для определения аминокислот предложены следующие методы метод, основанный на бромировании (Уоркеней) колориметрический метод (Фолин) метод сочетания с диазораствором (Ганке и Косслер [244]) и определение с реактивом Милона (Вейс и Томас). Тирозин удается отделить от гистидина, осаждая последний фосфорновольфрамовой кислотой. [c.284]

Онределение тирозина стандартным ионообменным методом обычно не вызывает больших затруднений, не считая возможности разложения тирозина в процессе гидролиза, особенно в присутстви углеводов (см. стр. 128). Было показано, что для белков с очень низким содержанием тирозина, таких, как коллаген и желатин, нужны специальные методы количественного определения, так как наблюдается недостаточное разделение тирозина и фенилаланина [371. Кобетт и сотр. [1121 сравнили величины, полученные нри ионообменной хроматографии, с данными двух других методов — специально модифицированного колориметрического метода, включающего реакцию с а-нитрозо-р-нафтолом, и метода прямого поглощения в ультрафиолетовой области. Последний метод был осуществлен так, как описано для триптофана, причем белок растворяли в щелочи и измеряли оптическую плотность раствора при двух длинах волн. В случае желатина, не содержащего триптофана, оптимальными длинами волн для определения тирозина служат 292 и 304 ммк. Вводится поправка на мутность раствора. [c.149]

Колориметрическое определение тирозина в чистых растворах по методу Миллона-Бернгарта [c.218]

Колориметрическое определение тирозина, меченного С , нингидриновым методом [c.219]

Иодогоргоновая кислота и тироксин. Бранд и Кассель [654] описали сложную колориметрическую диферен-циальную методику для раздельного определения этих аминокислот и тирозина, которая в их руках дала результаты, сравнимые с методом прямой экстракции бутиловым спиртом по Леланду и Фостеру [667] (см. стр. 78). [c.113]

Маркс [123] дал обзор 14 химических методов для определения остаточного хлора в воде и сточных водах. Многие из этих методов либо простые колориметрические (например, для плавательных бассейнов), либо методы, основанные на спектрофотометр рии с использованием хромофорных агентов [118]. Примерами таких агентов являются сирингалдазин, тирозин и Ы,М-днэтил-/г-фенилендиамин (для СЮг и хлорита). [c.621]