фруктоза, определение

Первый раздел Практикума должен помочь студентам освоить методические приемы и основы аналитической биохимии. Он содержит описание основных принципов и методов концентрационного анализа, принятых в биохимии (спектрофотометрического, колориметрического, манометрического), в частности, для количественного определения гликогена, глюкозы, неорганического фосфата, фосфорных эфиров углеводов, молочной и пировиноградной кислот. В раздел включены работы, посвященные анаэробному превращению углеводов. Каждая задача, выполняемая студентом, предусматривает анализ чистоты исходного препарата углевода или его фосфорного эфира, получение ферментного препарата (гомогената или экстракта ткани), постановку биохимического эксперимента, количественную оценку результатов. Количественное определение веществ проводится несколькими методами, результаты сопоставляются. Так, выполняя задание по теме Превращение фруктозо-1,6-дифосфата в молочную кислоту , студент анализирует фруктозо-1,6-дифосфат по фруктозе и по фосфату, молочную кислоту определяет спектрофотометрическим и колориметрическим методами. Подобным образом выполняются работы, связанные с превращением других фосфорных эфиров углеводов, гликогена, глюкозы. [c.5]

Медь, отложенная на окиси церия и двуокиси кремния, применялась [45] в реакциях расщепления, изомеризации, образования кислот, гидрогенизации и гидратации. Определенный интерес представляет сопоставление активности этого катализатора при гидрировании и гидрогенолизе различных углеводов (сахарозы, глюкозы, фруктозы и др.). Глюкоза и фруктоза начинают гидрироваться при 150°С, сахароза — при 180°С, сорбит и глицерин — выше 200 °С. В отсутствие гомогенных добавок катализатор преимущественно ведет процесс гидрирования, в присутствии таких добавок — гидрогенолиз, причем степень расщепления зависит как от природы углевода, так и от количества добавки (гидроокиси кальция). [c.46]

Ионный обмен можно применять для проведения макро- и микроопределений. Для разделения небольших количеств веществ используют ионообменную бумагу или проводят ионный обмен в тонких слоях. Количество анализируемой пробы выбирают в зависимости от последующего метода обнаружения или определения ионов. Для определения ионов после ионного обмена применяют кондуктометрические, полярографические, потенциометрические и радиохимические методы анализа. При проведении ионообменных разделений исследование фракций элюата часто проводят классическими методами анализа. При помощи ионного обмена можно проводить определение различных электролитов. Едва ли можно назвать сочетание элементов, для разделения которых нельзя использовать какой-либо метод ионного обмена [43]. Метод ионного обмена можно применять и для разделения неионогенных веществ после перевода их в ионогенные соединения. В качестве примера можно назвать разделение фруктозы, глюкозы и других сахаров в виде боратных комплексов. [c.381]

Японские ученые исследовали щелочную изомеризацию глюкозы во фруктозу. При этом в качестве катализатора использовали растворы едкого натра различной концентрации. При определенных условиях образуется до 35 % фруктозы. [c.134]

Определение фруктозо-6-фосфата по фруктозе проводят совершенно так же, как и определение фруктозодифосфата (с. 41), но для расчета его количества величину фруктозы, найденную по калибровочному графику, умножают на коэффициент 1,65, если в качестве стандарта была использована фруктоза (1,65=100 60,5). Если в качестве стандарта используют раствор фруктозо-6-фосфата, то при расчете коэффициент не вводят. [c.44]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФРУКТОЗО-1,6-ДИФОСФАТА [c.41]

Определение основано на цветной реакции Селиванова. При нагревании раствора фруктозы или ее эфиров с крепким раствором соляной [c.41]

Специфическая избирательность катализаторов. Исследования каталитических реакций показали, что катализаторы образуют временные промежуточные соединения с реагирующими веществами. Для эффективного действия катализатора необходимо, чтобы он обладал химическим сродством к реагенту. В этом отношении катализаторы обладают специфической избирательностью, особенно ярко проявляющейся у ферментов. Каждый фермент действует на определенный субстрат или на ограниченное их количество, или только на определенный тип химической связи в молекуле вещества так, например, фермент сахароза разрывает в сахарозе глюкозидную связь между глюкозой и фруктозой и эту же связь —в молекуле трисахарида —рафинозы —с образованием дисахарида мелибиозы и фруктозы и т. д. Хотя некоторые системы могут реагировать и по нескольким направлениям, катализа-уоры вызывают ускорение процесса только в каком-либо одном [c.121]

Лиазы являются катализаторами отщепления от субстратов негидролитическим путем определенных групп с образованием двойной связи или с присоединением группы к двойной связи. Одни из них катализируют отщепление воды, другие — углекислоты или аммиака. Фермент альдолаза катализирует расщепление фруктозо-дифосфата на две молекулы фосфотриоз. Многие из них принимают участие в реакциях цикла Кребса. [c.120]

Окраска, образующ,аяся с фруктозофосфатом, менее интенсивна, чем с фруктозой. Интенсивность окраски с фруктозодифосфатом составляет только 52,5% интенсивности окраски свободной фруктозы, а с фруктозо-6-фосфатом — 60,5%, если проводить определение по данной прописи. Метод чувствителен в пределах от 0,05 до 0,7 мкмоль фруктозы в пробе. [c.42]

Эта чувствительная реакция на восстанавливающие сахара позволяет различать а-кетолы и простые альдегиды. Порядок активности участия в этой реакции следующий фруктоза>глюкоза>лактоза> >мальтоза>н-масляный альдегид. Реактив используется также для определения дегидрогеназы в тканях, клетках и бактериях, при изучении прорастания семян и для определения кортизона. [c.541]

Реактивы для определения фруктозо-1,6-дифосфата по фруктозе (с. 42). [c.55]

Реактивы для определения фруктозо-6-фосфата с резорцином (с. 49). [c.62]

Озазоны различных моносахаридов имеют определенные температуры плавления. Это дает возможность отличать моносахариды друг от друга или устанавливать сходство в их строении. В частности, из приведенной выше схемы следует, что фенилгидразоны В-глюкезы и 1)-фруктозы различны по строению, но оба моносахарида образуют один и тот же озазон. И действительно, при нагревании с избытком фенилгидразина как С-глюкоза, так и О-фруитоза дают одно и то же вещество — озазон с темп, плавл. 209° С. Это доказывает, что указанные моносахариды отличаются лишь положением карбонильной группы, а конфигурация групп при 3-м, 4-м и 5-м асимметрических углеродах у них одинакова. [c.238]

Активность альдолазы может быть измерена двумя методами химическим, основанным на определении концентрации продуктов реакции — фосфотриоз (по нарастанию щелочнолабильного фосфорл), и энзиматическим, в сопряженной системе, содержащей помимо альдолазы и фруктозо-1,6-дифосфата также НАД+ и глицеральдегид-З-фосфат-дегидрогеназу или НАДН и глицерол-З-фосфатдегидрогеназу. Скорость альдолазной реакции определяют по нарастанию или убыли НАДН. [c.246]

Анализ чистоты препарата фруктозо-1,6-дифосфата. Изучение его ферментативного расщепления. Определение константы равновесия реакции. Влияние температуры и времени инкубации. [c.503]

Определение фруктозо-1,6-дифосфата может быть проведено пс фосфату после 3-часового гидролиза при 100°С в 1 н. растворе H i или после гидролиза при 100°С в течение 10 мин в 0,2 н. растворе NaOH (с. 496). Определение фруктозодифосфата может быть проведено также по фруктозе. [c.41]

Реактивы для определения фруктозы (с. 41). [c.233]

При недостатке в организме определенных типов А. развивается наследств, заболевание-непереносимость фруктозы. [c.113]

Определение редуцирующих сахаров (по Лэну и Эй-нону). в фильтрате А содержатся редуцирующие сахара (глюкоза, фруктоза и другие монозы, а также дисахариды, обладающие восстанавливающими свойствами,— мальтоза, лактоза и др.) Хотя сахароза тоже переходит в фильтрат, но да я количественного определения ее 1ге-обходиыо подвергнуть гидролитическому расщеплению, инверсии (см. с. 222). [c.221]

Образование О. используют для идентификации углеводов. Для каждого углевода характерна определенная скорость образования О., напр. О. фруктозы выделяется из р-ра за 2 мин, О. глюкозы-за 4-5 мин, О. ксилозы-за [c.332]

Определение глюкозо-6-фосфата может быть проведено по нарастанию неорганического фосфата после щелочного гидролиза. При нагревании в 0,2 н. растворе щелочи в кипящей водяной бане за 10 мин достигается максимум гидролиза. При этом происходит гидролиз и других гексозофосфатов глюкозо-6-фосфат, фруктозо-6-фосфат и фрук-тозодифосфат расщепляются на 65%. Глюкозо-1-фосфаг и глицерофосфат в этих условиях практически не подвергаются гидролизу. [c.40]

При изучении влияния pH и температуры на максимальную скорость превращения 0-глюкоэо-6-фосфата в 0-фруктозо-6-фосфат под действием глюкозофосфатизомеразы [2] были найдены значения рК ионогенной группы активного центра фермента, равные 9,35+0,06 и 8,71+0,11 при температурах 30 и 40° С соответственно. Оценить значение теплоты ионизации найденной ионогенной группы и вычислить ошибку экспериментально определенной величины АЯион- [c.252]

Для определения количества образующегося фруктозо-1,6-фосфата вместо а-глицерол-З-фосфатдегидрогеяазы может быть использована дегидрогеназа 3-фосфоглицеринового альдегида. В этом случае активность фосфофруктокиназы измеряют по скорости восстановления НАД+ (см. определение активности глицеральдегид-З-фосфатдегидро-геназы на с. 253). [c.240]

Осваивая методы определения фруктозо-1,6-дифосфата, полезно определить чистоту препарата его бариевой соли. Навеску, соответствующую 30 мкмоль, растворяют в 5 мл 0,1 н. раствора НС1. 1 мл раствора отбирают для определения фруктозо-1,6-дифосфата по фруктозе. Оставшиеся 4 мл солянокислого раствора бариевой соли фруктозодифосфата используют для получения натриевой соли, хорошо растворимой в воде (см. ниже). Раствор натриевой соли фруктозо-1,6-дифосфата нейтрализуют, доводят водой до 15 мл. В полученном растворе определяют содержание фруктозо-1,6-дифосфата по фруктозе и по фосфату в микромолях, рассчитывают чистоту препарата по фруктозе и по фосфату, сопоставляют данные. Определяют процент потери фрук-тозо-1,6-дифосфата при переводе бариевой соли в натриевую. [c.43]

Определение активности фруктозо-1,6-дифосфатазы. Активность фермента определяют энзиматическим методом по количеству образовавшегося фруктозо-6-фосфата. Метод основан на использовании системы двойного ферментного сопряжения с участием глюкозо-6-фос-фатизомеразы и дегидрогеназы глюкозо-6-фосфата согласно схеме [c.355]

Заполнение проб проводят следующим образом. Во все пробиркт наливают раствор фруктозо-1,6-дифосфата и буфер. Первые три пробирки оставляют при 20°С, а четвертую помещают в термостат при 60°С на 5 мин. Одновременно в тот же термостат помещают небольшое количество приготовленного диализованного экстракта. Большую часть экстракта оставляют при комнатной температуре. Через 5 мин во вторую и третью пробирки добавляют экстракт, стоящий при 20°С, а в четвертую экстракт, стоящий при 60°С. Содержимое пробирок перемешивают и проводят инкубацию по схеме. Затем во все пробы добавляют равный объем 5%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивают и осадок белка удаляют центрифугированием или фильтрованием. В безбелковом растворе проводят определение трио-зофосфатов (в пробах, взятых на анализ, предварительно нейтрализуют трихлоруксусную кислоту) и фруктозо-1,6-дифосфат. [c.64]

Кажущаяся величина константы Михаэлиса для субстратов (фрук-тозо-6-фосфата и АТФ) зависит от pH реакционной среды, в которой проводится определение ферментативной активности и от концентрации второго субстрата. В зависимости от условий эксперимента она может изменяться в широких пределах для фруктозо-6-фосфата — от [c.238]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология