Тонкослойная хроматография ТСХ по сухому слою

Тонкослойная хроматография — разновидность распределительной хроматографии. Разделение проводят на пластинках, покрытых тонким слоем оксида алюминия, силикагеля или другого сорбента, который удерживает неподвижный растворитель. Нижний край пластинки с нанесенной на нее пробой опускают в подвижный растворитель на глубину 5—8 мм. Тонкий слой сорбента может быть свободно насыпан на пластинку или закреплен на ней с помощью гипса или крахмала. Пластинку с закрепленным слоем погружают в камеру вертикально а с незакрепленным слоем — под углом или горизонтально. Для получения хорошо воспроизводимых результатов необходима строгая стандартизация условий проведения опыта. Под этим понимается форма пластинки, толщина сухого сорбционного слоя, величина наносимой пробы, глубина погружения хроматографической пластинки в подвижный растворитель, насыщение камеры парами растворителя, температура, влажность окружающей среды, чистота применяемых реагентов. [c.201]

Тонкослойная хроматография реализуется либо с помощью закрепления сухого слоя пористого мелкогранулированного носителя неподвижной фазы толщиной 0,1—0,5 мм на одной стороне прямоугольной подложки (стеклянной, пластиковой или из алюминиевой фольги), либо на полосках крупнопористой ацетилцеллюлозы. Хроматографический процесс начинается с нанесения вблизи одного из концов пластинки (на старте ) раствора препарата в виде круглого пятна малого диаметра или тонкой полоски так, чтобы раствор полностью впитался пористым материалом носителя. Тем же концом пластинку или полоску погружают в слой жидкого элюента, налитый на дно сосуда прямоугольной формы, следя за тем, чтобы свободный уровень элюента не достигал находящегося на старте препарата (в горизонтальном варианте ТСХ на пластинку накладывают фитиль). Под действием капиллярных сил элюент начинает двигаться по всей ширине пластинки или полоски к противоположному ее концу, фронт его проходит область старта и двигается дальше, а в токе жидкости за фронтом осуществляется знакомый нам хроматографический процесс. [c.459]

Профиль, показанный на рис. 17, был определен благодаря анализу, проводившемуся с помощью газовой хроматографии. Исследовалось содержание растворителя на полосках фольги, покрытых слоем силикагеля. Элюирование с таких тонкослойных пластинок проводили в ненасыщенных сэндвич-камерах без предварительного насыщения сухого слоя, если не считать нескольких миллиметров в области видимого фронта (такая область отчетливо обозначена на рисунке). При пользовании данными пластинками, изготовленными с употреблением фольги, не наблюдаются различия профилей градиента при элюировании в горизонтальной и вертикальной плоскостях. Когда элюирование проводили с двухчасовой передержкой, кривизна, обусловленная фронтальным градиентом, устранялась, слой сорбента оказывался равномерно насыщенным и отмечалось общее увеличение концентрации растворителя в слое на 6%. Последствием такой выдержки пластинки являлось то, что (если даже не учитывать повышенное насыщение всей поверхности) большее количество растворителя (в 1.8 раза) проникало в слой для сглаживания фронтального градиента (4й=1-08 см. уравнение 41а). [c.69]

Размер колонок выбирают непосредственно по данным предварительных опытов по тонкослойной хроматографии. Чем труднее разделить компоненты дайной смеси, тем более длинной должна быть колонка. На рис. 7.13 представлен график, который поможет выбрать необходимую длину слоя адсорбента в колонке. В средних разделениях обычно приходится иметь дело с относительно подвижными веществами (Rf 0,4). Если диаметр колонки составляет 50 мм, то, согласно графику на рис. 7.13, для того, чтобы осуществить разделение 6 г смеси средних соединений, длина колонки должна быть около 300 мм. Еслн же исследуемые вещества более трудноразделяемы ( f 0,1), то для разделения 6 г смеси, согласно данным рис. 7.13, нужно взять колонку длиной около 600 мм. Следует заметить, что графики на рис. 7.13 указывают максимально возможное количество вещества, которое может быть разделено на дайной колонке. Если брать пробы, составляющие всего лишь 0,75—0,5 г от максимальной емкости колонки, то эффективность разделения может быть существенно увеличена. Так, например, пробы массой от 3 до 4,5 г в приведенном выше примере будут разделяться существенно лучше, чем проба массой 6 г. В процессе заполнения колонки ее кран нужно оставлять открытым, чтобы свести к минимуму количество воздуха, захватываемого адсорбентом. Сухой адсорбент медленно засыпают в Колонку, осторожно постукивая по ней или применяя электрический вибратор, как показано на рис. 7.12. [c.441]

Сравнительно недавно появился удобный и быстрый способ так называемой тонкослойной хроматографии на пластинках. На стеклянную пластинку подходящего формата наносят тонкий слой смеси адсорбента, обычно силикагеля, с фиксатором (крахмал или гипс) и водой и высушивают при ПО—120°С. Значительно быстрее и проще приготовлять пластинки, покрытые ровным слоем сухой окиси алюминия. Процесс ведут, погружая один конец пластинки в растворитель под небольшим углом к горизонтали. Можно пользоваться и другими адсорбентами. На таких пластинках удается за 30—90 мин разделить 5—100 у смеси веществ. [c.307]

При выборе растворителя и объема отбираемых фракций может быть рекомендован метод, приведенный в работе [И]. Применяя незакрепленные тонкие слои силикагеля, первоначально находят систему растворителей, в которой наименее полярный компонент разделяемой смеси имеет значение / / 0,5. Тот же растворитель затем применяют и в сухой колоночной хроматографии, причем желательно, чтобы объем отбираемых фракций (мл) составлял одну двадцатую часть от массы адсорбента (г) в колонке. Как правило, если применение определенного растворителя на обычных тонкослойных пластинах приводит к хорошему разделению, то в колоночной хроматографии должен быть применен менее полярный растворитель. Турина [121 предложил метод нахождения оптимального состава системы растворителей в тонкослойной хроматографии, при котором достигается наилучшее деление при проведении наименьшего числа опытов. Ме-, тод основан на общих принципах и может быть применен также и в колоночной хроматографии. [c.215]

Тонкослойная хроматография появилась в то же время, когда хроматографическое разделение на пористых гелях стало стандартным лабораторным методом [84, 85]. Представлялось целесообразным объединить оба метода и сделать 1ем самым тонкослойную хроматографию пригодной для разделения высокомолекулярных соединений, и прежде всего белков. Соответствующие опыты были проведены с сефадексами различных типов. По существу слой набухшего сефадекса представляет собой открытый столбик геля, который отличается от носителя в колонке только тем, что он доступен для манипуляций (например, для нанесения образца или проявления зон). Обычно в тонкослойной хроматографии пользуются пластинками с нанесенным на них сухим носителем [84, 85] движение растворителя осуществляется за счет капиллярных сил при погружении пластинки (чаще [c.84]

Тонкослойные пластинки с незакрепленным слоем сорбента. За последнее время большое распространение получила хроматография на незакрепленных слоях силикагеля (см., например, [4]), когда на стеклянные пластинки с обработанной наждачным порошком матовой поверхностью наносят в сухом виде силикагель без гипса. [c.291]

Сухую четырехгорлую колбу снабжают механической мешалкой, газовым вводом, специальной пробкой и термометром и продувают азотом или аргоном. Шприцем вводят ТГФ (40 мл), гексаметапол (10 мл) и 4-метоксифенилацето-нитрил (1,47 г, 10 ммоль) и охлаждают до -70° С. Перемешивая раствор при -70 С, шприцем добавляют н-бутиллитий (в гексане, 10 ммоль). Поддерживают температуру раствора -70 ° С и снова шприцем вводят раствор циклогексен-2-она (0,96 г, 10 ммоль) в ТГФ (5 мл). После перемешивания в течение нескольких минут быстро добавляют 1 М НС1 (20 мл), и смеси дают нагреться до комнатной температуры. Добавляют эфир и отделяют органический слой, промывают его насышенным водным раствором хлорида натрия, пока промывные воды не станут нейтральными, и сушат. Отгонка растворителя дает, практически с количественным выходом, 2-(4-метоксифенил)-2-(3-оксоциклогексил)-ацетонитрил, который очищают препаративной тонкослойной хроматографией. [c.76]

В тонкослойной хроматографии адсорбентом служит тонкий, равномерный слой (обычно толщиной около 0,24 мм) сухого мелкоизмельченного материала, нанесенного на подходящую подложку, например на стеклянную пластинку, алюминиевую фольгу или пластмассовую тленку. Подвижная фаза движется то поверхности пластинки (обычно под действием капиллярных сил) хроматографический процесс может зависеть от адсорбции, распределения или комбинации обоих явлений, что в свою очередь зависит от адсорбента, его обработки и природы используемых растворителей. Во время хроматографирования пластинка находится в хроматографической камере (чаще всего изготовленной из стекла, чтобы можно было наблюдать движение подвижной фазы по пластинке), которая обычно насыщена парами растворителя. В качестве твердого носителя часто используются силикагель, кизельгур, окись алюминия и целлюлоза для лучшего сцепления с носителем к нему можно прибавлять соответствующие вещества, например сульфат кальция (гипс). Для изменения свойств приготовленного слоя его можно пропитать буферными материалами, чтобы получить кислый, нейтральный или основной слой можно использовать и другие вещества, такие, как нитрат серебра. В некоторых случаях слой может состоять из ионообменной смолы. Такой широкий диапазон различных слоев, используемых в сочетании с разными [c.92]

Смесь 5 г 1,2-0-циклогексилиден-3-0-бензнл-а-Д-ксило-пентадиальдо-1,4-фуранозы [2] и 2,2 г р-нафтиламина растворяют в 100 мл эфира и выдерживают в течение суток при комнатной температуре. Затем добавляют 1,2 г свеже-перегнанной пировиноградной кислоты и смесь выдерживают 30 суток при комнатной температуре. Растворитель затем отгоняют и сухой остаток растворяют в этилацетате и хроматографируют на колонке с окисью алюминия в хлороформе, периодически проверяя отбираемые фракции при помощи тонкослойной хроматографии на окиси алюминия на наличие стартового пятна, после появления которого вводят в колонку смесь этилацетат—этанол—вода 5 3 1 и продолжают элюирование до полного выхода вещества из колонки. Фракции, содержащие стартовый материал, объединяют, промывают 5%-ной серной кислотой и водой, органический слой сушат сульфатом натрия, чистят активированным углем, затем растворитель отгоняют. Сухой остаток растворяют в бензоле при нагревании, упаривают бензольный раствор до 50 мл, охлаждают, выпавшие кристаллы отделяют и сушат. Повторная обработка маточного раствора активированным углем с последующим частичным упариванием дает дополнительные количества вещества, общий выход которого составляет 2,2 г. После перекристаллизации из этилацетата получают бесцветные кристаллы т.пл. 198° (с разложением) [а]д —70° (хлороформ). [c.156]

Фирма AMAG выпускает приспособление, позволяющее осуществить радиальное и круговое тонкослойное хроматографирование высокого разрешения (ВЭТСХ) (рис. 5.8). На рис. 5.9 показано это приспособление (U-образная камера) в разрезе. Растворитель подают на пластинку с постоянной скоростью с помощью шприца, снабженного ступенчатым электроприводом с электронной регулировкой. Пробы для радиальной хроматографии наносят на сухой слой в виде круглых пятен диаметром [c.139]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология