Сухой метод в колоночной хроматографии

Навеску сухого вещества помещают в патрон, свернутый из очищенной от флуоресцирующих примесей фильтровальной бумаги, экстрагируют в аппарате Сокслета в течение 10—12 ч очищенным от флуоресцирующих веществ и перегнанным органическим растворителем — бензолом, диэтиловым эфиром и др. Далее растворитель отгоняют (желательно под вакуумом) прп слабом нагревании на водяной бане. При анализе промыщленных продуктов (нефтяных, сланцевых и продуктов коксохимического производства) навеску от 0,2 до 0,5 г растворяют в 3—6 мл перегнанного бензола (в некоторых случаях с добавлением ацетона) и далее подвергают фракционированию методом колоночной хроматографии. [c.292]

Оценка разделения. Для определения состава пигмента листьев растений Цвет применил метод разделения на колонке, заполненной СаСОд. Он получил окрашенные зоны на сухом наполнителе, которые разделил механически, удалив наполнитель из колонки и разрезав его. Такой способ получения внутренней хроматограммы не типичен для современной техники проведения колоночной хроматографии. Его применяют лишь в особых случаях. Для удобного выделения вещества работу проводят с разъемными колонками или с колонками, снабженными пластмассовыми шлангами, отделяемыми после окончания процесса разделения. В случае разделения окрашенных веществ в самой колонке можно провести качественную оценку разделения (по значению определить ширину зоны и провести полу количественное определение концентраций растворов (применяя эталоны). Для количественного определения необходимо проэкстрагировать вещество из механически выделенных из колонны фракций и затем определить его содержание при помощи какого-либо метода. [c.353]

Этого краткого описания (ниже оно будет развернуто) достаточно для того, чтобы отметить два принципиальных отличия ТСХ от колоночной хроматографии. Во-первых, жидкий элюент мигрирует по слою сухого носителя, смачивая его,— это необходимо для обеспечения действия капиллярных сил. Отсюда следует, что формирование неподвижной жидкой фазы внутри и на поверхности гранул носителя происходит за счет элюента в ходе самого хроматографического процесса. Во-вторых, одна из поверхностей тонкого слоя пористого носителя остается открытой и с нее может идти испарение элюента. Оба отличия играют немаловажную роль как в понимании процесса ТСХ, так и в разработке методов его практической реализации, чему уделено соответствующее внимание в последующих разделах. Что же касается того обстоятельства, что поперечное сечение носителя является не кругом, а очень тонкой и длинной полоской, то оно не играет принципиальной роли в протекании хроматографического процесса при условии, что диаметр гранул мал по сравнению с шириной полоски, а слой носителя однороден и имеет везде одинаковую толщину, так что фронт элюента продвигается с одной и той же скоростью по всей ширине пластинки. [c.459]

Метод разделения веществ, называемый хроматографией в сухих колонках, в настоящее время описан во всех деталях . Этот мощный метод имеет ряд преимуществ перед обычной колоночной хроматографией. Они связаны с повышением разделяющей способности и скорости разделения компонентов изучаемой смеси. Кроме того, этот метод позволяет использовать почти без всяких изменений результаты тонкослойной хроматографии (разд. 3.2). [c.438]

При выборе растворителя и объема отбираемых фракций может быть рекомендован метод, приведенный в работе [И]. Применяя незакрепленные тонкие слои силикагеля, первоначально находят систему растворителей, в которой наименее полярный компонент разделяемой смеси имеет значение / / 0,5. Тот же растворитель затем применяют и в сухой колоночной хроматографии, причем желательно, чтобы объем отбираемых фракций (мл) составлял одну двадцатую часть от массы адсорбента (г) в колонке. Как правило, если применение определенного растворителя на обычных тонкослойных пластинах приводит к хорошему разделению, то в колоночной хроматографии должен быть применен менее полярный растворитель. Турина [121 предложил метод нахождения оптимального состава системы растворителей в тонкослойной хроматографии, при котором достигается наилучшее деление при проведении наименьшего числа опытов. Ме-, тод основан на общих принципах и может быть применен также и в колоночной хроматографии. [c.215]

Сухая колоночная хроматография (СКХ) [36] фактически представляет собой усовершенствованный вариант метода, использованного Цветом. Эти два метода взаимосвязаны. Условия разделения методом СКХ подбирают, проводя хроматографирование на тонких слоях. Главное преимущество СКХ заключается в том, что этим способом можно разделять значительно большие количества веществ (несколько граммов) при меньшей длительности разделения и меньшем расходе растворителей. Основное условие, обеспечивающее получение хороших результатов посредством СКХ, — правильный подбор активности адсорбента. Оксид алюминия и силикагель дезактивируют, добавляя соответственно 3—6 и 12—15% воды (см. гл. 4, разд. 4.2). [c.124]

В настоящее время известно более 100 сортов силикагеля [31], свойства которых могут сильно различаться. Некоторые марки силикагеля предназначаются специально для разделения определенных групп соединений, например липидов, или для специальных методов хроматографии, например сухой колоночной хроматографии [8] . Товарный силикагель обязательно должен быть химически чистым. Ионогенные примеси, которые могут остаться в материале в процессе приготовления, способны вызывать изомеризацию хроматографируемых соединений или каким-либо иным образом нарушать процесс хроматографического разделения. Помимо ионогенных примесей, качество адсорбента снижают также следы органических соединений, особенно если этот адсорбент используют для выделения из многокомпонентных смесей следов соединений, которые затем анализируют масс-спектрометрически. Размеры частиц различных марок силикагеля лежат в пределах от 0,063 до 0,5 мм, плотность его составляет 0,3—0,5 г/см [c.161]

ДЛЯ ввода инертного газа и мембраной в 15 мл безводного ТГФ (в атмосфере азота) растворяют 0,84 мл (6,00 ммоль) сухого диизопропиламина и раствор охлаждают до 0°С. После этого шприцем добавляют 3,44 мл (5,50 ммоль) 1,6 М раствора н-бутиллития в гексане, смесь перемешивают 20 мин при О °С, охлаждают смесью ацетон-сухой лед до -78°С и шприцем медленно вводят 1,00 г (5,00 ммоль) (48)-3-бути-рил-4-изопропилоксазолидинона-2. Реакционную смесь перемешивают 60 мин при — 78 °С и медленно вводят при помоши шприца охлажденный раствор (см. разд. 1.4) 0,75 мл (10,0 ммоль, с1= 1,577) свежеперегнанного пропаргилбромида в 1 мл ТГФ. Смесь перемешивают в течение 8 ч при — 78 °С и затем в течение 8 ч нагревают до комн. температуры. Смесь обрабатывают, вливая ее в насышенный водный раствор КН4С1 (30 мл), разделяют фазы и водную фазу экстрагируют эфиром (3 х 20 мл). Объединенные органические фазы высушивают над М 804 и растворитель отгоняют в вакууме. ГХ-анализ неочишенного продукта (капиллярная колонка 8Е-30 длиной 50 м, давление N2 1 атм, начальная температура 150 С/15 мин, температурная программа 5 "С/мин, конечная температура 270 °С ПИД) дает соотношение диастереомеров 120 1 (время удерживания = 18,23 мин, 19,11 мин). Продукт очишают методом колоночной хроматографии на 50 г силикагеля (размер зерен 0,063-0,200 мм) при элюировании смесью эфир-петролейный эфир (1 3), что дает 0,83 г (70%) продукта алкилирования в виде прозрачного желтоватого масла. [c.489]

Шеффер и сотр. [32] разделили смеси 1-циклогексен-3,4,5-триокси-1-карбоновой кислоты, винной, хинной, малоновой, лимонной и малеиновой кислот с помощью колоночной хроматографии на слабоосновном декстрановом анионите сефадекс А-25 при 25 °С, используя градиентное элюирование уксусной и муравьиной кислотами. Низкокипящие кислоты выделяли из фракций элюата путем выпаривания в вакууме над смесью хлорида кальция и едкого натра (1 1). Сухие остатки экстрагировали 50%-ным раствором метанола и титровали 0,1 н. раствором NaOH. Этот метод использовали для разделения, выделения и анализа кислот в экстрактах корней хлебных злаков. [c.163]

До последнего времени широкое применение находила классическая колоночная хроматография на силикагеле или окиси алюминия. Недавно в химии бора стали использовать сухую колоночную хроматографию. Основными преимуществами этого метода являются хорошее качество и высокая скорость разделения, незначительная степень деструкции твердой фазы под действием водорода (вследствие гидролиза), а также возможность быстрого подбора условий разделения методом ТСХ. Хорошие результаты были получены не только при разделении окрашенных соединений (металлокарбораны, имеющие структуру типа сэндвича), но также и при разделении соединений, поглощающих в УФ-области спектра, при условии проведения хроматографии в кварцевых колонках или в колонках из полиэтилена или полипропилена. Для разделения борорганических соединений пытались использовать гель-проникающую хроматографию [1] и высокоэффективную жидкостную хроматографию [2], однако эти методы требуют дальнейшего усовершенствования. [c.167]

Для правильного подбора элюента применяют метод ТСХ с использованием соответствующей неподвижной фазы. В классической элюентной хроматографии обычно применяют растворители, которые обеспечивают хорошее разделение веществ методом ТСХ при значении Нр, равном 0,1—0,2. В сухой колоночной хроматографии используют растворители, которые обеспечивают хорошее разделеняе в более широком диапазоне Яр (до 1). При разделении больших количеств гидридных соединений бора, восстанавливающих нитрат серебра, не рекомендуется применять четыреххлористый углерод во избежание взрыва. [c.168]

Хорошие результаты получены при разделении нейтральных и ионных металлоценов (т. е. соединений, различающихся величиной заряда на атоме металла), замещенных и незамещенных соединений, металлоценов с разными лигандами или изомеров, различающихся положением атомов углерода. Смеси этих соединений часто интенсивно окрашены, и поэтому их удобно разделять методом сухой колоночной хроматографии. Типичные примеры разделения металлокарборанов приведены в табл. 43.4. [c.172]

В большинстве случаев разделение, достигаемое посредством аналитической ТСХ, можно перевести на микро- или полу-микропрепаративный уровень. Препаративное разделение на тонких слоях чаще всего проводят методами адсорбционной и распределительной хроматографии, тогда как препаративное разделение методом ионообменной или колоночной хроматографии проводится только на колонках. Помимо препаративной тех существуют и другие методы препаративного разделения (например, классическая жидкостная хроматография и особенно высокоэффективная жидкостная хроматография, или хроматография при высоком давлении, см. гл. 4), которые в ряде случаев могут оказаться более эффективными. Методом сухой колоночной хроматографии (СКХ) можно проводить препаративное разделение в таких же условиях, которые применяются при разделении методом ТСХ [36]. Поэтому рекомендуется прежде всего проанализировать достоинства и недостатки различных типов и методов хроматографии и оценить целесообразность их применения для разделения конкретных соединений (устойчивых или неустойчивых, с близкими или значительно различающимися величинами Rf). Выбор метода зависит также от того, какие количества соединений и как быстро необходимо получить. [c.121]

Суспензию готовят, смещивая порощок полимера с вазелиновым маслом, и для получения спектра помещают между двумя пластинками из Na l. Вазелиновое масло поглощает в области 2600—3000 СМ- и 1350—1470 m S поэтому для анализа в этих областях спектра можно применять фторированное масло. Измельченные образцы смещивают с сухим порошком КВг (1—3% от массы КВг) и прессуют таблетки под давлением 500—700 МПа. КВг гигроскопичен и в процессе приготовления образца может поглощать некоторое количество паров воды из атмосферы, что приводит к появлению в спектре полос поглощения при 1640 см и 3400 см . При разделении полимеров методом колоночной или тонкослойной хроматографии с использованием негигроскопичного растворителя в качестве элюента полученные фракции, не выделяя из раствора, также можно смешивать с порошком КВг затем растворитель удаляют испарением и прессуют таблетки. Растворы полимеров при качественном анализе практически не используются. [c.39]

Оксид магния чаще всего применяется для разделения соединений типа каротиноидов и порфиринов. Хроматографические свойства оксида алюминия наиболее подробно исследовал Снайдер [68] . Этот автор нашел, что активность дезактивированного водой оксида магния можно быстро повысить, элюируя его сухими органическими растворителями. Однако после такой обработки возможна необратимая адсорбция некоторых органических, главным образом ароматических, соединений. Этого нежелательного явления можно избежать, используя растворители, содержащие воду. По своим свойствам оксид магния в известной степени похож на оксид алюминия. Основное различие заключается в его большем сродстве к двойным углерод-углерод-ным связям, а следовательно, и к ароматическим соединениям. Для хроматографическо1 о анализа можно использовать собственно оксид магния и различные его комбинации с другими адсорбентами. В колоночной хроматографии обычно применяют оксид магния в сочетании с диатомовой землей, чтобы облегчить элюирование. Николаидес [51] определил условия тонкослойного и колоночного хроматографирования таких смесей восков и стеринов, которые трудно разделить другими методами. Он показал, что разделение веществ на оксиде магния происходит в соответствии с плоскостными размерами их молекул. [c.170]

Системы растворителей, разработанные для ТСХ, могут быть без каких-либо изменений использованы и для колоночной хроматографии, в частности для хроматографии на колонках с оксидом алюминия и силикагелем. При нанесении образцов на колонку необходимо соблюдать некоторые меры предосторожности в силу низкой растворимости порфиринов часто бывает необходимо наносить их из довольно большого объема. В общем случае наиболее подходящими растворителями для этой цели являются хлороформ и дихлорметан. Если образец не концентрируется в самом начале колонки в виде узкой зоны, то для набивки колонки и растворения образца следует использовать бензол или толуол. Если же и эта мера окажется недостаточной, то, возможно, проблему удастся решить с помощью хроматографии на колонках с сухим сорбентом [43]. Этот метод, впервые введенный в практику исследования порфиринов Адлером и др. [124], нашел особенно широкое применение для отделения хлоринов, которые присутствуют в виде примеси в препаратах синтетических лгезо-тетраарилпорфиринов, полученных путем взаимодействия пиррола с бензальдегидом или его производными. [c.227]

В последнее время вместо колоночной хроматографии находит все более широкое применение ВЭЖХ, которая позволяет разделить жирорастворимые витамины (А, О, Е, К), обычно присутствующие одновременно в пищевых продуктах, и количественно их определить с большей точностью. ВЭЖХ облегчает возможность определения различных форм витаминов (витамин А-спирт, его изомеры, эфиры ретинола и родственные соединения), что особенно необходимо при контроле за внесением витаминов в пищевые продукты [61, 84, 97]. Метод ВЭЖХ с успехом был применен для определения ретинилпальмитата в обогащенных продуктах, таких, как сухие завтраки, молоко и молочные продукты, маргарин [59, 61]. [c.301]

Экспериментальное определение коэффициентов распределения может быть осуществлено статическим или динамическим (колоночным) методами. В статическом методе [100] небольшое количество ионита встряхивают с раствором до тех пор, пока не установится равновесие. Для вычисления коэффициента распределения часто достаточно сделать анализ раствора до и после опыта. Если хотят проанализировать также и ионит, то фазы разделяют центрифугированием и проводят анализ ионита без предварительной промывки. Если применяют указанные выше единицы концентрации (т. е. вычисляют весовой коэффициент распределения /), ), то для расчетов нужно знать содержание влаги в ионите. Высушивать ионит перед опытом не рекомендуется, так как это может вызвать в нем необратимые изменения. Поэтому определяют заранее содержание влаги в небольшой навеске ионита, и для последуюпд,их опытов используют образцы ионита с такой же влажностью (например, воздушно-сухие образцы). Если тонкий слой ионита сушат в вакуумном эксикаторе над апгидроном при 60° С, то постоянный вес обычно достигается не более чем за 24 ч [66]. Этот способ следует предпочесть сушке в печи при 105—110° С, так как при этой температуре мон ет произойти разложение ионита. Следует особо подчеркнуть, что сильноосновные аниониты в форме свободных оснований легко разлагаются при сушке, и поэтому их необходимо предварительно перевести в какую-либо другую форму, например хлоридпую. В хроматографии результат не зависит от того, какой метод использовался для сушки ионита и производилась ли сушка вообще, если только ко.личество ионита в колонке выражено в соответствующих единицах (гл, 6). Несмотря на это, стандартизация процесса сушки желательна, так как это облегчило бы сравнение экспериментально полученных коэффициентов расиределения с литературными данными и использование этих данных. [c.83]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология