Хроматографическое пятно размывание

Существенный недостаток количественных методов анализа тонкослойных хроматограмм, основанных на измерении пропускания света, был связан с нелинейной зависимостью сигнала оптического детектора от количества вещества в хроматографическом пятне. Эта нелинейность обусловлена специфическим законом прохождения света в рассеивающей среде, описываемым уравнением Кубелки — Мунка, и неоднородностью пластины по толщине слоя адсорбента. Последнюю можно учесть, измеряя оптические свойства подложки непосредственно в хроматографическом пятне. Использование двухволнового метода спектрофотометрического детектирования, когда излучение одной волны Л поглощается и веществом, и адсорбентом, а другой волны Лг — только адсорбентом, позволяет выделить сигнал, связанный с поглощением излучения только анализируемым веществом. Дальнейшая обработка сигнала детектора в соответствии с уравнением Кубелки — Мунка позволяет линеаризовать зависимость оптического сигнала от количества вещества в ТСХ. Поглощение света адсорбентом может быть учтено также при спектрофотометрическом сканировании пластины на просвет и отражение. Эти принципы реализованы в лучших современных зарубежных денситометрах — флуориметрах. Менее точным, но более простым решением является линеаризация зависимости сигнал — вещество с помощью двойного логарифмирования (с использованием ЭВМ). В результате этих усовершенствований воспроизводимость результатов в современной количественной ВЭТСХ приближается к 1%. Использование двухкоординатного сканирования в случае эллипсовидных пятен (двумерное размывание зон в ТСХ) и многошагового сканирования пятен неправильной формы (дву- [c.370]

Хроматографическое размывание в ТСХ наблюдается как двумерное. В направлении элюции х действуют гидродинамические, диффузионные и кинетические факторы, а в направлении у, перпендикулярном к X, — только диффузионные. Поэтому, сравнивая размывание хроматографического пятна в продольном и поперечном направлениях, можно определить дисперсию о , связанную с неравновесной кинетикой процесса [c.256]

Исследование зависимости времени хроматографического процесса от диаметра зерна пористого сорбента (силикагеля) р и величины пробега элюента при заданном коэффициенте разделения (нанример, Кц = 2) показывает, что существует только одна пластинка с оптимальными величинами (1р и Вв, которая соответствует минимальному времени анализа. Рассмотрим вначале зависимость размывания хроматографического пятна вдоль движения элюента (0 ) от ( р и Дд. Поскольку и = В и, то (4) можно переписать в виде [c.82]

Влияние структуры слоя адсорбента на размывание хроматографического пятна. Структурная неоднородность по толщине адсорбционного слоя вносит дополнительный вклад в размывание хроматографического пятна. Этот вклад можно учесть, расширяя смысловое содержание диффузионных коэффициентов 2) , д и Д/, у таким образом, чтобы они отражали размывание, связанное с объединенной вихревой диффузией. Кроме того, можно рассчитать статистические моменты для уравнения (VII.9) при заданном градиенте по толщине слоя адсорбента. В случае ступенчатого профиля [c.261]

Рис. VII.5. Зависимость размывания хроматографического пятна ДНС-глицина o J—от квадрата толщины слоя при приготовлении слоя из разведенной (сплошные линии) и концентрированной (пунктирные линии) суспензий силикагеля КСК (Rg = 6 см)

Поскольку первый член этого уравнения представляет гиперболическую, а второй — параболическую зависимость от то в целом функция о сначала убывает с уменьшением а затем проходит через минимум. Нетрудно понять, какие физические явления лежат в основе этой закономерности. При уменьшении размера зерна падает сопротивление массопередаче и, следовательно, уменьшается размывание пятна за счет кинетических факторов. Одновременно вследствие увеличения гидродинамического сопротивления слоя уменьшается скорость движения жидкости, увеличивается время опыта, а следовательно, увеличивается диффузия в подвижной фазе. Очевидно, что должен быть такой оптимальный размер зерна, когда суммарное влияние обоих факторов на размывание хроматографического пятна будет минимальным. [c.278]

От с постоянной потока ж. (предполагается, что только диффузия молекул дает вклад в размывание пятна при хроматографическом разделении). [c.138]

Из равенств (УП.Ю, VII.11) видна зависимость размывания хроматографических пятен от времени to. Увеличение в особенности в области малых значений этой величины (левее пунктирной линии на рис. VI 1.1), приводит к существенному уменьшению о х и улучшению разделения хроматографических пятен на пластинке. Таким образом, для повышения эффективности хроматографического разделения при ТСХ необходимо наносить стартовые пятна разделяемых веществ на некотором расстоянии от линии погружения пластинки в растворитель (не менее 2—3 см). [c.259]

Сравнение (11) позволяет высказать ряд соображений, касающихся сущности элютивно-го хроматографического процесса на пластинке, а также зависимости величины размывания пятна Ох, Оу и С ) от параметров опыта. [c.201]

В основе этого лежат следующие физические явления при уменьшении размера зерна надают сопротивление массонереда-че и, следовательно, влияние кинетических факторов на размывание пятна одновременно вследствие увеличения гидродинамического сопротивления слоя уменьшается скорость движения жидкости, увеличивается время опыта, а следовательно, и диффузионное размывание в подвижной фазе. Очевидно, что должен быть оптимальный размер зерна, когда суммарное влияние обоих факторов на размывание хроматографического пятна будет минимальным. [c.83]

При определении микропримесей, когда макрокомпонент идет первым, выгодно для уменьшения концентрационных эффектов понизить концентрацию макрокомпонента в максимуме. Для этого используют метод г с размыванием хроматографического пятна в поперечном направлении. Последнее осуществляется при использовании тонкослойных пластинок такой геометрической формы, когда в определенной зоне поток элюента направлен под углом к направлению движения разделяемых компонентов. Эти условия, например, достигаются, когда сорбент нанесен на пластинку в виде конуса с вершиной в точке старта (рис. 2). [c.87]

Известно, что вид изотермы адсорбции определяет форму хроматографической зоны [31]. Для слабой адсорбируемости (R 1) характерна вогнутая изотерма адсорбции. В этом случае нри увеличении концентрации хроматографическое пятно вытягивается вниз. Для сильной адсорбируемости R 0) характерна выпуклая изотерма адсорбции. Здесь при увеличении концентрации хроматографическое пятно вытягивается вверх. При Rf Vg изотерма адсорбции близка к линейной и форма хроматографического пятна мало зависит от концентрации (рис. VIII.15). Двумерное размывание в ТСХ приводит к дополнительным концентрационным эффектам. По бокам хроматографической зоны концентрация вещества за счет размывания уменьшается и скорость его движения определяется коэффициентом распределения, иным, чем в центральной зоне. В результате пятно приобретает заостренную форму острием вверх — при адсорбционной и острием назад — при осадительной ТСХ (рис. VIII.16). [c.305]

Форма хроматографического пятна в ТСХ полимеров зависит также от особенностей вязкого течения раствора полимера по пластинке. В центре пятна скорость растворителя минимальна. В периферийных областях она увеличивается и достигает максимума в промежутках между хро1матографическими пятнами. В результате пятно приобретает каплеобразную форму (рис. VIII.18), характерную для струи, образующейся при обтекании препятствия вязкой жидкостью [56]. При этом задняя граница пятна дополнительно обостряется набегающим потоком жидкости, который препятствует диффузионному размыванию пятна, в то время как в передней части зоны скорость диффундирующих молекул [c.305]

Для определения МВР полимеров, в особенности узкодисперсных, с помощью ТСХ необходимо исключить хроматографическое размывание из распределения полимера по пластинке. Для этого был разработан метод, основанный на двумерном хроматографировании полимера в одной системе растворителей [35, 55], в результате чего хроматографическое пятно полимера располагается по диагонали пластинки (рис. 20). Если параллельно с образцом (1) прохроматографировать другой образец (2) одномерно, то распределение на пластинке образца 2 в направлении В можно рассматривать, как стартовую зону образца 1 при хроматографировании в направлении Б. При денситометрии обоих пятен в этом направлении можпо получить дисперсию хроматографического размывания (а р) образца (1) в направлении Б как разность дисперсий распределения концентрации в денситограммах образцов 1 и 2 [c.156]

Можно описать действие продольных и кинетических факторов, приводящих к размыванию пятен в виде коэффициентов квазидиффузии продольной — 1), и кинетической — [6]. Значительно больший физический смысл имеет предложенное Бреслером [7] описание кинетических факторов размывания при помощи параметра запаздывания т, показывающего время запаздывания при установлении равновесия между подвижной и неподвижной фазами. Если описать факторы размывания, действующие вдоль и поперек направления движения растворителя в виде коэффициентов квазидиффузии и О у, то распределение концентрации вещества в хроматографическом пятне в соответствии с законами диффузии и в согласии с экспериментальными данными может быть записано в виде двумерного распределения Гаусса [c.198]

В том случае, если при определении микропримесей макрокомпонент продвигается первым вслед за фронтом растворителя, иногда используют метод повторной хроматографии или метод с размыванием хроматографического пятна в поперечном направлении, которое достигается применением слоя сорбента в виде треугольника с вершиной в стартовой точке. При движении по такому слою поток подвижной фазы направлен под углом к направлению движения разделяемых компонентов, что приводит к образованию узких поперечных зон и к их резкому разграничению в области широкой части слоя. Такой способ проведения хроматографиро- [c.18]

Разумно было бы предположить, что на 5Ы влияют те же параметры, что и на высоту тарелки (или аналогичные им) и что зависимость оказывается похожей (с нелинейным воздействием на SN). Как видно из рис. 48 (с графиками, полученными на основе данных, подсчитанных по уравнению 33), очень важным фактором является ширина исходного пятна Ьо. Число разделений быстро увеличивается при снижении Ьо. а при практической работе удается достигнуть величин Ьо<0.01Кг (в ед. Кг) [52]. С другой стороны, как показывает этот рисунок, значений =10 не удается достичь при столь большой ширине исходного пятна, как в 0.08Кг (в ед. Кг), сколь малым бы впоследствии не оказывалось размывание пятен в процессе хроматографического разделения на пластинке. [c.136]

Величина Я включает среднюю ВЭТТ хроматографической системы (колонка, пластинка) — Я и ВЭТТ, связанную с дисперсией экстраколоночного размывания — Сту е (КХ) или дисперсией стартового пятна (ТСХ) — о- [c.49]

При исследовании узкодисперсных полимеров необходимо, кроме того, произвести коррекцию распределения Q Rf) на хроматографическое размывание, например, с помощью двумерного хроматографирования (рис. УП1.28) [3]. При этом хроматограмма полимера после хроматографирования в первом направлении, уже свободная от распределения по молекулярной массе (составу) в поперечнике пятна, может рассматриваться как стартовая зона для хроматографирования во втором направнении. Разница дисперсий финишной а и стартовой зоны а в направлении второго хроматографирования представляет собой дисперсию хроматографического размывания о р. Коррекцию на размывание можно ввести простейшим способом, вычитая ее дисперсию из дисперсии [c.320]

При малых величинах Ду., т. е. при малом содержании вещества в подвижной фазе и уменьшении времени анализа, размывание пятна минимально и одновременно в этих условиях увеличивается максимальная концентрация вещества в пятне. Отсюда следует вывод, что при определении микропримесей нужно проводить хроматографический процесс при больших скоростях элюции и выбирать такие условия, чтобы микропримеси был достаточно мал. [c.277]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология