Аминокислоты загрязнение при получении

Промежуточный связанный с полимером пептид после удаления растворимых реагентов и побочных продуктов не нуждается в очистке, что позволяет избежать традиционных процедур очистки (перекристаллизация, хроматографирование) и связанных с ними потерь. В принципе такой подход приемлем только в том случае, если все последовательные синтетические реакции идут количественно. Поскольку этого вряд ли можно достичь, метод синтеза на твердом носителе неизбежно приводит к окончательному продукту, загрязненному более короткими пептидами, в которых не-хватает одной или более аминокислот (дефект последовательности). Подобным же образом побочные реакции могут привести к загрязнению пептидами с искаженной и частично выполненной последовательностью. Поэтому успех синтеза на твердом носителе полностью зависит от того, возможно ли очистить конечный продукт от близких побочных продуктов. Для достижения даже умеренной чистоты продукта, получаемого на смоле, необходима очень высокая эффективность реакций образования пептидной связи. Так, для получения декапептида с правильной цепью с выходом 80% необходимо, чтобы выход на каждой стадии образования пептидной связи был около 98 % В случае пептида с 20 остатками аминокислот средний выход увеличивается до 99%. В обоих случаях остающиеся 20 % связанного со смолой пептида имеют более короткие пептидные цепи, в основном на одну или две аминокислоты меньше. Поэтому проблема очистки становится очень трудной. [c.407]

Насколько чувствителен и точен для анализа аминокислот метод ионообменной хроматографии, можно судить по исследованию отпечатка пальцев на аминокислоты. Кончики пальцев погружали на 15 с в 0,5 мл раствора цитрата натрия, а затем пропускали раствор через анализатор аминокислот. Для различных лиц был получен характерный и довольно постоянный состав аминокислот, что указывает на источник загрязнений при экспериментах. Это заставило предположить, что сообщения об обнаружении аминокислот в метеоритах лишь результат загрязнения образцов при работе с ними [90]. [c.222]

В производственных процессах получения белковых препаратов, аминокислот и липидов промышленные стоки делятся на условно-чистые и загрязненные. [c.428]

Методы выделения, несмотря на сопряженные с. ними трудности и дороговизну, широко применялись для получения /низоме-ров. Однако в. последнее время в области синтеза и разделения рацематов достигнуты весьма большие успехи и положение, пови-димому, изменилось. Первоначальное получение рацемического соединения теперь следует уже считать преимуществом, так как при этом можно одновременно получить оба активных изомера. Кроме того, вероятность загрязнения синтетических соединений посторонними аминокислотами -является меньшей, чем вероятность загрязнения природных продуктов. Однако в некоторых случаях все еще имеет смысл пользоваться методами выделения. Полное описание этих методов, а также описание испытаний аминокислоты на чистоту, можно найти в обзоре Данна [282] . [c.141]

Высушенный продукт, содержащий хлоргидрат -аминокислоты, поваренную соль и хлористый аммоний растворяют в абсолютном спирте, осадок неорганических солей отфильтровывают и фильтрат упаривают на водяной бане. Полученный таким образом хлоргидрат аминокислоты все же обычно бывает загрязнен небольшими количествами неорганических солей, и для полной очистки его необходимо дважды перекристаллизовать из абсолютного спирта. После перекристаллизации получается совершенно чистый продукт, который дает при анализе точные данные. [c.370]

Метиловый эфир — крупные, блестящие призмы (из лигроина) легкО растворимы в спирте, эфире, бензоле, ацетоне и в разбавленных минеральных кислотах в лигроине на холоду трудно растворим, при нагревании — лучше. Легко гидролизуется при кипячении со щелочью до соли -аминокислоты. При многодневном стоянии со спиртовым раствором аммиака переходит в амид -( -нафтил)- -аланина. Спиртовый раствор, отфильтрованный от небольших загрязнений, после отгонки спирта дал около 65% не совсем чистого амида с т. пл. 142—143°. Перекристаллизация из воды повысила т. пл. до 143,5—144,5°. Анализ на азот показал, что полученное соединение не совсем однородно. [c.425]

На ранних этапах изучения инфекционной РНК ВТМ важно было установить отсутствие в ней вирусного белка с большей точностью, чем это позволяет чувствительность описанных методов. При использовании стандартных методов выделения нуклеиновых кислот содержание белка в выделенном препарате редко бывает ниже 1 %, а в случае ВТМ это соответствует комплексу одной молекулы РНК ВТМ с одной субъединицей оболочечного белка. Однако если выделять РНК в присутствии бентонита, то загрязнение препарата белком значительно снижается. А в случае ВТМ содержание примеси можно снизить еш,е больше (до 1 белковой субъединицы на 20—50 молекул РНК), если использовать метод реконструкции вируса (см. ниже). Определение следовых количеств примесей всегда сопряжено с трудностями методического характера, а достоверность результатов, полученных с помощью различных тестов на минимальных концентрациях веществ, сомнительна. Для определения примеси белка в препаратах вирусных нуклеиновых кислот были поставлены опыты с радиоактивной меткой ( 8) белка. Все, что удалось извлечь из этих опытов, сводится к тому, что содержание остаточного белка, судя по количеству метки, соответствует 0,04% (при пересчете на содержание серы в белковой оболочке ВТМ). Действительно, то соотношение аминокислот, которые в следовых количествах были обнаружены в препаратах нуклеиновых кислот, не соответствует количественным соотношениям этих же аминокислот в белковой оболочке. Тот факт, что препараты, содержащие 0,04 и 1% белка, не различаются по своей инфекционности (на 1 мг РНК), убедительно доказывает, что инфекционность — свойство, присущее вирусной РНК [142, 455]. Положение это убедительно было доказано только для РНК ВТМ. Однако нет никаких оснований сомневаться в том, что вывод этот носит общий характер и что инфекционность всех вирусов заключена в их нуклеиновых кислотах. [c.179]

К важнейшим отраслям биоиндустрии (рис. 1.1) следует отнести некоторые отрасли пищевой промышленности (широкомасштабное выращивание дрожжей, водорослей и бактерий для получения белков, аминокислот, витаминов, ферментов) сельское хозяйство (клонирование и селекция сортов растений, производство биоинсектицидов, выведение трансгенных животных и растений) фармацевтическую промышленность (разработка вакцин, синтез гормонов, антибиотиков, интерферонов, новых лекарственных препаратов) экологию — защиту окружающей среды и устранение загрязнений (очистка сточных вод, переработка хозяйственных отходов, изготовление компоста и др.). [c.7]

Однако такое распределение не дает точного представления об очень важной фракции растворимого азота, которую наблюдали многие исследователи. В неопубликованном сообщении Фо-конно и Пион представили распределение азота в картофеле и свекле. Их результаты, приведенные в таблице 6Г.З, позволяют выяснить масштабы и значение загрязнений, создаваемых жидкими отходами крахмальных и сахарных заводов. Они показывают, что значительная часть азота клубней представлена небелковым азотом (преимущественно свободные аминокислоты) [5]. Однако эта фракция плохо изучена из-за нестабильности во времени, о чем свидетельствует анализ клубней. Фицпатрик и др. [18] сообщили, что в процессе прорастания клубня происходят изменения, которые охватывали весь набор белковых веществ. Тем не менее, учитывая питательную важность этой фракции, проводили сравнение [36] нескольких методов ее оценки. Сделан вывод о том, что эта фракция варьирует в зависимости от клонов, условий и мест выращивания это затрудняет сравнение результатов, полученных в неконкретизированных условиях. [c.275]

При глубоком кислотном гидролизе возможно частичное или полное разрушение аминокислот, сопровождаемое образованием значительного количества летучих аминов и карбонильных соединений. Для предотвращения этого выбирают мягкие режимы гидролиза в частности гидролиз проводят в атмосфере инертного газа, добавляя антиоксиданты, тиоспирты и используя сернистую кислоту. Однако для получения биофлокулянтов разрушение клеточных оболочек и макромолекул биополимеров предпочтительнее регулировать изменением количества добавляемой кислоты, температуры и продолжительности обработки. Способы, основанные на усложнении этого приема и добавлении других реагентов, менее приемлемы для практической реализации. Следует отметить, что при использовании минеральных кислот и особенно разбавленной серной кислоты наблюдается коррозионное разрушение аппаратуры, приводящее к загрязнению кислотного гидролизата различными химическими и механическими примесями [105]. [c.58]

Нет сомнения в том, что из гидролизатов белков могут быть получены высокоочищенные Ь-аминокислоты. Тем не менее продажные препараты аминокислот зачастую загрязнены аминокислотными примесями, которые могут быть источником экспериментальных ошибок. В связи с этим микробиологи при приготовлении сред для определения аминокислот посредством бактерий нередко предпочитают применять синтетические ВЬ-аминокислоты, а не Ь-изомеры, выделенные из белковых гидролизатов. Можно привести следующие примеры часто встречающихся загрязнений в полученных из белков препаратах лейцина и глутаминовой кислоты часто содержатся метионин, а в препаратах глутамина — аргинин и аспарагин препараты триптофана бывают загрязнены тирозином, а препараты тирозина — цистином. Выделенный из гидролизатов изолейцин обычно содержит лейцин, и наоборот. Развитие современных хроматографических методов в значительной степени упростило задачу выделения аминокислот, и повсеместное применение этих методов, несомненно, улучшит качество продажных препаратов аминокислот. [c.91]

Небольшие порции каждой из полученных фракций анализируют методом высоковольтного электрофореза на бумаге, у условно чистых пептидов определяют Ы-концевую аминокислоту и иногда частичную аминокислотную последовательность по методу Эдмана в дансильном варианте (гл. 11). Из фракций, содержащих гомогенные по всем показателям пептиды, отбирают аликвоты на аминокислотный анализ, после чего их лиофилизуют. Крупные пептиды (20—50 остатков), даже чистые, часто проявляются на электрофореграммах в виде диффузных полос в отличие от небольших фрагментов, получающихся при их гидролизе, образующих четкие зоны при электрофорезе. Это позволяет при повторной фрагментации небольшой порции материала из условно чистых пиков хроматограммы обнаружить с помощью электрофореза наличие в них минорных компонент, не регистрируемых другим путем. Крупные пептиды, загрязненные примесями, могут быть успению очищены на ДЭАЭ-целлюлозе, хотя выходы при этом бывают довольно низкими. Поскольку для установления или контроля аминокислотной последовательности крупного пептида, как правило, необходимо проведение дополнительного гидролиза, целесообразно две трети очищенного материала оставить для этих целей. Даже [c.353]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология