Амилаза инактивация

Термолабильность ферментов т. е. инактивация их, связанная с разрывом полипептидных связей при повышении температуры,— денатурация белков, приводит к появлению оптимума температурного действия. С ростом температуры увеличивается скорость ферментативной реакции, но увеличивается и инактивация фермента. Поскольку белки являются амфотер-ными электролитами, для ферментов характерен также оптимум pH. Так, например, оптимум действия пепсина лежит в зоне pH = 1,5 —2,5, трипсина —8—11, сахаразы, выделенной из. дрожжей, — 4,6—5,0, сахаразы из кишечника — 6,2, амилазы из слюны или поджелудочной железы — 6,7—6,8 и т. д. Некоторые ферменты могут иметь различную величину оптимума pH для разных субстратов. Так, оптимум pH пепсина несколько меняется для разных белковых субстратов, тогда как карбогидразы [c.249]

Оптимальная температура для действия амилаз не совпадает с оптимальной температурой для сохранения их активности. Частичная инактивация амилаз при осахаривании компенсируется или даже перекрывается ускоряющим действием температуры. Так как в первой стадии осахаривания крахмал гидролизуется не полностью и гидролиз продолжается при сбраживании сусел, то для сохранения активности температура в первой стадии осахаривания не должна превышать оптимальную, лучше если она будет несколько ниже ее. [c.181]

Инактивация амилазы при действии высоких температур происходит не мгновенно, а в течение некоторого времени. Так, налример, на кривых рис. 75, показывающих ослабление амило- [c.204]

Процессы очистки и фракционирования вещества через полупроницаемые перегородки могут быть значительно ускорены применением электродиализа. Здесь, однако, надо всегда иметь в виду лабильность ферментов, возможность их больших потерь вследствие инактивации. В любом случае процесс должен протекать при точно заданных оптимальных для данного конкретного фермента или ферментного комплекса условиях — температуры, pH среды, плотности тока, материала мембраны. Условия для каждого случая применения электродиализа должны быть особо тщательно проверены с обязательным выявлением денатурационных потерь после проведения процесса. Особенно важно предотвращать имеющее место при электродиализе подкисление растворов, в том числе местное. В частности, амилазы грибов чрезвычайно чувствительны к подкислению, например до pH 2,5—3,0. [c.188]

Обнаружение, выделение, очистка и изучение свойств фермента зависят прежде всего от наличия достаточно точного и быстрого метода определения активности фермента, а также подходящего метода определения общего белка. Точное определение активности фермента на ранних стадиях очистки часто бывает сопряжено со значительными трудностями, поскольку посторонние ферменты, присутствующие в препарате, могут конкурентно действовать на субстрат. Например, в присутствии АТФ-азы затруднено определение АТФ-зависимых синтетаз, а присутствие р-амилазы мешает определению а-амилазы. Многих трудностей, связанных, например, с подавлением активности продуктами реакции, инактивацией фермента и изменением степени его насыщения субстратом, можно избежать, если измерять начальные скорости реакции. [c.98]

Для определения активности а-амилазы две равные небольшие навески препарата ферментов (соответствующие примерно Vio—V20 общего веса полученного осадка ферментов) переносят в конические колбы емкостью 100 мл, приливают по 5 мл воды и растворяют ферменты. К раствору добавляют около 20 мг уксуснокислого кальция, который предохраняет от инактивации а-ами-лазу. Растворы в колбах нагревают в течение 15 минут на водяной бане при температуре 70° (необходимо строго следить за температурой допускаются колебания не более 0,5°), затем колбы быстро охлаждают под краном, а-амилаза более термолабильна и при таком прогревании почти не теряет свою активность, а -амилаза в этих условиях полностью инактивируется, поэтому в дальнейшем распад крахмала будет осуществляться под действием только а-амилазы. Так как оптимум pH равен 5,5—5,8, то после охлаждения в колбы добавляют по [c.150]

Впервые русскими учеными К. М. Кульпсоном и М. И. Граменицким было установлено, что тепловая инактивация некоторых ферментов (пероксидаза и амилаза) является при определенных условиях в известной степени обратимым процессом. [c.117]

Практически такой случай может быть при выдувании разваренной массы, температура которой 100— 105°, в осахаренную массу, содержащую амилазу. В месте падения горячей массы должно бы происходить инактивирование амилазы однако этого не происходит, потому что соприкосновение мгновенно, так как температура разваренной массы сразу же снижается при смешивании ее с осахаренной массой. При этом главное значение имеет распыление массы, так как чем мельче частицы, тем быстрее они смещиваются и охлаждаются. Инактивация амилазы объясняется термической коагуляцией белков. [c.204]

Рис. 75. Кривые инактивации амилазы ячменного солода при выдерживании разваренной массы при различных температурах (по Д. Н. Климовско.му и Лосеву).

При таком методе охлаждения главная опасность заключается в инактивации амилазы в момент смешивания массы с содержимым чана. Для предупреждения этого масса должна быть как можно лучше размельчена, а размешивание ее должно быть достаточно энергичным, чтобы падающие частицы охлаждались почти мгновенно в таких условиях исключается инактивация амилазы даже при высокой температуре разваренной массы. Охлаждение массы за счет просасывания воздуха нежелательно, так как при этом в нее попадают посторонние микроорганизмы. [c.213]

Металл, благодаря способности образовывать хелатные комплексы, обеспечивает стабильность макроструктуры нативных белков-ферментов, необходимой для проявления их каталитической активности. Участие металла в поддержании макроструктуры фермента хорошо видно на примере алкогольдегидрогеназы. Этот фермент содержит в молекуле четыре атома цинка, причем удаление цинка приводит не только к инактивации, но и к диссоциации фермента на четыре неактивные субъединицы. В случае а-амилазы атомы кальция связывают несколько субъединиц белка в каталитически активный полимер. [c.244]

В области инженерии белков усилия направлены на изменение термостабильности ферментов, что весьма важно для их практического использования. Так получен термолабильный химозин (ренин), употребляемый в сыроварении. После заверщения коагуляции молока с помощью химозина требуется его быстрая инактивация, чему и способствует полученная модификация белка. Ведутся работы по созданию термостабильной а-амилазы (для осахаривания крахмала) и протеазы, используемой в стиральных порошках. Инженерия белков находится на начальном этапе своего становления. В будущем можно ожидать создания ферментов с измененной специфичностью. [c.163]

Хироми с сотр. [7] предложил кинетическое решение для совместного или последовательного действия двух ферментов, эндо-и экзотипа (Е) и Ег соответственно) на линейный гомополимер со степенью полимеризации N. Под последовательным здесь понимается такое действие, когда эндофермент Е1 катализирует деградацию полимера до определенной глубины превращения, затем его действие прекращается (например, путем быстрой инактивации), и в действие вступает экзофермент Ег. Подобная последовательность действия используется в промышленном производстве глюкозы в качестве основного продукта из крахмала, когда а-амилаза в течение нескольких минут при 95—105°С разжижает крахмал (при этом быстро термоинактивируется) и затем полученная смесь мальтодекстринов обрабатывается глюкоамилазой. В самом общем виде уравнения выглядят следующим образом [c.123]

Чан имеет чашеобразную форму, снабжен змеевиковой поверхностью охлаждения н мешалкой. На крышке чана расположены привод мешалки, вытяжная труба, штуцец для подачи солодового молока и колпак, под которой подведена выдувная труба разваренной массы. В нижней части имеются штуцер для выпуска сусла и канализационный штуцер. Разваренная масса, ударяясь о колпак, разбрызгивается и равномерно распределяется по поверхности, чем исключаются местные перегревы и инактивация амилазы. [c.192]

Отсутствие, нарушение экскреции или инактивация фер-ментрв,ответственных за гидролитическое расщепление углеводных, белковых и жировых субстратов, которые являются источником энергии для организма, приводят к многообразным в своих проявлениях расстройствам процесса пищеварения. Введение лечебных доз ферментных препаратов, содержащих амилазу, протеиназу, липазу, лактазу, инвертазу, целлюлазу, пектиназу, фосфатазу и другие, призвано компенсировать врожденный или приобретенный ферментный дефицит, имеющий место при той или иной патологии [2, 65]. [c.171]

Наиболее удобной для этой цели оказалась амилаза плесневых грибов. Она значительно превосходит амилазу, полученную из растительного сырья или бактерий. Низкая температура инактивации а-амилазы грибов (около 70°С) позволяет применять этОт фермент в значительных количествах без заметной декстри-низации крахмала при выпечке. Благодаря значительной активности удается быстро получить требуемое количество сахара, после чего фермент сразу инактивируется. Бактериальные же [c.226]

Следует отметить, что биохимические процессы зачастую сопровождаются весьма значительными объемными эффектами. Так, например, по данным Хейманна [89], при термической денатурации некоторых белков объем возрастает на 80—140 см Ыоль. о означает, что равновесие денатурации белков очень сильно зависит от давления можно также полагать, что и объемный эффект активации будет достаточно большим, чтобы вызвать существенное замедление термической денатурации с повышением давления. Действительно, бактериальный вирус Т5 при 68° С и атмосферном давлении инактивируется практически полностью за 60 мин при 490 атм инактивация протекает за это же время всего на 50% [90]. По данным Судзуки и Китамура [91], изучавших влияние давления на термическую инактивацию фермента альфа-амилазы, при давлении ниже 1000 атм инактивация имеет положительный [c.236]

Так как осахаренная масса имеет довольно сильную буферную систему, то >в редких случаях появляется щелочная реакция, но титруемая кислотность массы значительно понижается. Практически можно отметить, что вода, употребляемая для разваривания зерна, при жесткости свыше 12 мг-экв/л должна подкисляться серной кислотой или фильтратом барды. Вода, употребляемая для приготовления солодового молока, должна подкисляться при жесткости свыше 8 мг-экв/л. Наличие в ней кальциевых солей желательно, так как ионы кальция предотвращают инактивацию а-амилазы при повышенной температуре. Жесткость воды при замачивании зерна для солодоращения не должна превышать 12 мг-экв/л. При рассиропке патоки жесткость воды не имеет значения, так как сусло подкисляют серной кислотой. [c.32]

Другой особенно активный штамм Asp. niger S4-IO-IO-III выведен тем же автором при помощи ультрафиолетового облучения. Он почти не образует ковнднй "(имеются лишь единичные, редкие) рост его замедлен на агаре образует ярко-желтую колонию без конидий, с радиальными складками. В агар выделяет много ярко-желтого пигмента. При глубинном выращивании в лабораторных условиях на барде с 2% муки и 0,25% магнезита обладает активностью до 2000—2200 ед. ДС, 600— 700 ед. МС и 10—24 ед. АС. Этот штамм наиболее активный из имеющихся штаммов, однако он имеет существенные недостатки, которые не. позволяют широко применять его в производстве 1) отсутствие конидий задерживает первую стадию размножения в производстве (пробирка-маточник) 2) медленный рост глубинной культуры в производственных условиях (72—84 часа) уменьшает производительность амилазного цеха 3) способность сильно подкислять среду до полного накоплени51 фер.ментов приводит к частичной инактивации а-амилазы, так как pH готовой глубинной культуры часто снижается до 4—3,8. [c.149]

Осахаривание крахмала, как и всякая химическая реакция, ускоряется при повышении температуры. Но поскольку в основе реакции лежит катализ, скорость ее зависит также и от состояния катализатора, в данном случае а.милаз, которые относятся к белковым телам, коагулирующим при высокой температуре. В коагулированном состоянии амилаза неактивна. Поэтому скорость реакции осахари/вания при повышении температуры возрастает лишь до известного предела, после которого амилаза начинает коагулировать и инактивируется. Когда инактивация достигнет заметных размеров, скорость реакции понижается при температуре полной инактивации амилазы реакция прекращается. [c.203]

Вопрос о выборе оптимальной температуры процесса осахаривания следует решать исходя из следующих соображений. Учитывая, что процесс осахаривания продолжается в бродильном чане, температура осахаривания не должна превышать предела, после которого наступает инактивация диастаза. Такой температурой считается 56°. Низкая температура осахаривания (40—50°) нежелательна из-за возможности накопления некоторых видов бактерий, для которых втот температурный интервал является оптимумом. С точки зрения стерильности процесса и частичной клейстеризации нерастворенного крахмала сырья и солода, желательно поддерживать более высокую температуру. Поэтому 15 периодическом процессе температуру осахаривания несколько повышают против оптимума, доводя ее до 60—62°, в том случае, если в осахаренной массе имеются сахара, декстрины и азотистые соединения, оказывающие защитное действие на амилазу. [c.205]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология